ZiKa IgG/IgM ECO Teste - TR.0075C

ZiKa IgG/IgM ECO Teste - TR.0075C
Zika IgG/IgM ECO Teste é um teste rápido imunocromatográfico para a detecção e
diferenciação simultânea dos anticorpos IgG e IgM anti-Zika em amostras
humanas de soro, plasma ou sangue total. É destinado para triagem no auxilio do
diagnóstico de infecções pelo vírus da Zika.
Sumário e Explicação do Teste
O Zika Vírus é um vírus RNA de fita simples da família Flaviviridaes, gênero
Flavivirus. É transmitido aos seres humanos através da picada de mosquitos
infectados, principalmente o Aedes aegypti nas regiões tropicais e subtropicais.
Este é o mesmo mosquito que transmite a Dengue, Febre Amarela e o vírus da
Chikungunya. No entanto a transmissão sexual também foi relatada nos casos de
Zika, assim como, nestes casos, foram encontrados o vírus da Zika em amostras
de sêmen. A infecção pelo vírus da Zika provoca, geralmente, uma doença febril
com erupções maculopapular podendo durar até uma semana. No entanto, a
crescente preocupação reportada em relatórios de vários países, incluindo o
Brasil, é que a infecção pelo vírus da Zika pode estar ligada a microcefalia fetal
e neonatal e complicações neurológicas graves, como a síndrome de
Guillain-Barré. Além disso, a doença do Zika vírus é agora considerada uma
doença infecciosa emergente. Antes de 2015 não houve surtos de Zika fora da
África e das ilhas do Pacífico. Em maio de 2015, o primeiro caso de infecção foi
relatado no Brasil e casos já foram relatados em numerosos países da América do
Sul e Central. O Zika vírus provavelmente vai continuar a se espalhar para novas
áreas. Isso levou a Organização Mundial de Saúde a declarar uma emergência de
saúde pública de importância internacional ( PHEIC ) em fevereiro de 2016. Até o
momento, não há nenhuma profilaxia, tratamento ou vacina para controlar e
proteger contra a infecção pelo Zika vírus.
Portanto, são necessários grandes esforços para desenvolver um tratamento
específico, detecção precoce e o acesso a cuidados médicos adequados para o
Zika vírus.
Princípio do Teste
Zika IgG/IgM ECO Teste é um teste rápido imunocromatográfico, que pode detectar
anticorpos do Zika vírus. A tira de teste contida no cassete consiste em membrana
de nitrocelulose contendo uma linha teste IgG (linha G), uma linha teste IgM
(linha M) e uma linha controle (linha C). As linhas testes e linha controle não são
visíveis antes da aplicação das amostras. A linha controle é uma linha de
referência que indica que o procedimento do teste foi realizado adequadamente.
Uma linha colorida G e/ou M será visível na janela de resultados se IgG e/ou IgM
anti Zika estiver presente na amostra. Se o IgG e/ou IgM anti Zika não estiver
presente na amostra, nenhuma linha colorida aparecerá na janela de resultados
G e/ou M.
Reagentes e Materiais Necessários
1. Cada dispositivo é selado individualmente e contém:
a) 1 dispositivo teste.
b) 1 sachê dessecante e sílica gel.
2. Pipeta capilar.
3. Tampão diluente.
4. Manual de instruções.
Materiais que poderão ser requeridos e não são fornecidos:
1. Cronômetro.
2. Tubos para coleta.
Atenções e Precauções
Uso para Diagnóstico in vitro
1. Apenas para uso por profissionais de diagnóstico in vitro.
2. Não use os componentes do kit após a data de validade indicada na embalagem.
3. Não use o teste se a embalagem de alumínio estiver danificada.
4. Não reutilize os testes.
5. Todos os reagentes devem estar na temperatura ambiente antes de iniciar os
procedimentos.
6. Evite contaminação cruzada utilizando um novo coletor para cada amostra
obtida.
7. Não fume, beba ou coma em áreas onde as amostras ou reagentes do kit
estejam sendo manuseadas.
8. Manuseie todas as amostras como se elas contivessem agentes infecciosos.
Observe as precauções estabelecidas contra riscos microbiológicos ao longo do
procedimento e siga os procedimentos padronizados para o descarte apropriado
das amostras. Vista roupas de proteção como jalecos laboratoriais, luvas
descartáveis e óculos de proteção quando estiver analisando as amostras.
9. Umidade e temperatura podem afetar os resultados de maneira adversa.
10. ATENÇÃO: Todas as amostras humanas devem ser consideradas potencialmente infectantes. Recomenda-se que os reagentes e as amostras do paciente
sejam tratados de acordo com as normas ou outras diretrizes de segurança de
risco biológico ou regulamentos locais apropriados.
