atividade da creatina quinase no cérebro de ratos jovens e

UNIVERSIDADE DO EXTREMO SUL CATARINENSE - UNESC
CURSO DE FARMÁCIA
DAIANA PIZZOLO PEZENTE
ATIVIDADE DA CREATINA QUINASE NO CÉREBRO DE RATOS
JOVENS E ADULTOS ESPONTANEAMENTE HIPERTENSOS APÓS
ADMINISTRAÇÃO AGUDA E CRÔNICA DE METILFENIDATO.
CRICIÚMA, JUNHO DE 2010.
Atividade da creatina quinase no cérebro de ratos jovens e adultos
espontaneamente hipertensos após administração aguda e crônica de
metilfenidato.
Daiana P. Pezente 1,2, Gabriela K. Ferreira,1,2, Emilio L. Streck1,2*
1
Laboratório de Fisiopatologia Experimental, Programa de Pós-graduação em Ciências da Saúde,
Universidade do Extremo Sul Catarinense, Criciúma, SC, Brasil;
2
Laboratório de Neurociências, Programa de Pós-graduação em Ciências da Saúde, Universidade
do Extremo Sul Catarinense, Criciúma, SC, Brasil;
Correspondente: Prof. Emilio L. Streck, Laboratório de Fisiopatologia Experimental,
Universidade do Extremo Sul Catarinense, 88806-000, Criciúma, SC, Brazil. Fax: +55 48 3341
2644. E-mail: [email protected]
Atividade da creatina quinase no cérebro de ratos jovens e adultos
espontaneamente hipertensos após administração aguda e crônica de
metilfenidato.
: metilfenidato e creatina quinase.
Resumo
O déficit de atenção / hiperatividade (TDAH) é uma síndrome neuropsiquiátrica, altamente prevalente
na infância, que se caracteriza pelo comprometimento da atenção, atividade motora excessiva e
impulsividade. Na farmacoterapia o uso de medicamentos psicoestimulantes como o metilfenidato, é
rigorosamente o tratamento farmacológico mais aceito para pacientes com TDAH. A Creatina quinase
(CK) desempenha um papel importante na regeneração de ATP nos tecidos que consomem muita
energia, tais como cérebro, músculo esquelético e músculo cardíaco, onde ele funciona como um
sistema de tamponamento eficaz dos níveis de ATP celular. No presente estudo, nós avaliamos a
atividade de CK no cérebro de jovens e adultos de ratos espontaneamente hipertensos (SHR), um
modelo animal de TDAH, após a administração aguda ou crônica de metilfenidato. Para a
administração aguda, uma única injeção de metilfenidato foi dada a SHR de 60 dias de idade. Para a
administração crônica de metilfenidato injeções foram dadas ao grupo SHR de 60 dias de idade, uma
vez por dia durante 28 dias. Nossos resultados demonstraram que a administração aguda de
metilfenidato aumentou a enzima no hipocampo e estriado de SHR jovens, mas no córtex pré-frontal a
atividade da CK foi inibida. Os resultados demonstraram que a administração crônica de metilfenidato
em ratos jovens diminuiu no córtex pré-frontal, hipocampo e estriado. A administração aguda de
Metilfenidato diminui a atividade da CK no córtex pré-frontal, hipocampo e estriado de SHR adultos.
A administração crônica de Metilfenidato aumentou a atividade da CK no córtex pré-frontal e
hipocampo em SHR adultos. Por outro lado, a atividade da CK foi reduzida no estriado. Os resultados
não são bem compreendidos, mas de acordo com estudos anteriores, as alterações da atividade da CK
podem estar envolvidas com a idade e o tempo de exposição à droga e a sinalização dopaminérgica.
Palavras-chave: metilfenidato, creatina quinase, mitocôndrias, cérebro; metabolismo; TDAH.
