UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA CAMPUS DE VITÓRIA DA CONQUISTA – BA DEPARTAMENTO DE FITOTECNIA E ZOOTECNIA NÚCLEO DE APOIO A CAFEICULTURA Zorai de Santana dos Santos SUBDOSES DE GLYPHOSATE EM PLANTAS DE Coffea arabica SUBMETIDAS À CONVIVÊNCIA COM Commelina benghalensis Vitória da Conquista – BA 2013 Zorai de Santana dos Santos SUBDOSES DE GLYPHOSATE EM PLANTAS DE Coffea arabica SUBMETIDAS À CONVIVÊNCIA COM Commelina benghalensis Monografia apresentada à Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia - UESB, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação Lato Sensu, para a obtenção do título de “Especialista em Gestão da Cadeia Produtiva do Café com Ênfase em Sustentabilidade”. Orientador (a): Profª. DSc. Sylvana Naomi Matsumoto Vitória da Conquista – BA 2013 Dedico Ao meu pai José França e minha irmã Vagna Santana, com todo o meu apreço, por serem meu referencial e meu incentivo em todos os momentos de minha vida. Pessoas que sempre estão ao meu lado, me acompanhando, apoiando e principalmente acreditando em mim. Agradecimentos Ao Deus, o Todo Poderoso, que em sua infinita misericórdia sempre está ao meu lado me protegendo e abençoando e sem o qual eu nada seria. A minha irmã Vagna Santana, pelo incentivo e por acreditar em mim bem mais do que eu mesma. A grande amiga Mércia Daniela Porto Alves que gentilmente me acolheu em seu lar durante todos esses meses de curso. A Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia, ao Departamento de Fitotecnia e Zootecnia e ao Núcleo de Apoio a Cafeicultura pela oportunidade de realizar esse curso. A professora DSc. Sylvana Naomi Matsumoto, pela confiança, ensinamentos e orientação ao longo desse período. Aos colegas do Laboratório de Fisiologia Vegetal pelo apoio e constante ajuda na realização desse trabalho. Ao professor DSc. Valdemiro Conceição Junior pela amizade, pelas sugestões e por estar sempre disposto a ajudar. A professora DSc. Sandra Elizabeth de Souza pelo empenho e dedicação na coordenação do curso. A Alan Oliveira dos Santos, Henrique Otávio Curvelo de Magalhães e Vivaldo Ribeiro dos Santos Filho, pela amizade e pelos momentos de descontração nas nossas idas e vindas entre Poções e Vitória da Conquista. Aos colegas do curso em especial a Fabiano de Sousa e Leonéia Arruda pela constante troca de informações, pelo companheirismo e principalmente por estarem comigo nesta caminhada tornando-a mais fácil e agradável. A todos vocês, muito obrigada! “Todas as coisas são um veneno e nada existe sem veneno, apenas a dosagem é razão para que uma coisa não seja um veneno”. (Theophrastus, 1493-1541). Subdoses de glyphosate em plantas de Coffea arabica submetidas à convivência com Commelina benghalensis Resumo - De modo geral, o controle de plantas invasoras tem sido feito por meio de métodos químicos. Entretanto, o uso de produtos químicos originalmente utilizados como herbicidas, em subdoses, podem estimular o desenvolvimento da planta. Neste trabalho avaliou-se cafeeiros arábica cv. Catuaí jovens cultivados em associação com trapoeraba, submetidos à subdoses de glyphosate correspondentes a 0,0; 0,12; 0,25; 0,5; 1,25; 2,5 e 5% da dose comercial recomendada. Avaliou-se características morfológicas de crescimento, índice Spad e potencial hídrico foliar antemanhã (Ψam). Não foi verificado efeito das subdoses de glyphosate para o crescimento dos cafeeiros. Entretanto, para a relação entre o índice Spad e potencial hídrico foliar antemanhã em função das doses de glyphosate, foi possível definir o modelo logaritmo linear, indicando um efeito fisiológico positivo das subdoses de glyphosate para o cafeeiro cv. Catuaí no início do desenvolvimento vegetativo. Palavras-chave: Coffea arabica. Hormese. Herbicida. Coffee plants cultivated in coexistence of Commelina benghalensis submitted to sublethal dosis of glyphosate Summary - The use of chemicals such as herbicides originally used in subdoses may stimulate plant growth. In this study it was evaluated hormesis occurrence in young coffee plants cultivated in association with dayflower through the use of glyphosate subdoses (0.0, 0.12, 0.25, 0.5, 1.25, 2 5 and 5% of the dose recommended commercial). It was evaluated some morphological characteristics related to plant growth, Spad index and predawn leaf water potential. No effect was verified in growth of coffee plants submitted to glyphosate subdoses. However, for the relationship of Spad index and predawn leaf water potential (Ψam) depending on the doses of glyphosate, it was possible to define a linear logaritm model, describing a positive physiological effect of glypohosate subdoses to coffee plants cv. Catuaí, in initial vegetative development phase. Keywords: Coffea arabica. Hormesis. Herbicide. Sumário 1 Introdução...................................................................................................... 9 2 Referencial Teórico ..................................................................................... 