Instruções de Armazenamento e Estabilidade
Armazenar os componentes do kit em temperatura entre 2 e 30°C, até a data de
validade indicada na embalagem de alumínio selada. O teste deve permanecer na
embalagem selada até o momento do uso. Não congelar. Não armazenar o kit em
temperaturas superiores a 30°C. Deve-se tomar cuidado para proteger os
componentes do kit de contaminação. Não usar o kit se tiver evidência de
contaminação microbiológica ou precipitação. Contaminação biológica de
pipetas, coletores ou reagentes podem levar a falsos resultados.
Coleta e Manuseio das Amostras
Considerar os materiais biológicos de origem humana como infecciosos. Os
procedimentos de biossegurança deverão ser seguidos no manuseio das
amostras.
Plasma:
1. Coletar amostra de sangue em um tubo coletor de tampa azul ou verde a vácuo
(contendo EDTA, citrato ou heparina respectivamente) por punção venosa;
2. Separar o plasma por centrifugação;
3. Cuidadosamente retirar o plasma de dentro do tudo coletor e colocá-lo em um
novo tubo.
Soro:
1. Coletar amostra de sangue em um tubo coletor de tampa vermelha à vácuo (sem
anticoagulantes) por punção venosa;
2. Permitir coagulação do sangue;
3. Cuidadosamente retirar o soro de dentro do tubo coletor e colocá-lo em um novo
tubo.
Sangue total:
Gotas de sangue podem ser obtidas por punção da ponta do dedo ou por punção
venosa. Não usar sangue hemolisado no teste.
Testar as amostras assim que possível após a coleta. Se não realizar o teste,
armazenar imediatamente as amostras de 2 a 8°C por até 5 dias. As amostras
deverão ser congeladas a -20°C para armazenamento por longo período. Evitar
múltiplos ciclos de congelamento e descongelamento. Antes de realizar o teste, leve
as amostras congeladas para a temperatura ambiente e homogeneize. Amostras
contendo partículas visíveis deverão estar límpidas por centrifugação antes do
teste. Não usar amostras com aparência lipêmica, com hemólise ou turbidez para
evitar interferência na interpretação do resultado.
Procedimento
Leia atentamente as instruções antes da realização do teste.
1° Passo: Levar a amostra e os componentes do teste para a temperatura
ambiente, se refrigerados ou congelados. Uma vez que a amostra estiver
descongelada, homogeneizar antes de realizar o teste.
2° Passo: Abrir a embalagem e remover o dispositivo teste. Coloque o dispositivo
teste em uma superfície limpa e plana.
3° Passo: Identificar o dispositivo teste com o número de identificação da amostra.
4° Passo: Encher a pipeta capilar com soro, plasma ou sangue total. O volume da
amostra deve ser de 10μL. Adicione a amostra de teste na cavidade de amostra
(S) do dispositivo de teste.
5º Passo: Adicione 3 gotas (aproximadamente 90-120 μL) do tampão diluente na
cavidade do diluente.
6° Passo: Cronometrar o tempo
7° Passo: Leia o resultado do teste em 15 minutos.
*Nota: Se uma linha tênue aparecer na linha de teste, espere e leia o resultado em
30 minutos. Não leia o resultado após 30 minutos, pode gerar resultados falsos.
Inválido:
Se a linha C não aparecer, o teste é inválido mesmo com o aparecimento das
linhas G e M. A linha controle deverá sempre aparecer se o procedimento for
realizado adequadamente e os reagentes do teste forem funcionais. Repetir o
teste com um novo dispositivo.
15 mins
S
IgG/IgM
C G M
C G M
S
S
IgG/IgM
Zika
Diluente
3 gotas
IgG/IgM
Janela de Resultados
S
IgG/IgM
Zika
C G M
Zika
C G M
S
IgG/IgM
Zika
C G M
S
IgG/IgM
Zika
C G M
Zika
Tubo capilar
S
IgG/IgM
Zika
C G M
Interprete o resultado em 15 minutos
Interpretação do Resultado
Resultado Não Reagente:
Se somente a linha C aparecer, a ausência de coloração nas linhas G e M indicam
que nenhum anticorpo anti-Zika vírus foi detectado. O resultado é não reagente.
S
IgG/IgM
Zika
C G M
Resultados Reagentes:
Resultado IgG Reagente: Em adição à linha C, se a linha G aparecer, o teste indica
a presença de IgG anti-Zika na amostra. O resultado é reagente para IgG, sugerindo
estágio primário tardio, secundário precoce ou infecções anteriores. A presença da
linha G, mesmo que fraca, indica um resultado reagente para IgG anti-Zika.
S
IgG/IgM
Zika
C G M
Resultado IgM Reagente: Em adição à linha C, se a linha M aparecer, o teste
indica presença de IgM anti-Zika. O resultado é IgM reagente, sugerindo infecção
primária recente por vírus da Zika. A presença da linha M, mesmo que fraca,
indica um resultado reagente para IgM anti-Zika.
S
IgG/IgM
Zika
C G M
Resultado IgG/IgM Reagente: A presença das linhas M e G, mesmo que fracas,
indicam um resultado reagente para IgM e IgG anti-Zika. O resultado é IgG e IgM
reagente, sugerindo infecção pelo vírus da Zika primária atual ou secundária recente.
