Curso/habilitação: Ciências Biológicas/Licenciatura Disciplina: BIOLOGIA Créditos: 04 MOLECULAR E BIOTECNOLOGICA Período: 6º Objetivos da Disciplina: • Desenvolver um conteúdo básico e atualizado de biologia molecular, divulgando os recentes avanços nas pesquisas em DNA, RNA e proteínas em células procariontes e eucariontes. Ementa: Ácidos Nucléicos: estrutura do DNA e RNA; replicação; transcrição e tradução. Organização e controle da expressão gênica em procariontes e eucariontes. Tecnologia do aDNa recombinante. Biotecnologia Animal e Biotecnologia Vegetal. Conteúdos Programáticos: • Análise e discussão do artigo: "É o DNA - primeira forte evidência entre ácido nucléico e hereditariedade." DNA: estrutura, propriedades (desnaturação, reanelamento) e importância. • Replicação do DNA: origem de replicação, mecanismo básico, enzimas envolvidas e ocorrência. Atividade prática: extração de DNA vegetal (morango e banana). • RNA: estrutura, propriedades e transcrição em eucariotos. At. prát: extração de DNA humano (precipit. por sais). • RNAs de eucariotos, processamento do RNA (spliccing, poliadenilação, metilação e CAP), edição de RNA. Código genético: características, códigos genéticos alternativos e síntese protéica. At. Prát.: síntese protéica, GBOL • Estrutura dos RNAs envolvidos na síntese, etapas da síntese protéica. Organização gênica em procariontes: genes e genomas procariotos, plasmídeos, bacteriófagos e elementos transponíveis. Atividade prática: construção de um plasmídio recombinante. • Organização gênica em eucariotos: organização geral do genoma, compactação do material genético. Atividade prática: montagem de um gel de agarose. • Genoma humano: organização e distribuição dos genes, famílias multigênicas, genoma mitocondrial. Seqüências de DNA repetidas extragênicas. Polimorfismos. Projeto Genoma Humano. Estudo do artigo - "Páginas ocultas no livro da vida." Atividade prática: PCR (reação em cadeia da polimerase). • Instabilidade do genoma humano: mutações, mutações patogênicas, identificação e conseqüências das mutações. At. prát: identificação do gene da beta globina e suas mutações; software para estudo de mutações e polimorfismos. • Mecanismos de reparo no DNA, alterações nos genes de reparo e conseqüências. • Controle da expressão gênica: em procariontes: regulação gênica, estratégias e operons. • Controle da expressão gênica em eucariontes: diferenciação celular, restrição temporal e espacial da expressão gênica, controle da expressão gênica.Transcrição alternativa, processamento individual de genes. • Atividade prática: utilização de enzima de restrição em análise de DNA mitocondrial, simulando a digestão com enzimas de restrição e aplicação dos RFLPs na identificação de mutações.Estudo de um artigo: -"Sensores Internos". • Tecnologia do DNA recombinante: características, importância e aplicações. • • • • Clonagem do DNA, protocolos de extração e replicação do DNA in vitro (PCR), aplicações da técnica. Enzimas de restrição: obtenção, aplicações, vantagens Vetores de clonagem, moléculas de DNA recombinante, eletroforese. Atividade prática: preparo de um gel de acrilamida para SSCP, eletroforese e análise dos resultados com identificação das alterações encontradas no gel. Seqüenciamento do DNA. Análise molecular de DNA, RNA e proteínas. Marcadores moleculares: tipos, importância e utilização. Transferência de DNA ente células: princípios, técnica e aplicabilidade). Biotecnologia vegetal: cultura de tecidos vegetais, transformação genética de plantas, expressão de genes em plantas. Biotecnologia Animal: transgênese, transferência de genes em células humanas, terapia gênica e perspectivas. Atividade prática. Análise de microssatélites em paternidade e identificação humana. Atividade prática alternativa: identificação de suspeitos e trocas de crianças. Bibliografia Recomendada: Básica: ALBERTIS, B. et al. Biologia Molecular da Célula 3.ed. Artes Médicas, Porto alegre. 1997. 294p. BORGES OSÓRIO, M. R & ROBINSON, W. M. Genética Humana. 2.ed. Porto Alegre: Artes Médicas, Editora da Universidade UFRGS, 2001. BROWN, T. A. Genética: um enfoque molecular 3 ed. Rio de Janeiro, Guanabara/Koogan, 1999. GRIFFITHS, AJF et al. Genética Moderna Rio de Janeiro: Guanabara/Koogan, 2001. HOFFE, Patricia A. Genética Médica Molecular Rio de Janeiro: Guanabara/ Koogan, 2000 NUSBAUM, Robert L. et al. THOMPSON & THOMPSON: Genética Médica Trad. Paulo Armando Motta. Rio de Janeiro: Guanabara/Koogan, 6 ed. 2002. STRACHAN, Tom & READ, Andrew. Genética Molecular Humana trad. Henrique Bunselmeyer Ferreira et al. 2.ed. Porto Alegre, Artmed Editora, 2002. ZAHA, A; FERREIRA, H.B.; PASSAGLIA, L.M.P. (Organizadores) Biologia Molecular Básica. 3.ed. Porto Alegre: Mercado Aberto, 2003. Complementar: LEWIS, R. Genética Humana: conceitos e aplicações. Trad. Paulo Armando Motta. 5.ed. Rio de Janeiro, Gauanabara/Koogan, 2004. LODISH, H. et al. Biologia Celular e Molecular. Trad. Fernando Gomes do Nascimento et al. 4.ed. Rio de Janeiro, Livraria e Editora Revinter Ltda, 2002. LEWIN, Benjamin GENES VI New York, Oxford University Press, 1997. WATSON, James D. et al. O DNA Recombinante trad. Elio Hideo Babá (coord.). 2.ed. UFOP, Ouro Preto, 1997. On line Molecular Cell Biology http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/bv.fcgi?call=bv.View..ShowTOC&rid=mcb.TOC Outros livros disponíveis on line http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Literature/index.html