10 2.1 A cultura do café e sua relação com Commelina benghalensis .......... 10 2.2 O glyphosate............................................................................................. 13 2.3 Hormese .................................................................................................... 15 3 Material e métodos...................................................................................... 17 4 Resultados e discussão.............................................................................. 22 5 Conclusões .................................................................................................. 27 Referências ..................................................................................................... 28 APÊNDICE....................................................................................................... 32 9 1 Introdução A produtividade do cafeeiro pode ser afetada por diversos fatores, destacando-se o manejo de plantas daninhas que assume um papel fundamental como uma das principais práticas que oneram o custo da produção (SILVA e outros, 2010). As plantas daninhas competem com o café por água e nutrientes e interferem nas práticas culturais, causando reduções na produtividade que variam de 30 a 40% (FIGUEIREDO NETO e outros, 2008). Uma das principais espécies de planta daninha infestante em café é a trapoeraba (Commelina benghalensis L.), uma planta espontânea perene, herbácea, ereta ou semi-prostrada, com reprodução sexuada por sementes aéreas e, assexuada, por meio de sementes subterrâneas e por segmentos do caule. De modo geral, o controle da trapoeraba tem sido feito por meio de métodos manuais, mecanizados, químicos e associações destes (ALCÂNTARA e outros, 2007). Entretanto, o controle mecânico assim como o químico uma relativa eficiência, devido a fatores como os diversos mecanismos de propagação, a presença de uma camada de cera espessa sobre as folhas que restringe a capacidade de absorção dos produtos pulverizados (COSTA e outros, 2011). Entre os produtos utilizados pára o controle químico, a aplicação de doses moderadas de glyphosate tem se mostrado bastante efetiva, principalmente quando associada a produtos como ametryne e simazine (CARVALHO e outros, 2005). O glyphosate, [N-(fosfonometil) glicina], mundialmente utilizado para o controle de plantas daninhas, se destaca por suas características físico-químicas, econômicas e ambientais. Devido à deriva no momento da aplicação, as gotas aspergidas pelo vento podem atingir as plantas de café causando intoxicação e morte dessas espécies (FRANÇA, 2009). Contudo, o uso de produtos químicos originalmente utilizados como herbicidas, em subdoses, podem estimular o desenvolvimento das plantas. Denominado como hormese, efeito benéfico do uso de subdoses de produtos tóxicos, esse efeito vem sendo cada vez discutido e pesquisado, a fim de compreender o mecanismo de ação estimulante e benéfica de substâncias consideradas tóxicas (SILVA e outros, 2009). 10 Nesse contexto, o objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito de subdoses de glyphosate em plantas jovens de café cultivadas em presença da trapoeraba. 2 Referencial Teórico 2.1 A cultura do café e sua relação com Commelina benghalensis O cafeeiro pertence à família Rubiaceae, com aproximadamente 25 espécies importantes, todas originárias da África e do Oceano Índico (ORMOND e outros 1999). A planta de café é um arbusto que mede de 2 a 2,5 metros de altura, podendo chegar a 10 metros. Coffea arabica é a mais notável espécie comercial de café, sua principal característica é a produção de bebida de qualidade. Dentre as cultivares, destaca-se a Catuaí devido a sua capacidade de adaptação e à alta produtividade aliadas à facilidade de colheita e de tratamentos fitossanitários em virtude do porte baixo das plantas (CARVALHO, 2011). A combinação de interesse político, terra, capital, trabalho e demanda fez do café o responsável por comandar econômica e politicamente um longo período no Brasil. Assim, o café se tornou o produto brasileiro de maior importância, se destacando como uma das culturas de maior interesse econômico (BIANCHI, 2012). A cultura do café tem grande destaque na economia brasileira e está diretamente ligada à história do Brasil (DIAS e outros, 2005). Considerado o produto indispensável para o desenvolvimento da economia brasileira durante décadas, a cultura do café foi responsável tanto pela formulação de políticas, estrutura da administração governamental como pela modernização da indústria (BIANCHI, 2012). O cafeeiro foi introduzido no Brasil em 1727. Na Bahia, o polo cafeeiro surgiu na década de 70 quando o IBC (Instituto Brasileiro do Café) planejou a expansão da cultura em áreas que não apresentavam risco de geada. Com isso, o Planalto da Conquista recebeu um parque cafeeiro de 50.000 hectares com capacidade para produzir 500.000 sacas de café (DUTRA NETO, 2004). Brasil