1.Introdução
O déficit de atenção e hiperatividade (TDAH) é um dos distúrbios comportamentais
mais comuns na infância, podendo persistir na idade adulta. De acordo com estimativas
conservadoras, a sua prevalência afeta cerca de 50-10% das crianças e 4% da população adulta
[13].O TDAH é caracterizado pelo comprometimento da atenção, atividade motora excessiva e
impulsividade, as consequências a longo prazo incluem a realização inferior educacional,
profissional e o aumento do risco para o desenvolvimento de outros transtornos psiquiátricos
[28-29].
Evidências sugerem que o TDAH envolve múltiplas etiologias como fatores genéticos,
ambiental, neurobiológicos e neuroquímicos, e que a disfunção de catecolaminas, incluindo
neurotransmissão dopaminérgica e noradrenérgica aferentes, sejam características importantes
subjacentes. Algumas evidências sugerem que outros neurotransmissores estejam provavelmente
envolvidos e, talvez, modulem a resposta catecolaminérgica direta ou indiretamente, mas seu
papel ainda não está muito bem indefinido [8-46-47].
Na farmacoterapia, os medicamentos psicoestimulantes como o metilfenidato, são
rigorosamente os tratamentos farmacológicos mais aceitos para pacientes com TDAH. O
diagnóstico e o tratamento de pacientes com TDAH normalmente ocorre durante a infância e
adolescência mas pouco se sabe sobre os efeitos persistentes do tratamento com
psicoestimulantes durante a infância [54].
O metilfenidato aumenta os níveis extracelulares de dopamina e noradrenalina no
cérebro, principalmente por inibir a recaptação dessas catecolaminas pelos seus respectivos
transportadores. Os efeitos desta droga também podem ser mediados pela estimulação dos
receptores noradrenérgicos e dopaminérgicos no córtex. No entanto, os mecanismos subjacentes
à eficácia terapêutica do estimulante ou possíveis conseqüências duradouras neuro-adaptacionais
de exposição à droga de metilfenidato de longa duração são pouco compreendidos. [16-23-2425-49]. Neste contexto, os modelos animais permitem a avaliação do potencial de novas
terapêuticas farmacológicas e intervenções comportamentais em diversas doenças. O mais
estudado é um modelo animal de TDAH, os ratos espontaneamente hipertensos (SHR) [39].
O SHR é um modelo genético da raça de ratos Wistar, progenitor Kyoto (WKY) [32]
Quando comparados com os controles WKY, SHR apresentam maior atividade quando expostas
a diferentes contextos [40]uma resposta aumentada ao estresse com aumento significativo de
catecolaminas plasmáticas [10] os mecanismos de reforço alterados [3] atenção sustentada
deficiente [39] e aquisição de tarefas prejudicadas operante [55-31-39]. Além disso, em ratos
SHR, os níveis da enzima cálcio-calmodulina quinase (CaMKII) pode ser normalizada pelo
tratamento crônico com metilfenidato. Desta forma, quando SHR e crianças com TDAH são
testados com o mesmo esquema de comportamento, eles apresentam todas as características
comportamentais de TDAH [37-39].
A Creatina quinase (CK, EC 2.7.3.2) catalisa a transferência reversível de um grupo de
ATP que fosforila a creatina, produzindo fosfato e ADP [4-52]. Esta enzima desempenha um
papel importante na regeneração de ATP nos tecidos com alto consumo de energia, tais como
cérebro, músculo esquelético e músculo cardíaco, onde ele funciona como um sistema de
tamponamento eficaz dos níveis de ATP celular. Neste contexto, tem sido amplamente
demonstrado que uma diminuição na atividade da CK está associada a um caminho
neurodegenerativo que resulta em perda neuronal após isquemia cerebral, [48], as doenças
neurodegenerativas [11-1] e outros estados patológicos [18-45]. Também demonstramos
recentemente que a administração aguda e crônica de metilfenidato aumentou a atividade da CK
no cérebro de ratos jovens e adultos [42].
Portanto, considerando que a CK desempenha um papel importante na homeostase
energética celular e que o comprometimento do metabolismo do cérebro está ligado à morte de
neurônios e os mecanismos terapêuticos subjacentes do MPH e efeitos colaterais ainda são pouco
conhecidos, no presente trabalho foi possível avaliar a atividade da CK no cérebro de ratos
jovens e adultos SHR após a administração aguda e crônica de MPH.
