Investigação de micro-organismos por meio de cultivo e observação

ORIGEM E EVOLUÇÃO
DA VIDA
HIPÓTESES SOBRE A ORIGEM
DA VIDA E A VIDA PRIMITIVA
EXPERIMENTO
• Investigação de micro-organismos
por meio de cultivo e observação de
fungos e bactérias – Aula 3
Versão: agosto 18, 2011 3:43 PM
Investigação de micro-organismos por meio de cultivo e observação de fungos e bactérias – Aula 3
1. Resumo
Esse experimento visa demonstrar a existência de micro-organismos no ambiente através do cultivo de fungos e
bactérias em meios nutritivos, permitindo uma discussão sobre a teoria da abiogênese. O protocolo experimental
proposto permitirá abordar as relações entre o metabolismo dos micro-organismos, as condições do meio de cultivo e
o conceito de esterilização. Nesta terceira aula, os alunos irão acompanhar o desenvolvimento dos micro-organismos
que foram inoculados na aula anterior.
2. O experimento
2.1 Materiais
•Placas de Petri com meios de cultivo inoculados na aula anterior;
•Vasilhas com legumes cozidos preparados na aula anterior
2. 2 Procedimento
2.2.1 Protocolo Experimental
1) Observar o crescimento de colônias isoladas no meio de cultivo inoculadas na aula anterior;
Nos nossos testes, observa-se o crescimento de colônias de bactérias que apresentam aspecto leitoso, com
superfície arredondada.
Figura 1: Culturas inoculadas com material de mucosa da boca.
Figura 2: Culturas inoculadas com material retirado do dinheiro (A) e de suspensão de solo (B).
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É possível que algumas colônias adquiram colorações diferentes no meio, como foi o caso, no nosso teste, das
bactérias inoculadas da cédula de dinheiro (Figura 2A).
Como o repolho roxo adicionado ao meio atua como um indicador de pH, a mudança de cor indica diferentes pH.
Para auxiliá-lo, realizamos um ensaio relacionando a cor do extrato e o pH. Aferimos o pH de vários tubos de ensaio
contendo soluções de extrato de repolho em meio ácido, neutro e básico. A Figura 3 mostra a escala obtida, que poderá ser usada na análise dos resultados deste experimento.
A
B
Figura 3: Indicador de pH. Ensaio com repolho roxo, adicionando ácido e base (A). Escala de cores feita a partir do ensaio
com repolho roxo (B).
2) Comparar a coloração das colônias com a escala de pH fornecida para verificar a produção de ácidos e álcalis;
Se o meio deixar de ser sólido, as bactérias estão produzindo substâncias proteolíticas, ou seja, que degradam a
gelatina, composta essencialmente de proteínas.
3) Observe que nos potes de plástico desenvolveram-se fungos com cores e formas diferentes (Figuras 4 e 5).
Figura 4: Crescimento de micro-organismos cultivados em papel filtro com
cenoura.
Figura 5: Crescimento de micro-organismos cultivados em papel filtro com beterraba.
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Segurança: Não abra as placas de Petri nem os potes. Os fungos soltam esporos que podem ser inalados. Para descarte do material, vede os potes de plásticos (Figura 6) e jogue no lixo. Caso queira reutilizar as Placas de Petri, abra
o mínimo possível e insira álcool. Deixe por alguns minutos para só depois lavá-las.
Figura 6: Vedação do material para descarte.
Professor, você pode discutir com os alunos o porquê dos alimentos estragarem. Na geladeira, o alimento conserva-se por mais tempo porque a baixa temperatura retarda o crescimento de micro-organismos. Estragar, portanto, significa que houve uma proliferação de micro-organismos num meio nutritivo, no caso, no alimento. Discuta com eles
também porque é aconselhável que os alimentos guardados na geladeira sejam mantidos em recipientes tampados.
Aproveite para relacionar a atividade com o desenvolvimento de doenças e com os hábitos de higiene ao manipular
alimentos.
Finalize perguntando: “Os micro-organismos surgem da matéria inerte, do “nada”, ou da reprodução de outros
pré-existentes?
3. Sugestão de roteiro de trabalho
A seguir, sugerimos um roteiro de trabalho para ser utilizado na íntegra ou adaptado e que poderá ser entregue
aos alunos. Ele contém todas as orientações necessárias para o desenvolvimento da aula prática e também algumas
questões que auxiliarão no fechamento da atividade.
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PRÁTICA LABORATORIAL DE BIOLOGIA
Investigação de micro-organismos por meio de cultivo e observação de
fungos e bactérias – Aula 3
Nome: __________________________ N°_____ Série: _____ Data: ________
Objetivo da aula prática:
Observação dos micro-organismos cultivados na aula anterior.
Protocolo Experimental
Materiais:
•Placas de Petri com meios de cultivo inoculados na aula anterior;
•Vasilhas com legumes cozidos preparados na aula anterior.
Procedimento:
1. Observar o crescimento de colônias isoladas no meio de cultivo inoculadas na aula anterior. Você
deverá observar se houve alteração nos meios de cultivo em cada placa de Petri. As tampas não podem
ser abertas, pois se trata de material biológico contaminante.
Para ajudá-lo na observação, sugerimos que preencha a tabela abaixo.