é o maior produtor mundial de café (OIC, 2013). A área cultivada no país totaliza 2.341,73 mil hectares, sendo que a produção nacional em 2012 atingiu 11 50,83 milhões de sacas de 60 quilos de café beneficiado. Destes, 38,34 milhões de sacas de café arábica. Na Bahia, a produção da safra 2012 foi de 2.149,6 mil sacas de café beneficiadas, sendo 1.336,5 mil sacas de arábica. Produção que coloca a Bahia no quarto lugar em produção nacional (CONAB, 2013). A Bahia possui um expressivo parque cafeeiro compreendido por três principais regiões produtoras: a do Atlântico, a do Oeste e a do Planalto. Na região do Planalto, está localizada a sub-região do Planalto de Vitória da Conquista, onde o município de Barra do Choça está localizado. O município é considerado o maior produtor da Bahia, com uma produção média histórica anual de aproximadamente 350.000 sacas de 60 Kg (FERREIRA e outros, 2011). No Planalto de Vitória da Conquista, a produção de café está vinculada ao uso de mão-de-obra no processo de produtivo, que é responsável por onerar o custo de produção. Em contrapartida, o desenvolvimento de insumos agrícolas permite que essa dificuldade seja superada e em algumas situações reduz significativamente o custo do manejo (BRITO, 2012). O cultivo do café está sujeito a uma série de fatores que podem afetar o seu desenvolvimento e produção. Dentre esses fatores, destaca-se a interferência das plantas daninhas que competem por luz, nutrientes e água, além de produzir efeitos alelopáticos (DIAS e outros, 2005). O café apresenta alta sensibilidade à competição exercida pelas plantas daninhas, com reflexos negativos no crescimento das plantas jovens. Para que haja o desenvolvimento inicial satisfatório da cultura do café, é necessário que as plantas estejam livres desta competição (BRITO, 2012). O controle das plantas daninhas do café em formação requer maior atenção, pelo fato da lavoura apresentar entrelinhas abertas, tendo maior impacto de luminosidade e de precipitação no aumento do nível de infestação dessas espécies, podendo ocorrer interferências negativas nas características das plantas (SANTOS e outros, 2011). A competição com plantas daninhas pode causar prejuízos ao desenvolvimento das plantas cultivadas e dificultar os tratos culturais. Para diminuir os danos causados pela interferência de plantas daninhas, é necessária a adoção de métodos de controle eficientes (MARTINS, 2012). 12 O controle adequado dessas plantas pode contribuir para melhoria da qualidade do solo, em decorrência da elevação do teor de matéria orgânica promovida pela diversidade de espécies de plantas invasoras presentes na cultura (ALCÂNTARA e outros, 2007). Chaves e outros (2011), estudando o efeito do manejo das ervas invasoras em cafeeiros, constataram que as práticas de controle das ervas com herbicida associadas ao uso da roçadeira e da cobertura do solo com adubo verde, reduziram o tempo de controle, promoveram melhor nutrição do cafeeiro, interferindo na produção de café. Alcântara e outros (2011), estudando o efeito de diferentes métodos de controle de plantas daninhas sobre o crescimento do café, constataram que o tratamento com herbicida de pré-emergência nas entrelinhas, propiciou o maior em vigor, diâmetro de caule e de copa, bem como altura de plantas. O manejo adequado dessas ervas além de evitar a competição, promove uma cobertura sobre o solo que previne danos causados pela erosão hídrica e melhora o ambiente radicular por meio da decomposição dos restos vegetais (CHAVES e outros, 2011). Estas plantas, embora sejam altamente competitivas com as culturas, podem ser extremamente úteis no controle da erosão e promover a reciclagem de nutrientes (SILVA e outros, 2001). O uso de herbicidas tornou-se uma prática indispensável devido à dificuldade de se encontrar mão-de-obra, no momento preciso e na quantidade necessária, além da eficiência e economicidade do controle químico (SILVA e outros, 2001). Existe uma diversidade de plantas daninhas de ocorrência na cultura do café. A trapoeraba é a espécie mais citada na literatura (SANTOS e outros, 2001). Destaca-se como uma das principais espécies infestantes devido às condições do ambiente, úmidos e com baixa luminosidade e à utilização de métodos de controle pouco eficientes (BATISTA e outros, 2010). A trapoeraba é uma planta daninha perene, herbácea, ereta ou semiprostrada, com reprodução por sementes e vegetativa. Por possuir grande capacidade de sobreviver em ambientes diversificados provoca perdas significativas de produtividade em culturas agrícolas e dificulta as operações de colheita (BATISTA e outros 2010). 13 Segundo Holm e outros (1977) e Wilson (1981) citado por Santos e outros (2002), a trapoeraba é considerada uma das piores plantas daninhas do mundo devido à sua eficiente reprodução, capacidade de sobreviver em condições adversas e dificuldade de controle. 