2. Materiais e Métodos
Animais: Ratos jovens do sexo masculino (25 dias de idade) e ratos adultos (60 dias), ratos
espontaneamente hipertensos foram obtidos pela Universidade de São Paulo, Animal House. Os
animais foram alojados em grupos de cinco por caixa, em uma gaiola com comida e água ad
libitum disponíveis, e foram mantidos em uma luz normal de 12 h / ciclo claro-escuro (luzes
acesas às 07:00). Este estudo foi realizado de acordo com a Sociedade Brasileira de
Neurociências e Comportamento (SBNeC), recomendações para o cuidado dos animais e com a
aprovação do Comitê de Ética da Universidade do Extremo Sul Catarinense.
Administração aguda de MPH: Uma única injeção de MPH (2 mg / kg, intraperitoneal) ou
salina foram dadas aos ratos no dia pós-natal 60 (n = 6). Os animais controle receberam solução
salina por via intraperitoneal no mesmo volume. Duas horas depois da última injeção, os animais
foram sacrificados por decapitação, o cérebro foi removido e córtex pré-frontal, hipocampo e
estriado foram obtidos.
Administração crônica de MPH: O mesmo esquema foi realizado a partir de 60 dias de vida
(última injeção no 88º dia) (n = 6). Duas horas depois da última injeção, os animais foram
sacrificados por decapitação, o cérebro foi removido e córtex pré-frontal, hipocampo e estriado
foram obtidos. Os animais controle receberam solução salina por via intraperitoneal no mesmo
volume e frequência.
Preparação de tecidos e homogeneizado: O córtex pré-frontal, hipocampo e estriado foram
homogeneizadas (1:10, w/v) em tampão SETH, pH 7.4 (250 mM de sacarose, 2 mM EDTA, 10
mM base trizma, 50 UI de heparina/mL). Os homogeneizados foram centrifugados a 800 x g por
10 min. e os sobrenadantes mantidos a -70 ° C até serem utilizados para a determinação da
cadeia respiratória e atividades enzimáticas. O prazo máximo entre a preparação do
homogeneizado e a análise de enzima foi sempre inferior a cinco dias. O teor de proteína foi
determinado pelo método descrito por [26] utilizando albumina bovina como padrão.
Medida de atividade da CK: A atividade da CK foi medida em homogeneizados de cérebro
pré-tratados com 0,625 mM lauril maltosideo. A mistura de reação consistiu de 60 mM Tris-HCl,
pH 7,5, contendo 7mm de fosfocreatina , 9 mm e MgSO4 aproximadamente 0,4-1,2 µ g de
proteína em um volume final de 100 µ L. Após 15 min. de pré-incubação a 37 ° C, a reação foi
iniciada pela adição de 0,3 µ mol de ADP mais 0,08 µ mol de glutationa reduzida. A reação foi
interrompida após 10 min. pela adição de 1 µ mol de ácido p-hidroximercuribenzoico. A creatina
formada foi estimada de acordo com o método colorimétrico de Hughes [20]. A cor foi
desenvolvida pela adição de 100 µ L de 2% α-naftol e 100 µ L de 0,05% diacetil em um volume
final de 1 mL e lido em espectrofotômetro após 20 min. a 540 nm. Os resultados foram expressos
como unidades / min x mg proteína.
Análise estatística: Os dados foram analisados por meio da análise de variância seguida pelo
teste de Tukey quando o F foi significativo. Todas as análises foram realizadas utilizando o
programa Statistical Package for Social Science (SPSS) software. As diferenças foram
consideradas significativas quando p <0,05.