S
IgG/IgM
Zika
C G M
Controle de Qualidade
Controle Interno: Esse teste contém um controle interno embutido, a linha
controle (C). A linha C desenvolve uma coloração após a adição da amostra e
confirma que um volume suficiente de amostra foi adicionado e as técnicas de
procedimento foram corretamente aplicadas. Se a linha C não aparecer, reveja
todo o procedimento e repita o teste com um novo dispositivo.
Controle Externo: Não são fornecidos controles externos com esse kit. As Boas
Práticas de Laboratório recomendam o uso de controles externos, reagentes e não
reagentes, para confirmar o procedimento do teste e para verificar o desempenho
apropriado.
Desempenho Clínico
Foram testadas 76 amostras biológicas reagentes em 76 testes do kit Zika IgG/IgM
ECO Teste. As amostras foram consideradas reagentes se os resultados com o método
de referência fossem reagentes, ou seja, indicassem a presença de anticorpos IgG
e/ou IgM na amostra. A comparação entre os resultados segue abaixo:
Método
Kit Zika IgG/IgM
ECO Teste
Método de referência - ELISA
Resultados
Reagente
Reagente Não reagente
74
2
Resultado Final:
Sensibilidade
97,38%
Foram testadas 82 amostras biológicas não reagentes em 82 testes do kit Zika
IgG/IgM ECO Teste. As mesmas amostras foram analisadas em 82 testes com a
metodologia de referência ELISA. As amostras foram consideradas não reagentes se o
resultado com a método de referência fosse não reagente. As amostras utilizadas não
eram reagentes para Zika IgG e IgM, porém, eram reagentes para outras doenças
infecciosas como: hepatite B, Sífilis, HIV, hepatite C, Dengue, Chikungunya, Febre
amarela e West Nile virus. A comparação entre os resultados segue abaixo:
Método
Método de referência - ELISA
Resultados
Kit Zika IgG/IgM
Não reagente IgM
ECO Teste
Não reagente IgG
Reagente Não reagente
Resultado Final:
Especificidade
0
82
100%
3
79
96,34%
Limitações do Teste
Não seguir o correto procedimento do teste pode levar a resultados não precisos.
O teste Zika IgG/IgM ECO Teste é limitado qualitativamente na detecção de
anticorpos contra o vírus da Zika em soro, plasma ou sangue total. A intensidade
da linha teste não possui correlação linear com o título de anticorpos nas amostras.
O teste Zika IgG/IgM ECO Teste não pode ser usado para diferenciar infecção
primária ou secundária.
Um resultado não reagente indica ausência de anticorpos detectáveis para o vírus
da Zika. Entretanto, um teste com resultado não reagente não previne a possibilidade de exposição ou infecção pelo vírus da Zika.
Um resultado não reagente pode ocorrer se a quantidade de anticorpos contra o
vírus da Zika presente na amostra estiver abaixo do limite de detecção do teste,
ou os anticorpos que são detectados não estiverem presentes durante o estágio
da doença em cada uma das amostras coletadas.
Os resultados obtidos com o teste devem ser interpretados em conjunto com
outros procedimentos e descobertas clínicas.
Referências
1. CDC. Recognizing, managing, and reporting Zika virus infections in travelers returning from
Central America, South America, the Caribbean, and Mexico. CDC Health Advisory. Atlanta, GA: US
Department of Health and Human Services, CDC; 2016. http://emergency.cdc.gov/han/han00385.asp.
2. World Health Organization. Emergency Use Assessment and Listing (EUAL) Procedure for Zika
Virus Disease (IVDs) [Webpage]. Accessed 20 Feb 2016. Available online at http://www.who.int/diagnostics_laboratory/eual-zika-virus/zika/en/
3. Neurological Syndrome, congenital malformations and Zika virus infection. Implications for
public health in the Americas. Pan American Health Organisation WHO. 2016.
4. Hennessey M, Fischer M, Staples JE. Zika virus spreads to new areas—region of the Americas,
May 2015–January 2016.MMWR Morb Mortal Wkly 2016; 65(3).
5. Petersen EE, Staples JE, Meaney-Delman D, et al. Interim guidelines for pregnant women during
a Zika virus outbreak—United States, 2016. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 2016; 65:30–3.
6. Gourinat AC, O’Connor O, Calvez E, Goarant C, Dupont-Rouzeyrol M: Detection of Zika Virus in
Urine. Emerging Infectious Diseases 2015, 21:84-6.
7. Lanciotti RS, Kosoy OL, Laven JJ, Velez JO, Lambert AJ, Johnson AJ, Genetic and serologic
properties of Zika virus associated with an epidemic, Yap State, Micronesia, 2007. Emerg Infect Dis.
2008;14:1232–9.
8. Zika virus infection-the next wave after dengue? Wong SS et al. J Formos Med Assoc. 2016,
S0929-6646(16)00077-2.
Fabricante: ECO Diagnóstica LTDA – ME.
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Reg. MS. 80954880016 | Edição: 10/2017.