2.2 O glyphosate O controle das plantas daninhas por meio da utilização de herbicidas tem expandido de forma considerável por este ser um método rápido, eficiente e econômico. A escolha do herbicida a ser aplicado depende das características do produto, do solo, do clima e da necessidade de sua permanência no ambiente (MARTINS, 2012). Muitos cafeicultores utilizam o glyphosate, em aplicações dirigidas, a fim de tornar o processo mais eficiente e econômico. Para que a aplicação desse herbicida seja eficiente, há a necessidade de equipamentos e técnicas apropriadas que evitem o contato das gotas aspergidas com as plantas de café (MARINHO e outros, 2011). O glyphosate, N-(fosfonometil) glicina, é um herbicida de pós-emergência, pertencente ao grupo químico dos inibidores da síntese de aminoácidos e contém o N-(phosphonomethyl) glycina como ingrediente ativo. É classificado como não seletivo e de ação sistêmica. Exibe largo espectro de ação, possibilitando um excelente controle de plantas daninhas anuais (GALLI e MONTEZUMA, 2005). Apresenta rápida ligação às partículas do solo, biodegradação e baixa toxicidade a mamíferos, aves e peixes. É um dos principais herbicidas comercializados no mundo (CARVALHO, 2011). Após sua absorção pelas plantas, o glyphosate é translocado junto com fotossintatos. O glyphosate atua inibindo a atividade da enzima plastídica 5enolpiruvilshiquimato-3-fosfato sintase (EPSPS), que catalisa a reação na qual chiquimato-3-fosfato (S3P) reage com fosfoenolpiruvato (PEP), formando 5enolpiruvilchiquimato-3-fosfato (EPSP) e fósforo inorgânico (Pi) (FRANÇA, 2009). Quando a planta é exposta ao produto herbicida, o glyphosate se liga ao complexo EPSPs-S3P, impedindo que ocorra a interação deste complexo com fosfoenolpiruvato, ao (CARVALHO, 2011). formar o complexo inativo EPSPs-S3P-glyphosate 14 O glyphosate atua diretamente na via do chiquimato, inibindo a síntese de triptofano, fenilalanina e tirosina, aminoácidos essenciais à síntese de proteínas e o crescimento das plantas (FRANÇA, 2009). O efeito mais rápido e drástico decorrente da aplicação de glyphosate observado em plantas sensíveis é o acúmulo de chiquimato nos vacúolos (SILVA e outros, 2012). Inibindo a atividade da 5-enolpiruvilshiquimato-3-fosfato sintase (EPSPS) o glyphosate influencia a inibição da síntese de clorofila, estimula a produção de etileno, reduz a síntese de proteínas e eleva a concentração do ácido indol acético (AIA) (GALLI e MONTEZUMA, 2005). A ação fitotóxica causada pelos herbicidas ocorre por meio da inibição da síntese de proteínas nos meristemas apicais, resultando na interrupção do desenvolvimento. A fitotoxicidade caracteriza-se como o resultado da interação entre o herbicida, a planta e as condições ambientais (MARTINS, 2012). As consequências mais conhecidas da ação do glyphosate são o branqueamento, clorose e redução do crescimento (CARVALHO, 2011). É comum a ocorrência de casos de intoxicação de plantas de café devido à deriva, dispersão das gotas pelo vento das plantas alvo para as plantas não alvo, intoxicando-as (MARINHO e outros, 2011). Como foi verificado por Carvalho e outros (2011), estudando plantas jovens das cultivares Catucaí Amarelo (2 SL) e Acaiá (IAC 474/19). Estas plantas apresentaram menor crescimento quando submetidas ao tratamento com glyphosate. Apesar dos efeitos deletérios já conhecidos da ação do glyphosate, vários estudos tem demonstrado que o uso desse herbicida em baixa dose pode estimular um aumento na massa seca de plantas, tirosina e caroteno, além de aumentar a absorção de fósforo (SILVA e outros, 2012). A aplicação de altas doses de glyphosate inibe o crescimento da planta enquanto subdoses pode estimular seu crescimento (VELINI e outros, 2008). A esse respeito, Neves e outros (2009) citam trabalhos onde o uso de glyphosate tem estimulado o efeito hormetico em diversas plantas, como aumento da matéria verde em milho, massa seca de raiz de soja, teor de fósforo nas folhas de eucalipto. França (2009) observou incremento em plantas de café submentidas a tratamentos com baixas doses de glyphosate. Segundo o autor, o incremento em 15 altura seguiu tendência quadrática com aumento das doses, atingindo altura máxima com 116,49 g ha-1. Este estimulo de crescimento em plantas tratadas com baixas doses de glyphosate também foi observado por Velini e outros (2008), ao trabalharem com Pinus caribea e Commelina benghalensis, submetidas a doses de 1,8 e 36g ha-1. Meschede e outros (2008) observaram estímulo de crescimento em comprimento e área foliar em plantas de C. benghalensis tratadas com glyphosate em doses que variaram de 2 a 24 g e.a. ha-1. Segundo os autores, doses a partir de 2 g e.a. ha-1 são capazes de causar efeitos sobre o crescimento e desenvolvimento da parte aérea e radicular de plantas de C. benghalensis. Olesen e Cedergreen (2010) relatam que as baixas doses de glyphosate podem aumentar a taxa de fotossíntese. De acordo com os autores essas taxas aumentam por que a adição de xenobióticos induz à desintoxicação, processo que exige energia. Ao aumentar as taxas de fotossíntese, ocorre também um aumento de biomassa em torno de 10 a 25% de peso seco. No cafeeiro, França e outros (2010) observaram aumento na altura de plantas quando submetidas às baixas doses de glyphosate. Domingues Júnior (2011) observou resposta hermética em diferentes parâmetros analisados em folhas e frutos de cafeeiros expostos ao glyphosate. Contudo, o mecanismo pelo qual ocorre hormese ainda não é claramente conhecido (CARVALHO, 2011). 