3. Resultados e Discussão
Os mecanismos terapêuticos subjacentes do metilfenidato e seus efeitos colaterais ainda
não são bem conhecidos. Alguns estudos mostram que o metilfenidato e outras drogas
estimulantes têm profundos e duradouros efeitos neurobiológicos, porque o metilfenidato
transporta a dopamina e bloqueia o efeito agonista indireto da dopamina podendo eventualmente
ser importante para seus efeitos terapêuticos [51-17]. [50] mostraram que a distribuição dessa
droga no cérebro é heterogênea e a concentração máxima ocorre no estriado, córtex e cerebelo. O
córtex pré-frontal também é alvo da terapia com metilfenidato [30-44]
Existem poucos estudos avaliando os possíveis efeitos neurotóxicos do metilfenidato no
sistema nervoso central e sua relação com a idade e tempo de exposição à droga [21]. Várias
pesquisas têm se concentrado nos efeitos do metilfenidato no sistema nervoso central durante a
infância e adolescência, apesar da exposição a alterações na função dopaminérgica [6-14-27], a
expressão do gene [34-6] outras alterações moleculares relacionadas ao metabolismo neuronal
[15].
A creatina quinase é importante para a homeostase energética normal, exercendo
diversas funções integradas, como tampão de energia temporária, da capacidade metabólica,
realiza a transferência de energia e controle metabólico [52]. Nossos resultados demonstraram
que a administração aguda de metilfenidato aumentou a enzima no hipocampo e estriado de SHR
jovens, mas no córtex pré-frontal, a atividade da enzima foi inibida.(figura 01). A administração
crônica de metilfenidato diminuiu CK no córtex pré-frontal, hipocampo e estriado de SHR
jovens ( figura 02). A administração aguda do MPH levou a diminuição da atividade da CK no
córtex pré-frontal, hipocampo e estriado de SHR adultos (figura 03). A administração crônica de
MPH aumentou a atividade da CK no córtex pré-frontal e hipocampo em SHR adultos. Por outro
lado, a atividade de CK foi reduzida no estriado (figura 04).
Estudos anteriores com ratos Wistar mostraram que os complexos I, II, III e IV foram
inibidos no hipocampo, córtex pré-frontal, estriado e córtex cerebral após a administração aguda
e crônica de metilfenidato. Por outro lado, o cerebelo não foi afetado [12]. Também
demonstraram que a administração aguda de metilfenidato aumentou a atividade da CK no
córtex pré-frontal, hipocampo, estriado e do córtex cerebral, mas não cerebelo de ratos jovens e
adultos. A administração crônica de metilfenidato também aumentou a atividade da CK nestas
áreas do cérebro, assim como no cerebelo, em ratos jovens e adultos. Neste estudo, nós supomos
que a inibição da atividade da CK causada pela administração de metilfenidato pode ser um
efeito tóxico da droga no cérebro de ratos jovens e adultos, e sua ativação pode ser uma forma de
compensação [42].
Ainda não podemos explicar os efeitos do metilfenidato sobre a atividade de CK no
cérebro de ratos SHR, mas constatamos que o efeito não é exatamente o mesmo em ratos Wistar
e SHR. No entanto, acreditamos que os resultados encontrados no presente estudo pode ser pelo
menos parcialmente relacionados com o trabalho realizado por [22] que relatou que a
administração de fármacos psicoestimulantes como a anfetamina e a cocaína promovem o
crescimento neuronal em algumas regiões cerebrais de ratos jovens. Especulamos se estes
resultados podem ser associados com aumento da atividade da CK, uma vez que esta enzima
produz grandes quantidades de ATP. Por outro lado, foi demonstrado que a administração de
anfetamina, semelhante ao usado clinicamente para adultos com TDAH, causa danos em
terminações dopaminérgicas no estriado de primatas adultos não-humanos [36].
No presente estudo, demonstramos que a atividade da CK é alterada no cérebro dos
ratos SHR após a administração de metilfenidato. A fim de compreender melhor os efeitos desta
droga sobre o metabolismo energético cerebral de ratos SHR, as atividades de outras importantes
enzimas metabólicas, como as do ciclo de Krebs e da cadeia respiratória mitocondrial também
estão sendo avaliadas.
AGRADECIMENTOS
Esta pesquisa foi financiado pelo Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e
Tecnológico (CNPQ), Fundação de Apoio à Pesquisa Científica e Tecnológica do estado de Santa
Catarina (FAPESC) e Universidade do Extremo Sul Catarinense (UNESC).
