Sorologia por Elisa e Soroneutralização de doenças virais em

SOROLOGIA POR ELISA E SORONEUTRALIZAÇÃO DE DOENÇAS VIRAIS
EM AMOSTRAS DE BOVINOS LEITEIROS
Katlyn Cardoso de Barros1, Thaís Michel2, Fabrine Finkler3, Candice Schmidt4, Thais
Fumaco Teixeira5, Paulo Michel Roehe6 e Laura Lopes de Almeida7
Sorologia é comumente usada para confirmar o diagnóstico de doenças virais uma vez
que a presença de anticorpos é uma evidência indireta da exposição de animais frente a
um agente infeccioso estudado. ELISA é um teste sorológico prático e rápido. Enquanto
soroneutralização é um teste mais laborioso, necessita de cultivo celular, manipulação
de amostra viral referência, estrutura laboratorial mais complexa e pessoal treinado. As
principais doenças virais de bovinos, envolvidas na síndrome reprodutiva, são diarreia
viral bovina (BVD) e rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR). Ambas as enfermidades
impactam negativamente a saúde dos bovinos e vem sendo diagnosticadas em rebanhos
bovinos no Rio Grande do Sul ao longo dos anos. Objetivo do trabalho foi realizar
sorologia por ELISA e soroneutralização das duas principais doenças virais em
amostras de bovinos leiteiros. No trabalho foram analisadas 112 amostras de soros de
bovinos leiteiros de agricultores familiares domiciliados no município de Eldorado do
Sul. Os animais não foram vacinados para vírus da BVD ou herpesvírus bovinos, agente
causador da IBR. Os soros foram colhidos em junho e julho de 2012 e permaneceram
congelados até as análises. Foi realizada soroneutralização com soros diluídos ½ e
expostos a amostra viral-referência de herpesvírus bovino tipo 1 “Los Angeles”.
Posteriormente foram adicionadas células suscetíveis para indicação da atividade viral e
os cultivos celulares foram incubados por três dias à 37OC, em câmara úmida e
atmosfera controlada com 5% de CO2. A leitura da prova foi realizada em microscópio
óptico. O teste de ELISA indireto comercial foi usado para detectar anticorpos totais
contra vírus da BVD, nele os soros foram diluídos 1/5 conforme as instruções do
fabricante. No teste de soroneutralização foram identificadas 45 amostras soropositivas
para herpesvírus bovino e no teste de ELISA, 14 amostras foram reagentes para BVD.
As amostras soropositivas comprovaram a exposição dos animais aos vírus estudados,
uma vez que os bovinos não foram previamente vacinados. As frequências de
soropositivos também indicaram maior circulação de herpesvírus bovinos (40%) do que
vírus da BVD (13%) nos animais estudados. Os resultados demonstraram a importância
da investigação laboratorial de doenças virais (BVD e IBR) na monitoria sanitária para
rebanhos leiteiros no Rio Grande do Sul.
Apoio: Fapergs, Finep
1
Bolsista Probic/Fapergs, Fepagro - Instituto de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor (IPVDF),
Eldorado do Sul, Graduanda em Biomedicina – Centro Universitário Ritter dos Reis (UNIRITTER). Email: [email protected]
2
Mestranda, Programa de Pós-graduação em Saúde Animal (PPGSA), Fepagro – Instituto de Pesquisas
Veterinárias Desidério Finamor (IPVDF), Eldorado do Sul
3
Mestranda, Ciências Veterinárias – Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)
4
Doutoranda, Ciências Veterinárias – Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)
5
Pós-doc, Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
6
Pesquisador, Fepagro – Instituto de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor (IPVDF), Eldorado do
Sul e ICBS (UFRGS)
7
Pesquisador, Fepagro – Instituto de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor (IPVDF), Eldorado do Sul
(Orient.). E-mail: [email protected]