2.3 Hormese A hormese é definida como um fenômeno onde substancias consideradas tóxicas são utilizadas em pequenas doses (SILVA e outros, 2012). De acordo com Calabrese e outros (1999), a hipótese da hormese afirma que a maioria dos produtos químicos e agentes físicos, como a radiação, por exemplo, tem a capacidade de estimular os efeitos biológicos. Ainda segundo Calabrese e outros (1999), esse estimulo ocorre em doses inferiores ao limiar de toxicidade, ao mesmo tempo em que causam toxicidade em doses superiores a esse limiar. Ou seja, estímulos fracos aceleram a atividade fisiológica e os estímulos fortes param a atividade fisiológica. 16 Quando a exposição a um agente estressor externo desafia a capacidade adaptativa de um sistema biológico, esse sistema normalmente compensa os danos causados por essa exposição, por meio da estimulação de efeitos benéficos como o aumento da fecundidade, crescimento, longevidade e diminuição da incidência de doenças. A hormese representa então, uma sobrecompensação a uma alteração na homeostase (CALABRESE e outros, 1999). Uma resposta hormética pode ser observada em vários sistemas biológicos, que vão desde a farmacologia até as relações animal-planta. Cada um desses sistemas apresenta respostas semelhantes entre si. Independente do agente ou do modelo biológico, o comportamento à resposta hermética é semelhante, sendo que é estabelecida uma faixa bastante acentuada do limite entre o efeito estimulante e tóxico (CALABRESE e MATTSON, 2011). O fenômeno do efeito estimulante da baixa dose foi relatado pela primeira vez em 1882 em experimentos com animais e posteriormente em 1888 com leveduras. A partir desses resultados, criou-se a Lei Arndt-Shultz que afirma que todos os venenos são estimuladores em baixas doses (CALABRESE e outros, 1999). Contudo, o termo hormese só foi utilizado 1943 para descrever o crescimento de fungos estimulado por baixas concentrações de antibiótico natural e suprimido sob altas concentrações (SILVA e outros, 2012). O efeito hormético de herbicidas sobre plantas já vem sendo observado por décadas, entretanto, o único uso comercial eficiente dessa tecnologia é a utilização de glyphosate em cana para aumento de produção de açúcar. A razão do não uso comercial do efeito benéfico de baixas doses de herbicida nas culturas se deve ao fato de existirem poucos conhecimentos a cerca do princípio desse fenômeno (BELZ e outros, 2011). Muitos herbicidas foram desenvolvidos como reguladores de crescimento, comprovando a hipótese da hormese. Como exemplo tem-se o 2,4-D, produto desenvolvido como auxina que, em doses elevadas, tem efeito herbicida. Outro exemplo é o glyphosine, antecessor do glyphosate, que ainda é utilizado como regulador de crescimento (SILVA e outros, 2012). Na biologia vegetal, a pesquisa tem mostrado que muitos agentes estimulam o crescimento em doses baixas e retardam em doses elevadas. Segundo Velini e outros (2008), subdoses de glyphosate podem estimular o crescimento de uma 17 variedade de espécies vegetais. Ainda segundo os autores, doses a partir de 8% da dose recomendada começam a ser toxicas às plantas. Silva e outros (2009) citaram trabalhos utilizando subdoses dos herbicidas oxifluorfen, dalapon, bromoxinll e terbacil onde foi possível observar o aumento protéico em plantas de aveia e centeio, maior resistência a patógenos na cultura da soja e maior crescimento em plantas de trigo. Silva e outros (2012) citaram trabalhos utilizando subdoses de herbicidas onde se observou estímulos no crescimento, ganho de peso, altura, comprimento e área foliar, e características internas, como teor protéico e níveis de açúcares, em cana-de-açúcar, soja, milho, cevada, centeio, eucalipto e pinheiro. Segundo os autores, os herbicidas empregados nos testes foram o MSMA (Monosódio Metano Arsonate), oxifluorfen, terbacil, simazine e glyphosate. Desde o inicio do desenvolvimento dos herbicidas, após a Segunda Guerra Mundial, tem sido observados estímulos nas plantas em resposta a baixas doses de herbicidas. Contudo, os estudos que tem procurado elucidar os mecanismos envolvidos na estimulação do crescimento são pouco conclusivos (CEDERGREEN, 2008). Atualmente, graças ao interesse renovado em herbicida e ao avanço dos estudos nessa área, o efeito benéfico do uso de subdoses de produtos tóxicos vem sendo cada vez discutido e pesquisado, a fim de compreender o mecanismo de ação estimulante e benéfica dessas substâncias consideradas tóxicas (SILVA e outros, 2009). Estes estudos sugerem que o efeito hormese pode se tornar uma alternativa a ser empregada no sistema produtivo do café e na agricultura em geral. 