Referências
[1] Aksenov, M., Aksenov, M., Butterfield, D.A., Markesbery, W.R., 2000. Oxidative
modification of creatine kinase BB in Alzheimer's disease brain. J. Neurochem. 74, 2520-2527.
[2] Beal, M.F., 1992. Does impairment of energy metabolism result in excitotoxic neuronal death
in neurological ilnesses? Ann. Neurol. 31, 119-130.
[3] Berger DF, Sagvolden T. 1998. Sex differences on operant discrimination behaviour in an
animal model of attention-deficit hyperactivity disorder. Behav Brain Res 94:73-82.
[4] Bessman, S.P., Carpenter, C.L., 1985. The creatine-creatine phosphate energy shuttle. Annu.
Rev. Biochem. 54, 831-862.
[5] Blass, J.P., 2001. Brain metabolism and brain disease: is metabolic deficiency the proximate
cause of Alzheimer dementia? J. Neurosci. Res. 66, 851-856.
[6] Brandon, C.L., Steiner, H., 2003. Repeated methylphenidate treatment in adolescent rats alters
gene regulation in the striatum. Eur. J. Neurosci. 18, 1584–1592.
[7] Brennan, W.A., Bird, E.D., Aprille, J.R., 1985. Regional mitochondrial respiratory activity in
Huntington´s disease brain. J. Neurochem. 44, 1948-1950.
[8] CASTELLENOS, F.X. Toward a pathophysiology of attention-deficit/hyperactivity disorder.
Cin. Pediatr. (Phila), 36: 381-393, 1997.
[9] Chase, T.D., Brown, R.E., Carrey, N., Wilkinson, M., 2003. Daily methylphenidate
administration attenuates c-fos expression in the striatum of prepubertal rats. NeuroReport 14, 769-772.
[10] Chiueh CC, McCarty R. 1981. Sympatho-adrenal hyperreactivity to footshock stress but not
to cold exposure in spontaneously hypertensive rats. Physiol Behav 26: 85-89.
[11] David, S., Shoemaker, M., Haley, B.E., 1998. Abnormal properties of creatine kinase in
Alzheimer's disease brain: correlation of reduced enzyme activity and active site photolabeling with
aberrant cytosol-membrane partitioning. Brain Res. Mol. Brain Res. 54, 276-287.
[12] Fagundes AO., Scaini G., Santos PM., Sachet SU., BernhardtNM., Rezin GT., Valvasori SS.,
Schuck PF., Quevedo J., Streck EL (2010) Inhibition of mitochondrial respiratory chain in the brain of
adult rats after acute and chronic administration of methylphenidate. Neurochem Res. 35(3):405-11.
[13] Faraone SV, Sergeant J, Gillberg C et al (2003) The worldwide prevalence of ADHD: is it an
American condition? World Psychiatry. 2:104-113.
[14] Federici, M., Geracitano, R., Bernardi, G., Mercuri, N.B., 2005. Actions of methylphenidate
on dopaminergic neurons of the ventral midbrain. Biol. Psychiatry 57, 361–365.
[15] Fukui, R., Svenningsson, P., Matsuishi, T., Higashi, H., Nairn, A.C., Greengard, P., Nishi,
A., 2003. Effect of methylphenidate on dopamine/DARPP signalling in adult, but not young, mice. J.
Neurochem. 87, 1391–1401.
[16] Gatley SJ, Pan D, Chen R, Chaturvedi G, Ding YS (1996) Affinities of methylphenidate
derivatives for dopamine, norepinephrine and serotonin transporters. Life Sci 58:231–239
[17] Greenhill, L.L., 2001. Clinical effects of stimulant medication in attentiondeficit/hyperactivity disorder (ADHD). In: Solanto, M.V., Arnsten, A.F.T., Castellanos, F.X. (Eds.),
Stimulant Drugs and ADHD: Basic and Clinical Neuroscience. Oxford Univ. Press, New York, pp. 31-71.
