Efeito da procianidina B2 na fragmentação do DNA e inibição do

56º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 56º Congresso Brasileiro de Genética • 14 a 17 de setembro de 2010
Casa Grande Hotel Resort • Guarujá • SP • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2
40
Efeito da procianidina B2 na fragmentação do
DNA e inibição do crescimento de linhagem de
adenocarcinoma mamário humano
Avelar, MM; Gouvêa, CMCP
Laboratório de Cultura de Células, Instituto de Ciências da Natureza, Universidade Federal de Alfenas, Minas Gerais.
[email protected]
Palavras-chave: Tumor mamário, barbatimão, lesão de DNA, cultura de células, células MCF-7
O câncer de mama é o mais frequente entre as mulheres. O tratamento preconizado pela OMS à paciente com câncer
de mama baseia-se na quimioterapia. A ciclofosfamida (CP), utilizada no tratamento do câncer de mama como neoadjuvante e adjuvante, é alquilante do DNA. Entretanto, a efetividade terapêutica é limitada por sua alta toxicidade
hematopoética, renal e cardíaca. Assim, é importante a prospecção de novas substâncias que possam contribuir
para o controle desta enfermidade. Estudos prévios do laboratório demonstraram que a fração aquosa obtida, a
partir do extrato acetônico de folhas de barbatimão [Stryphnodendron adstringens (Martius), Coville, Mimosaceae],
foi citotóxica para células de adenocarcinoma humano em cultura, MCF-7. A fração era composta, principalmente,
por procianidina B2 (principal componente). O objetivo do presente trabalho foi verificar se a procianidina B2 induz
a fragmentação do DNA e apresenta atividade antiproliferativa para células de adenocarcinoma mamário, MCF-7.
As células (2x104 cel/mL), provenientes do Banco de Células do Rio de Janeiro, foram cultivadas em meio RPMI,
20% de soro fetal bovino e antibióticos, em placas de 96 poços, para a extração de DNA e análise da proliferação
celular. As células foram incubadas por 24 e 48 h com procianidina B2 (Sigma) em diferentes concentrações (0,5;
1,0; 5,0; 10,0; 25,0; 50,0 mM). Decorrido o tempo o DNA foi extraído utilizando-se fenol:clorofórmio e analisado por
eletroforese em gel de agarose a 1%. Para avaliar a proliferação celular foi realizado o teste da sulforrodamina B (SRB).
Os resultados demonstraram que o tratamento das células com a procianidina B2 não induziu a fragmentação do
DNA, com padrão de clivagem internucleossômica. Isto pode ter ocorrido porque estas células apresentam mutação
no gene CASP3 e a expressão de caspase 3 ativa é importante para a clivagem internucleossômica do DNA. O ensaio
de SRB demonstrou diminuição significativa (p<0,001) do crescimento das células tratadas com procianidina B2,
em comparação ao controle. A inibição (%) obtida para as diferentes concentrações de procianidina B2 foi: 17,97
± 2,94; 14,73 ±1,21; 15,41 ± 0,60; 27,24 ± 2,11; 64,39 ± 3,07; 53,11 ± 5,50 respectivamente. Os resultados permitem
concluir que a procianidina B2 inibiu a proliferação de células MCF-7 (efeito dependente da concentração) e não
induziu a fragmentação do DNA, provavelmente porque as células MCF-7 apresentam mutação no gene CASP3.
Agradecimentos: FAPEMIG, PROBIC-UNIFAL, PET-MEC-SESU.