Tabela 1-Resultados observados nas culturas com placa de Petri.
Local de coleta
Coloração inicial do
meio de cultivo
Coloração final do meio
de cultivo
Houve proliferação de
micro-organismos?
2. Caso tenha ocorrido proliferação de micro-organismos, assinale na tabela abaixo o que pode ser
observado:
Tabela 2- Observações decorrentes da proliferação de micro-organismos
Local de coleta
Micro-organismos origi- Micro-organismos origi- Micro-organismos origi- Notou a presença de mais de
naram estruturas com naram estruturas com naram estruturas com um tipo de estrutura se debordas arredondadas?
aspecto leitoso?
aspecto filamentoso? senvolvendo? Quantas eram?
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3. Escolha 2 colônias cultivadas e esquematize, indicando as cores. Compare a coloração das colônias
das placas com a escala de pH abaixo. Se as cores do repolho se alteram com o pH, houve mudança
de pH nas colônias observadas? Indique os pH das colônias nos esquemas.
Figura 1: Escala de pH feita a partir de extratos de repolho roxo, um indicador natural de
pH. Em cada valor de pH, representado pelos números, o extrato adquire uma cor diferente.
Local de coleta de micro-organismos (inóculo 1): ____________________
Local de coleta de micro-organismos (inóculo 2): ____________________
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Questões:
4. Observe o crescimento dos micro-organismos nos potes plásticos. Qual o tipo de micro-organismos
predominante (bactéria ou fungo)? Quais as estruturas observadas que o levaram a essa conclusão?
5. Com os experimentos que você fez, proponha explicações para o apodrecimento dos alimentos.
6. Com os nossos experimentos, podemos derrubar a teoria da geração espontânea. De onde provieram, então, os micro-organismos cultivados?
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4. Referências complementares
1. Pasteur e a Microbiologia. Artigo que apresenta uma análise histórica sobre os experimentos de L. Pasteur e
o surgimento da microbiologia.
PORTOCARRERO, V. Revista da Sociedade Brasileira de História da Ciência (SBHC), v. 5, 1991.
Disponível em: http://www.mast.br/arquivos_sbhc/215.pdf
Acesso em: 11/09/2009
2. Cinco Chaves para uma alimentação mais segura: manual. Documento do Departamento de Segurança Alimentar, Zoonoses e Doenças de Origem Alimentar da Organização Mundial de Saúde (OMS).
Disponível em: http://www.who.int/foodsafety/consumer/manual_keys_portuguese.pdf
Acesso em 15/09/2009
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FICHA TÉCNICA
Universidade Estadual de Campinas
Reitor: Fernando Ferreira Costa.
Vice-reitor: Edgar Salvadori de Decca.
Pró-reitor de pós-graduação: Euclides de Mesquita Neto.
Instituto de Biologia
Diretora: Shirlei Maria Recco Pimentel.
Diretor Associado: Flavio Antonio Maës dos Santos.
EXECUÇÃO
Projeto EMBRIAO
Coordenação geral: Eduardo Galembeck.
Coordenação de Mídia - Audiovisuais: Eduardo Paiva.
Coordenação de Mídia - Software: Eduardo Galembeck.
Coordenação de Mídia - Experimentos: Helika A. Chikuchi, Marcelo J. de Moraes e Bayardo B. Torres.
Apoio Logístico/Administrativo: Eduardo K. Kimura, Gabriel G. Hornink, Juliana M. G. Geraldi.
OBJETO DE
APRENDIZAGEM
Identificação de micro-organismos por meio de cultivo e observação de fungos e bactérias - Aula 3
Coordenação do Experimento: Bianca Caroline Rossi Rodrigues.
Redação: Bianca Caroline Rossi Rodrigues, Maurício Aurélio Gomes Heleno, Helika A. Chikuchi,
Miritis Maria Gianciani Ferraz , Maria Sílvia V. Gatti e Eduardo Galembeck.
Pesquisa: Bianca Caroline Rossi Rodrigues, Maurício Aurélio Gomes Heleno e Roney Vander dos
Santos.
Revisão de Conteúdo: Daniela Kiyoko Yokaichiya e Helika A. Chikuchi.
Testes de Bancada e Captura de Imagens: Gislaine Lima Marchini e Roney Vander dos Santos.
Edição de Imagem: Florencia María Piñón Pereira Dias.
Adequação Linguística: Lígia Francisco Arantes de Souza, Raquel Faustino e Marina Gama.
Diagramação: Henrique Oliveira e Thais Goes.
A Universidade Estadual de Campinas autoriza, sob licença Creative Commons – Atribuição 2.5
Brasil - cópia, distribuição, exibição e execução do material desenvolvido de sua titularidade, sem
fins comerciais, assim como a criação de obras derivadas, desde que se atribua o crédito ao autor
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Licença idêntica a esta. Estas condições podem ser renunciadas, desde que se obtenha permissão
do autor. O não cumprimento desta licença acarretará nas penas previstas pela Lei nº 9.610/98.
Laboratório de Tecnologia Educacional
Departamento de Bioquímica
Instituto de Biologia - Universidade Estadual de Campinas – UNICAMP
Rua Monteiro Lobato, 255
CEP 13083-862, Campinas, SP, Brasil
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