[18] Gross, W.L., Bak, M.I., Ingwall, J.S., Arstall, M.A., Smith, T.W., Balligand, J.L., Kelly,
R.A., 1996. Nitric oxide inhibits creatine kinase and regulates rat heart contractile reserve. Proc. Natl.
Acad. Sci. U S A. 93, 5604-5609.
[19] Heales, S.J., Bolaños, J.P., Stewart, V.C., Brookes, P.S., Land, J.M., Clark, J.B., 1999.
Nitric oxide, mitochondria and neurological disease. Biochim. Biophys. Acta 1410, 215-228.
[20] Hughes, B.P., 1962. A method for estimation of serum creatine kinase and its use in
comparing creatine kinase and aldolase activity in normal and pathologic sera. Clin. Chim. Acta 7, 597604.
[21] Husson, I., Mesples, B., Medja, F., Leroux, P., Kosofsky, B., Gressens, P., 2004.
Methylphenidate and MK-801, an N-methyl-D-aspartate receptor antagonist: shared biological properties.
Neuroscience 125, 163-170.
[22] Kolb B, Gorny G, Li Y, Samaha AN, Robinson TE. Amphetamine or cocaine limits the
ability of later experience to promote structural plasticity in the neocortex and nucleus accumbens.
Proceedings of the National Academy of Science of the United States of America 100, 10523-10528,
2003
[23] Kuczenski R, Segal DS (1997) Effects of methylphenidate on extracellular dopamine,
serotonin, and norepinephrine: comparison with amphetamine. J Neurochem 68:2032–2037
[24] Kuczenski R, Segal DS (2001) Locomotor effects of acute and repeated threshold doses of
amphetamine and methylphenidate: relative roles of dopamine and norepinephrine. J Pharmacol Exp Ther
296:876–883.
[25] Kuczenski R, Segal DS (2002) Exposure of adolescent rats to oral methylphenidate:
preferential effects on extracellular norepinephrine and absence of sensitization and cross-sensitization to
methamphetamine. J Neurosci 22:7264–7271
[26] Lowry, O.H., Rosebough, N.G., Farr, A.L., Randall, R.J., 1951. Protein measurement with
the Folin phenol reagent. J. Biol. Chem. 193, 265-275.
[27] Mague, S.D., Andersen, S.L., Carlezon Jr., W.A., 2005. Early developmental exposure to
methylphenidate reduces cocaine-induced potentiation of brain stimulation reward in rats. Biol.
Psychiatry 57, 120–125.
[28] Mannuzza S, Klein RG, Bessle A et al (1998) Adult psychiatric status of hyperactive boys
grown up. Am. J. Psychiatry. 155: 493-498.
[29] Mannuzza S, Klein RG, Bessler A et al (1997) Educational and occupational outcome of
hyperactive boys grown up. J. Am. Acad. Child Adolesc. Psychiatry. 36:1222-1227.
[30] Marsteller, D.A., Gerasimov, M.R., Schiffer, W.K., Geiger, J.M., Barnett, C.R., Borg, J.S., et
al., 2002. Acute handling stress modulates methylphenidate-induced catecholamine overflow in themedial
prefrontal cortex. Neuropsychopharmacology 27, 163-170.
[31] Mook DM, Jeffry J. Neuringer A. 1993. Spontaneously hypertensive rats (SHR) readily learn
to vary but not repeat instrumental responses. Behav Neural Biol 59: 126-135.
[32] Okamoto K, Aoki K. Development of a strain of spontaneously hypertensive rats. Jpn Circ J
1963;27:282–93.
[33] Papa M, Sergeant JA, Sadile GA. 1998. Reduced transduction mechanism in the anterior
accumbal interface of an animal model of Attention Deficit Hyperactivity Disorder. Behav Brain Res 94:
187-195.
[34] Penner, M.R., McFadyen, M.P., Pinaud, R., Carrey, N., Robertson, H.A., Brown, R.E., 2002.
Age-related distribution of c-fos expression in the striatum of CD-1 mice after acute methylphenidate
administration. Brain Res. Dev. Brain Res. 135, 71–77.