3 Material e métodos O experimento foi conduzido na unidade experimental da Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia - UESB, situada no Município de Vitória da Conquista, Estado da Bahia durante os meses de setembro a novembro de 2012. Foram utilizadas mudas de Coffea arabica cv. Catuaí, adquiridas em viveiro comercial e transplantadas quando apresentavam quatro pares de folhas completamente expandidas. Junto com o café foram plantadas mudas de trapoeraba 18 (Commelina benghalensis), para simular uma competição destas com a planta do café. As mudas de trapoeraba foram produzidas por meio de propagação assexuada, com a utilização de estacas provenientes de seguimentos da planta-mãe de 15 (quinze) centímetros de comprimento medidos após a inserção do primeiro par de folhas na extremidade do ramo (figura 1). Estas estacas foram coletadas no Campus Experimental da Universidade, e mantidas em béquer contendo água (figura 2), por um período de 9 (nove) dias para a emissão das raízes adventícias, quando então foram transplantadas para vasos plásticos de jardinagem contendo solo e substrato (figura 3). Figura 1. Seguimento do ramo utilizado para a produção de muda de trapoeraba por meio de propagação assexuada. Vitória da Conquista – BA, 2012. 19 Figura 2. Estacas de trapoeraba mantidas em recipiente com água para a emissão de raízes adventícias. Vitória da Conquista – BA, 2012. Figura 3. Estacas de trapoeraba após 3 dias em contato com água . Vitória da Conquista – BA, 2012. 20 As mudas de café e trapoeraba foram cultivadas em vasos plásticos com capacidade para vinte litros, preenchidos com solo e mistura de substrato na proporção 3:1, três partes de solo para cada parte de substrato. Após o transplante das mudas, cada vaso foi periodicamente regado até atingir a capacidade de campo, uma a duas vezes ao dia, exceto nos dias chuvosos. Foi realizada capina manual das plantas espontâneas na medida em que estas sugiram nos vasos. Os vasos foram mantidos em casa de vegetação, dispostos em delineamento inteiramente casualizado (figura 4), constituindo um esquema fatorial 7x3, com sete tratamentos e três repetições para cada tratamento, totalizando 21 vasos. Foram testadas sete subdoses de glyphosate: 0,0; 1,8; 3,6; 7,2; 18; 36 e 72g -1 e.a ha , respectivamente correspondentes a 0,0; 0,12; 0,25; 0,5; 1,25; 2,5 e 5% da dose comercial recomendada (FRANÇA, 2009). Cada parcela composta com um vaso contendo uma planta de café e seis plantas de trapoeraba (figura 5). Figura 4. Disposição dos vasos em casa de vegetação contendo mudas de café e de trapoeraba. Vitória da Conquista – BA, 2012. 21 Figura 5. Vaso composto por uma muda de café e seis mudas de trapoeraba, representando a parcela experimental. Vitória da Conquista – BA, 2012. A aplicação do glyphosate ocorreu aos 30 dias após o transplante (DAT). Foi realizada aplicação direta na planta, por meio de um pulverizador costal pressurizado a CO2 (2 kgf m-3) e acoplado a uma barra contendo bico de jato plano 110.02 VS, com consumo de calda equivalente a 200 L ha-1. As avaliações dos efeitos causados pelo herbicida às plantas ocorreram aos 30 dias após a aplicação (DAA). Os parâmetros avaliados após trinta dias da aplicação foram: altura da planta, diâmetro do caule, número de folhas, índice Spad, área foliar, potencial hídrico foliar antemanhã (Ψam), peso fresco de caule, peso fresco de folha, peso fresco de raiz, peso seco de caule, peso seco de folha e peso seco de raiz. A altura das plantas foi determinada usando régua graduada em centímetros (cm) e medida da parte basal até o ápice caulinar. O diâmetro do caule foi obtido com auxilio de um paquímetro digital. A leitura ocorreu na inserção do primeiro par de folhas a partir da base caulinar. O número de folhas foi obtido por meio da contagem de todas as folhas presentes na planta. O índice Spad foi obtido com auxílio de clorofilômetro manual. As leituras foram realizadas em pontos situados da metade a dois terços do comprimento da folha amostrada, a partir da base. 22 A área foliar foi obtida de forma direta utilizando um integralizador de área foliar (LI – 3100, LI – COR, USA). O potencial hídrico foi determinado por meio de uma câmara de pressão, modelo PMS 1000, PMS. As medidas foram realizadas na primeira folha totalmente expandida em cada tratamento. As plantas foram seccionadas rente ao solo, separadas em folhas, caule e raiz. O peso fresco foi obtido por meio de pesagem do material em balança analítica. Para o peso seco o material vegetal foi acondicionado em saco de papel e mantido em estufa de circulação de ar forçado à temperatura de 60°C por um período de 48 horas. Decorrido este período, quando atingiu peso constante, o material foi pesado novamente para obter a biomassa do caule, das folhas e das raízes. Para interpretação dos dados de cada variável, os resultados foram submetidos a analise de variância da regressão, por meio do programa estatístico SISVAR. A escolha dos modelos foi baseada na análise de variância da regressão, no fenômeno biológico e no coeficiente de determinação (R2= S.Q.Reg./S.Q. Trat.) superior à 50%. 