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RECEPTORES A3A MODULAM O COMPORTAMENTO E O
SISTEMA SEROTONINÉRICO NO ZEBRAFISH: MEDIAÇÃO
PELA VIA DO ÓXIDO NÍTRICO
Suéllen de Nazaré dos Santos1, Monica Gomes Lima1,2, Karen Renata Matos Oliveira2 , Evander de Jesus Oliveira
Batista2 , Domingos Wanderley Picanço-Diniz3 , Anderson Manuel Herculano2, Caio Maximino1,2
1
Laboratório de Neurociências e Comportamento, Centro de Ciências Biológicas e da Saúde, Universidade do Estado do Pará, Marabá, Pará
2
Laboratório de Neuroendocrinologia, Instituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal do Pará, Belém, Pará
3
Universidade Federal do Oeste do Pará, Oriximiná, Pará
[email protected]
OBJETIVOS: Avaliar o papel do receptor A3A na modulação do comportamento tipo-ansiedade e nos
níveis extracelulares de serotonina (5-HT) no cérebro do paulistinha (Danio rerio), assim como a
possível mediação por canais de cálcio do tipo L e pelo sistema nitrérgico nesse processo.
A
B
A
B
MÉTODOS:
Tabela 1. Representação esquemática dos métodos do trabalho
Figura 1. (A) Teste de preferência claro/escuro; (B)
Técnica de cromatografia de alta eficácia (CLAE).
Figura 4. Efeitos do IB-MECA no Teste do Tanque Novo são independentes do SERT
(A) e dependentes da NOS e dos canais cálcio tipo L (B) (p < 0,001).
A
B
Figura 5. Efeitos do IB-MECA no teste claro/escuro são mediados pelo transportador de
serotonina (A), o mesmo não é observado no teste do tanque novo (B) (**=p<0,01;
***=p<0,001).
C
D
CONCLUSÕES: A ativação do receptor A3A pelo IB-MECA reduz o comportamento tipo-ansiedade
por um mecanismo dependente de receptores DHP, óxido nítrico e SERT. A diminuição nos níveis
extracelulares de 5-HT, de forma dependente de cálcio e óxido nítrico, sugere uma modulação na sua
recaptação. A via cálcio-NOS-SERT parece mediar o efeito ansiolítico do IB-MECA . Ao contrario da
scototaxia que é diminuida pelo IB-MECA , a geotaxia é influenciada por uma via dependente de NOS
e independente de SERT e canais de Ca2+ tipo L ( Fig. 7, 8 e 9).
A
H
A
Figura 7. O tratamento com IB-MECA in vivo
diminui a serotonina extracelular ex vivo, esse
efeito é dependente de canais de calcio tipo-L e
óxido nítrico (p<0,05).
F
E
G
A
B
C
C
B
D
Figura 6. O IB-MECA aumenta a captação de serotonina no cérebro do zebrafish (A e B), um efeito dependente de canais de cálcio tipo-L (C) e uma via NOS-GMPc intacta (D) (**=p<0,01;
***=p<0,001).
.
Figura 2. Efeitos do IB-MECA no teste
claro/escuro. Os dados mostram que as
doses de 0.01 e 0.1 mg/Kg aumentaram o
tempo no compartimento branco (A),
diminuíram a latência de entrada branco
(B); não foram observadas diferenças no
número de quadrantes cruzados (C), no
número de entradas no branco (D), na
tigmotaxia
(E),
nos
eventos
de
congelamento (F) e no nado errático (G).
Porém a avaliação de risco diminuiu com a
dose elevada (H) (* = p<0,05; ** = p<0,01;
*** = p<0,001).
B
Figura 8. Representação da sequência comportamental no teste do tanque novo após tratamento com veículo (A) e IB-MECA 0.01
(B) e 0.1 (C) mg/Kg. ES= Nado Errático (Erratic Swimming); DR=flutuar (Drifting); SS= Nado lento (Slow Swimming); FR=
Congelamento (Freezing).
A
B
C
D
E
F
Figura 3. Efeitos do IBMECA na preferencia do
escuro são dependentes
dos canais de cálcio
tipo-L (A) e da óxido
nítrico sintase (NOS) (B)
(p=0,0019).
Figura 10. Diagrama esquemático das vias do A3A-R na mediação da scototaxia, geotaxia,
neofobia, excitação no zebrafish. Na scototaxia a ativação do A3A-R leva a abertura dos
canais de cálcio tipo-L que por sua vez aumentam a atividade da NOS causando um aumento
na captação de 5-HT , diminuindo assim a scototaxia. Por outro lado, a geotaxia é dependente
da atividade da NOS e independente dos canais de cálcio tipo-L e SERT .
Apoio: CAPES, CNPq
Figura 9. Os Efeitos do IB-MECA sobre parâmetros do tanque novo são dependentes
da dose (*=p<0,05; ***=p<0,001) .