[35] Porrino, L.J., Lucignani, G., 1987. Different patterns of local brain energy metabolism
associated with high and low doses of methylphenidate. Relevance to its action in hyperactive children.
Biol. Psychiatry 22, 126-138
[36] Ricaurte GA, Mechan AO, Yuan J, Hatzidimitriou G, Xie T, Mayne AH, McCann UD.
Amphetamine treatment similar to that used in the treatment of adult attention-deficit/hyperactivity
disorder damages dopaminergic nerve endings in the striatum of adult nonhuman primates. The Journal of
Pharmacology and Experimental Therapeutics 315, 91-98, 2005
[37] Russell, V.A., 2007. Neurobiology of animal models of attention-deficit hyperactivity
disorder. J. Neurosci. Methods 161, 185–198.
[38] Sagvolden et al., 2005 T. Sagvolden, V.A. Russell, H. Aase, E.B. Johansen and M. Farshbaf,
Rodent models of attention-deficit/hyperactivity disorder, Biol Psychiatry 57 (2005), pp. 1239–1247.
[39] Sagvolden T. 2000. Behavioral validation of the spontaneously hypertensive rat (SHR) as an
animal model of attention-deficit /hyperactivity disorder (ADHD). Neurosci Biobehav Rev 24:31-39.
[40] Sagvolden, T., Hendley, E.D., Knardahl, S., 1992a. Behavior of hypertensive and
hyperactive rat strains: hyperactivity is not unitarily determined. Physiol.Behav. 52, 49–57.
[41] Sagvolden, T., Metzger, M.A., Schiørbeck, H.K., Rugland, A.L., Spinnangr, I., Sagvolden,
G., 1992b. The spontaneously hypertensive rat (SHR) as an animal model of childhood hyperactivity
(ADHD): changed reactivity to reinforcers and to psychomotor stimulants. Behav. Neural Biol. 58, 103–
112.
[42] Scaini G, Fagundes AO, Rezin GT et al (2008) Methylphenidate increases creatine kinase
activity in the brain of young and adult rats. Life Sci. 83:795-800.
[43] Schurr, A., 2002. Energy metabolism, stress hormones and neural recovery from cerebral
ischemia/hypoxia. Neurochem. Int. 41, 1-8.
[44] Schweitzer, J.B., Lee, D.O., Hanford, R.B., Zink, C.F., Ely, T.D., Tagamets, M.A., et al.,
2004. Effect of methylphenidate on executive functioning in adults with attention-deficit/hyperactivity
disorder: normalization of behavior but not related brain activity. Biol. Psychiatry 56, 597-606.
[45] Streck, E.L., Amboni, G., Scaini, G., Di-Pietro, P.B., Rezin, G.T., Valvassori, S.S., Luz, G.,
Kapczinski, F., Quevedo, J., 2008. Brain creatine kinase activity in an animal model of mania. Life Sci.
82, 424-429.
[46] Swanson JM, Gupta S, Williams L, et al. Efficacy of a new pattern of delivery of
methylphenidate for the treatment of ADHD: effects on activity level in the classroom and on the
playground. J Am Acad Child Adolesc Psychiatry. 2002;41:1306–1314. Erratum in: J Am Acad Child
Adolesc Psychiatry. 2003;42:260.
[47] Tannock, R. Attention deficit hyperactivity disorder: advances in cognitive, neurobiological,
and genetic research. Journal of Child Psychology and Psychiatry, and Allied Disciplines 39: 66-99,
1998.
[48] Tomimoto, H., Yamamoto, K., Homburger, H.A., Yanagihara, T., 1993. Immunoelectron
microscopic investigation of creatine kinase BB-isoenzyme after cerebral ischemia in gerbils. Acta
Neuropathol. 86, 447-455.
[49] Volkow ND, Wang G, Fowler JS, Logan J, Gerasimov M, Maynard L, Ding Y, Gatley SJ,
Gifford A, Franceschi D (2001) Therapeutic doses of oral methylphenidate significantly increase
extracellular dopamine in the human brain. J Neurosci 21:RC121.