4 Resultados e discussão Neste estudo, para as variáveis altura da planta, diâmetro do caule, número de folhas, índice Spad, área foliar, potencial hídrico foliar antemanhã, peso fresco de caule, peso fresco de folha, peso fresco de raiz, peso seco de caule, peso seco de folha e peso seco de raiz, avaliadas para mudas de café plantadas em vasos, não foram verificados efeito das doses de glyphosate (Tabela 1 e 2). De modo semelhante, Silva e outros (2012), também não verificaram efeitos de subdoses de glyphosate para altura e diâmetro de caule de plantas de feijoeiro. 23 Tabela 1. Resumo da análise de variância do efeito de subdoses de glyphosate para as características morfológicas e fisiológicas de plantas jovens de café cv. Catuaí 144. Quadrados médios FV* GL* Alt* Diam* (cm) (mm) NF* Spad AF* 2 (cm ) Ψam* (MPa) Dose 6 16,847 0,00034 4,2222 127,7288 2492,0694 2,2341 Bloco 2 4,990 0,00023 0,1905 62,2554 2806,6796 7,3691 12 8,757 0,00110 8,2460 82,4850 4596,1380 3,3830 19,99 23,41 17,58 21,46 30,96 16,76 Resíduo CV(%) *FV=fonte de variação; GL=graus de liberdade; Alt=altura, Diam= diâmetro do caule; NF= número de folhas; AF= área foliar; Ψam= potencial hídrico foliar antemanhã. Tabela 2. Resumo da análise de variância do efeito de subdoses de glyphosate para as características morfológicas relativas a peso de massa fresca e seca (peso fresco de caule, PFC; peso fresco de folha, PFF; peso fresco de raiz, PFR; peso seco de caule, PSC; peso seco de folha, PSF e peso seco de raiz, PSR) de plantas jovens de café cv. Catuaí 144. Quadrados médios GL PFC PFF PFR PSC PSF PSR Doses 6 0,4154 2,2342 4,4614 0,0219 0,0745 0,1282 Bloco 2 0,2398 2,7904 16,3690 0,1999 0,2119 0,0837 12 0,7467 4,9976 8,0379 0,0400 0,4447 0,2307 48,59 37,80 43,91 32,66 44,06 51,83 Resisiduo. CV(%) Silva e outros (2009) observaram que a dose de 1,8 g e.a ha-1foi relacionada à maior altura de plantas de cana, induzindo maior altura do perfilho primário. França (2009) em estudo utilizando subdoses de glyphosate em plantas jovens de café verificou incremento de altura em doses menores e posterior redução dessa variável na medida em que as doses de glyphosate foram elevadas. Neves e outros (2009) observaram aumento de 15% na altura de plantas de algodão submetidas a doses de 18 a 33,5 g e.a ha-1. Carvalho (2011) estudando 24 café arábica submetido ao glyphosate verificou aumento de 21% na altura de plantas aos 45 dias após transplante das mudas. Velini e outros (2008) observaram que, em plantas susceptíveis ao glyphosate expostas à subdoses do herbicida, ocorreu aumento na concentração de ácido chiquímico e estimulo do crescimento. O aumento no conteúdo de ácido chiquímico pode ter efeito direto na fotossíntese e no crescimento vegetal, por meio de mecanismos ainda desconhecidos (CEDERGREEN e OLESEN, 2010). Neste estudo, os valores para o diâmetro do caule variaram entre 14, 16 e 14 mm para doses de 0,0; 7,2 e 72 g e.a ha-1, respectivamente. Portanto, houve um aumento de 14% em relação à testemunha com posterior redução de 12,5%. O maior diâmetro foi observado na dose de 7,2g e.a ha-1 (16 mm) e o menor na dose de 1,8g e.a ha-1 (12 mm), sendo verificada apenas uma tendência, sem comprovação estatística. Resultados semelhantes foram obtidos por França (2009), em seu estudo utilizando subdoses de glyphosate em plantas jovens de café, onde o diâmetro do caule não apresentou diferença após a aplicação do herbicida. De modo semelhante, Silva e outros (2012), também não verificaram efeitos de subdoses de glyphosate para o diâmetro do caule de feijoeiro. Gusmão e outros (2011) também observaram que para a aplicação de 0,0; 86,4; 172,8 e 345,6 g e.a ha-1 de glyphosate não houve diferenças no diâmetro do caule de jenipapo (Genipa americana L.). Carvalho (2011) estudando as respostas de café arábica ao glyphosate verificou aumento do diâmetro do caule em doses baixas e redução em doses mais altas. O diâmetro foi maior quando aplicado 416 g e.a ha-1 de glyphosate, sendo reduzido na dose de 2.880 g e.a ha-1. Embora tenha ocorrido homogeneidade de valores, para a relação entre o valor Spad e potencial hídrico foliar antemanhã (Ψam ) em função das doses de glyphosate, foi possível definir o modelo logaritmo. Foi observada variação do índice de Spad entre 35,05 a 49,971 nas doses de 0,0 a 72g e.a ha-1 (Figura 6). Rosa e outros (2011) estudando os efeitos da aplicação de subdoses de glifosato na concentração foliar de clorofila do algodoeiro, observaram que esta variável foi influenciada pela aplicação das subdoses de glifosato promovendo efeito significativo nas leituras Spad de clorofila. O índice Spad explica o