Disciplina: MICROBIOLOGIA I Aula: Crescimento Bacteriano

Disciplina: MICROBIOLOGIA I
Aula: Crescimento Bacteriano
Profa Dra Cristina L S Petrarolha Silva
FEA Fundação Educacional de Andradina
FISMA-FCCA
1-Considerações Gerais
Crescimento em bactérias:
◦ Individual
◦ populacional
Crescimento é um somatório dos
processos metabólicos progressivos,
que normalmente conduz à divisão
com concomitante produção de duas
células-filhas a partir de uma.
http://vsites.unb.br/ib/cel/microbiologia/divisao/divisao.html#fissao
http://vsites.unb.br/ib/cel/microbiologia/divisao/Mitose.jpg
www.youtube.com
Tamanho bacteriano adulto
◦ O que é?
◦ Quem o influencia?
Idade bacteriana
◦ O que é?
Termos para crescimento
microbiano
Taxa de crescimento (velocidade específica
de crescimento): é a variação no número ou
massa de microrganismos por unidade de
tempo.
Tempo de geração: é o intervalo de tempo
necessário para que uma célula se duplique.
◦ O tempo de geração é variável para os diferentes
organismos, podendo ser de 10 a 20 minutos até dias,
sendo que em muitos dos organismos conhecidos, este
varia de 1 a 3 horas.
◦ O tempo de geração não corresponde a um
parâmetro absoluto, uma vez que é dependente de
fatores genéticos e nutricionais.
IMPORTANTE
Toda bactéria tem seu ambiente ideal
onde encontra condições ótimas de
crescimento.
Uma pop bacteriana é um SISTEMA
DINÂMICO, com células se dividindo
e células morrendo o tempo todo.
Tubo à direita, meio BHI sem semeadura; tubo à
esquerda, meio BHI após crescimento bacteriano.
Observar turvação indicativa de multiplicação microbiana
http://www.microbiologia.vet.br/ImagensBacteriologia.htm
Meio com crescimento bacteriano apresentando sedimento
(deposição de bactérias).
2- Métodos de medida
Desenvolvimento da cultura
bacteriana:
◦ Aumento da quantidade de protoplasma
◦ Aumento do número de microorganismos
2.1- Métodos para estimar
2.1massa ou aumento de
protoplasma
◦ DIRETOS
Centrifugação
Peso Seco
◦ INDIRETOS
Nitrogênio
Colorimetria ou espectrofotometria
Consumo de Metabólito ou Acúmulo de
produto do metabolismo
Turbidimetria
Turbidímetro
Leitura em 660nm
Curva padrão
Não destrutiva
Não diferencia céls viáveis
das céls mortas
Colorímetro
2.2- Métodos para estimar o
2.2número de microorganismos
DIRETOS
◦ Contadores de partículas
◦ Câmaras de contagem
◦ Esfregaços corados
INDIRETOS (células viáveis)
◦ Diluição Seriada ou do número mais
provável (NMP)
◦ Plaqueamento em Meio Sólido (UFC)
Contagem direta
Câmara de Neubauer
Contagem indireta
http://mednt.jp/dilution%2Btechnique
Contagem Indireta
Técnica da Diluição Seriada
http://bervieira.sites.uol.com.br/dilui.htm
Contagem em placas:
Contagem em placas:
Técnica Pour Plate
http://www.practicalbiology.org/areas/advanced/health-and-disease/hygiene/making-a-pourplate,98,EXP.html
http://biology.clc.uc.edu/fan
khauser/Labs/Microbiology
/Meat_Milk/Pour_Plate.htm
Técnica da membrana filtrante
Técnica número mais provável
http://laboratoriodemicrobiologiadeali
mentos.blogspot.com/
3- Curva de Crescimento
Utilizar apenas CULTURA PURA
Representação gráfica do aumento do
número de indivíduos em um
determinado período de tempo
3- Curva de Crescimento
fases de desenvolvimento de uma cultura
bacteriana
adaptação, desenvolvimento (crescimento),
extinção de nutrientes e morte
Fases: lag, exponencial, estacionária e
morte
Curva de Crescimento Sistema
Fechado
Fase Lag ou Latente
Período de adaptação, intensa atividade
metabólica
Ausência de divisão
Longa: inóculo pequeno, cultura velho,
meio e T desfavoráveis
Pode inexistir
Fase logarítimica ou exponencial
Divisão máxima
Progressão geométrica de razão 2
Fatores determinantes do crescimento
Fase estacionária
Escassez de nutrientes ou acúmulo
de metabólitos
Bactérias crescem muito lentamente
ou número de mortes é igual ao de
novas
Fase de declínio ou morte
Morte das bactérias
Lento ou exponencial
Curva de Crescimento Sistema
Fechado
Curva Diáuxia
◦ duas fontes de carbono
◦ após término da primeira, inicia-se uma
nova curva
Crescimento em culturas
contínuas
Estes são respectivamente
controlados pela concentração do
nutriente limitante (fonte de C ou N) e
pela taxa de fluxo (taxa de diluição).
Em baixas concentrações do
nutriente limitante, a taxa de
crescimento é proporcional à
concentração do nutriente
Se houvesse:
◦ Suprimento ilimitado de nutrientes +
◦ Ambiente inalterável +
◦ Espaço ilimitado
Quimiostato
http://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/12crecimiento.
htm
Equações para determinação dos
parâmetros de crescimento
O tempo de geração pode ser
calculado quando uma cultura
encontra-se em fase exponencial,
pela fórmula abaixo:
N=No.2n
onde
N= número final de células
No= número inicial de células
n= número de gerações
n= log(N) - log(No)/0,301
G = t/n
onde
G= tempo de geração
t= tempo de crescimento
n= determinado acima.
4- Efeito dos fatores ambientais
no Crescimento Bacteriano
4.1-Temperatura
Tipos de Bactérias em Relação a
Temperatura
4.2- pH
4.3- Tensão de Oxigênio
4.4- Água
4.5- Pressão Osmótica
Fontes de Consulta
TRABULSI, L. R.; ALTERTHUM, F.;
Microbiologia. 4. ed. rev. e atual. São
Paulo: Atheneu, 2005. 718 p.
Imagens:
◦ www.google.com.br