[50] Volkow, N.D., Wang, G., Fowler, J.S., Ding, Y., 2005. Imaging the effects of
methylphenidate on brain dopamine: new model on its therapeutic actions for attentiondeficit/hyperactivity disorder. Biol. Psychiatry 57, 1410-1415.
[51] Volkow, N.D., Wang, G-J., Fowler, J.S., Gatley, S.J., Logan, J., Ding, Y-S., 1998.
Dopamine transporter occupancies in the human brain induced by therapeutic doses of oral
methylphenidate. Am. J. Psychiatry 155, 1325-1331.
[52] Wallimann T, Wyss M, Brdiczka D, Nicolay K, Eppenberger HM., 1992. Intracellular
compartmentation, structure and function of creatine kinase isoenzymes in tissues with high and
fluctuating energy demands: the 'phosphocreatine circuit' for cellular energy homeostasis. Biochem. J.
281, 21-40.
[53] Wallimann T, Wyss M, Brdiczka D, Nicolay K, Eppenberger HM., 1992. Intracellular
compartmentation, structure and function of creatine kinase isoenzymes in tissues with high and
fluctuating energy demands: the 'phosphocreatine circuit' for cellular energy homeostasis. Biochem. J.
281, 21-40.
[54] Wilens and Dodson, 2004 T.E. Wilens and W. Dodson, A clinical perspective of attentiondeficit/hyperactivity disorder into adulthood, J Clin Psychiatry 65 (2004), pp. 1301–1313.
[55] Wyss JM, Fisk G, van Groen T. 1992. Impaired learning and memory in mature
spontaneously hypertensive rats. Brain Res 592:135-140.
Figuras
Figura 1 - A atividade da creatina quinase (CK) no córtex pré-frontal, hipocampo e estriado de
ratos jovens espontaneamente hipertensos após administração aguda de metilfenidato. Duas
horas após o metilfenidato (2 mg / kg) ou salina (grupo controle), da administração aguda, os
ratos foram mortos e as regiões do cérebro foram coletadas para determinação da atividade da
CK, como descrito em Materiais e Métodos. Os dados estão expressos como média ± S.D. (N =
6). Diferente do controle salina () * p <0,05 (teste de Tukey).
Figura 2 - A atividade da creatina quinase (CK) no córtex pré-frontal, hipocampo e estriado de
ratos jovens espontaneamente hipertensos após administração crônica de metilfenidato. O
metilfenidato foi administrado cronicamente durante 28 dias (2 mg / kg) ou salina (grupo
controle). Duas horas após a última administração, os ratos foram mortos e as regiões do cérebro
foram coletadas para determinação da atividade da CK, como descrito em Materiais e Métodos.
Os dados estão expressos como média ± S.D. (N = 6). Diferente do controle salina () * p <0,05
(teste de Tukey).
Figura 3 - A atividade da creatina quinase (CK) no córtex pré-frontal, hipocampo e estriado de
ratos adultos espontaneamente hipertensos após administração aguda de metilfenidato. duas
horas após o metilfenidato 2mg/kg () ou salina (grupo controle), a administração aguda, os ratos
foram mortos e as regiões do cérebro foram coletadas para determinação da atividade da CK,
como descrito em materiais e métodos. Os dados estão expressos como média ± S.D. (N = 6).
Diferente do controle salina () * p <0,05 (teste de Tukey).
Figura 4 - A atividade da creatina quinase (CK) no córtex pré-frontal, hipocampo e estriado de
ratos adultos espontaneamente hipertensos após administração crônica de metilfenidato. O
metilfenidato foi administrado cronicamente durante 28 dias (2 mg / kg) ou salina (grupo
controle). Duas horas após a última administração, os ratos foram mortos e as regiões do cérebro
foram coletadas para determinação da atividade da CK, como descrito em Materiais e Métodos.
Os dados estão expressos como média ± S.D. (N = 6). Diferente do controle salina () * p <0,05
(teste de Tukey).