comportamento de outras variáveis, uma vez que está relacionado ao conteúdo de clorofila na folha. Contudo, a redução no índice 25 Spad não significa que a síntese de clorofila foi inibida, tão pouco o aumento não é significa acréscimo no estímulo da síntese de clorofila (NEVES, 2009). Carvalho (2011) estudando o efeito de glyphosate em café arábica verificou que o aumento nas doses de glyphosate não influenciou o teor de clorofila. Olesen e Cedergreen (2010) verificaram estímulo na fotossíntese de plantas de cevada quando expostas à subdoses de glyphosate. Isso sugere que o efeito hormético pode estar relacionado à espécie, ou mesmo às condições do ambiente Carvalho (2011). Carvalho e Alves (2012) estudando as trocas gasosas em plantas de café submetidas à exposição ao glyphosate verificaram estimulo no processo fotossintético. Contudo, o efeito estimulante sobre a fotossíntese foi dependente do estágio de crescimento da planta no momento da aplicação. Domingues Júnior (2011), estudando o impacto do herbicida glyphosate na cultura de café, observou que o contato foliar com diferentes doses de glyphosate afetou a taxa fotossintética e a relação entre esta taxa e o conteúdo de clorofilas totais. Ainda segundo o autor, o estresse imposto pelo glyphosate mantém a taxa fotossintética em níveis semelhantes àquelas de plantas que não receberam o herbicida, somente com o estímulo à síntese de clorofilas e carotenóides. 26 Ŷ*= 3,489ln(x) + 35,05 (R2=0,712) *Significativo a 5% de probabilidade, pela análise de variância da regressão, pelo teste F. Figura 6. Relação entre índice de Spad e subdoses de glyphosate após 30 dias de aplicação em plantas jovens de café. Vitória da Conquista – BA, 2013. Apesar da homogeneidade de valores modulares de Ψam foi possível definir o modelo logaritmo, caracterizando tendência de decréscimos em função das subdoses de glyphosate (Figura 7). A elevação das doses de glyphosate parece ter estimulado mecanismos fisiológicos relacionados a alterações do status hídrico das plantas de café como o ajuste osmótico, elevação da resistência estomática e a redução da transpiração. Resultado semelhante ao obtido por Carvalho (2011), que em seu estudo das respostas de café arábica ao glyphosate observou que a aplicação de baixas doses estimulou a elevação da taxa transpiratória e a aplicação de doses mais altas provocou redução na transpiração. Esse comportamento contradiz resultados encontrados por Domingues Júnior (2011), estudando o efeito do glyphosate sobre o cafeeiro, que verificou aumento na taxa de transpiração em função do aumento das doses de glyphosate. Segundo o 27 autor, a menor susceptibilidade destes parâmetros à quantidade de composto ativo presente é decorrente de sua degradação parcial. Ŷ*= 1 -0,03ln(x) + 1,179 (R2=0,514) *Significativo a 5% de probabilidade, pela análise de variância da regressão, pelo teste F. Figura 7. Relação entre Ψam (potencial hídrico foliar antemanhã) e subdoses de glyphosate após 30 dias de aplicação em plantas de café. Vitória da Conquista – BA, 2013. 5 Conclusões O crescimento das plantas jovens de cafeeiros arábica cv. Catuaí não foi afetado pelas subdoses de glyphosate no intervalo de 0 a 72 g e.a ha-1, aos 30 DAT. Tendências de elevação de vigor fisiológico das plantas de cafeeiros foram verificadas em função dos acréscimos de doses de glyphosate. É necessário que seja realizado estudos utilizando outras cultivares de café, com amplitude maior de doses e com intervalos de tempo maior (30,60 e 90 DAA), para que o efeito hormetico do glyphosate no cafeeiro seja elucidado. 28 Referências ALCÂNTARA, E. N.; NÓBREGA, J. C. A.; FERREIRA, M. M. Métodos de controle de plantas invasoras na cultura do cafeeiro (Coffea arabica L.) e componentes da acidez do solo. Revista Brasileira de Ciência do Solo. 31: 1525-1533, 2007. ALCÂNTARA, E. N.; SILVA, R. A.; OLIVEIRA, G. S. Avaliação dos efeitos de diferentes métodos de controle de mato, nas entrelinhas do cafeeiro, sobre o crescimento do cafeeiro. In: SIMPÓSIO DE PESQUISA DOS CAFÉS DO BRASIL, VII, 2011, Araxá, MG. Anais... Araxá: VII Simpósio de Pesquisa dos Cafés do Brasil, 2011. BATISTA, M. A. V.; FREITAS, F. C. L.; TOMAZ, H. V. Q.; QUEIROZ, R. F.; DANTAS, D. J.; NASCIMENTO, P. G. M. L. Eficácia de herbicidas no controle da trapoeraba (Commelina benghalensis L.). 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Efeitos visuais de intoxicação aos 30 dias após aplicação de 18 g e.a. ha-1 de glyphosate, em plantas de cafeeiro submetidas à convivência com trapoeraba. Vitória da Conquista - BA, 2012. Figura 6A. Efeitos visuais de intoxicação aos 30 dias após aplicação de 36 g e.a. ha-1 de glyphosate, em plantas de cafeeiro submetidas à convivência com trapoeraba. Vitória da Conquista - BA, 2012. Figura 7A. Efeitos visuais de intoxicação aos 30 dias após aplicação de 72 g e.a. ha-1 de glyphosate, em plantas de cafeeiro submetidas à convivência com trapoeraba. Vitória da Conquista - BA, 2012.