Genética de Bactérias
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Genética de Bactérias Descrição de mutantes Mecanismos de recombinação Mapeamento de genes Prof. Manoel Victor Considerações iniciais | Microrganismos no contexto da Genética z 1940 com Beadle & Tatum • mutantes auxotróficos em Neurospora crassa z 1946 com Lederberg & Tatum • comprovação da transferência de genes por conjugação bacteriana Prof. Manoel Victor Pré-requisitos para estudos de Genética | possibilidade de obtenção e detecção de mutantes mutantes auxotróficos z mutantes morfológicos z mutantes resistentes a agentes inibidores de crescimento z • antibióticos • bacteriófagos Prof. Manoel Victor Pré-requisitos para estudos de Genética | Ocorrência de eventos de recombinação transformação bacteriana z conjugação bacteriana z • sexodução z transdução • generalizada • restrita Prof. Manoel Victor II Mutantes bacterianos | auxotróficos z incapazes de crescimento em meio mínimo • meio mínimo – 1 fonte de carbono (energia) e sais minerais • ex: thr-, lys-, arg-, etc | morfológicos coloração de colônias z formato das colônias,etc z Prof. Manoel Victor Mutantes bacterianos II | temperatura sensíveis (ts) z | inativação de enzimas quando expostos a 37º ou 42º C, etc resistentes a agentes inibidores de crescimento z antibióticos – Apr, Kanr, Str, Cmr (plasmideos) z Prof. Manoel Victor bacteriófagos - λ, P22, etc Crescimento bacteriano típica curva de crescimento | Prof. Manoel Victor Diluição em série 10-3 Prof. Manoel Victor 10-4 10-5 Clones bacterianos Prof. Manoel Victor Transformação bacteriana | Griffith z | (1928) D. pneumoniae principio transformante termo-resistente Avery et al. (1944) D. pneumoniae z uso de enzimas (DNAse, RNAse, etc) • DNA ⇒ fator de transformação material genético das células Prof. Manoel Victor Transformação bacteriana Prof. Manoel Victor Posicionamento de genes | genes E e F E e z F curva A ou B E F z Prof. Manoel Victor curva C Conjugação bacteriana • mutantes auxotróficos analisados em meio mínimo • recombinantes prototróficos Prof. Manoel Victor Davis – tubo em U | necessidade de contato físico entre as bactérias | presença do filtro impede o surgimento de recombinantes Prof. Manoel Victor Bactérias em conjugação Prof. Manoel Victor Transferência de material genético células F Prof. Manoel Victor + ⇒ células F - Plasmideos bacterianos | plasmideos z autônomos X integrativos (epissomos) z conjugativos X não conjugativos operon tra Prof. Manoel Victor Situação especial | Hayes (1953) – HFR (AFR) z Prof. Manoel Victor epissomo conjugativo Consequências genéticas | mobilização de genes cromossomais para hospedeiras especiais z | sexodução z Prof. Manoel Victor mapeamento de genes da doadora transferência específica de determinados genes Prof. Manoel Victor Prof. Manoel Victor Exemplo de mapeamento | transferência dos genes z z z z Prof. Manoel Victor azi ton lac gal ton | localização dos genes z z z z Prof. Manoel Victor azi ton lac gal Generalizando Mapa genético do cromossomo da E. coli Prof. Manoel Victor Transdução | Prof. Manoel Victor eventos de recombinação envolvendo a transferência de material genético entre bactérias via bacteriófagos Ciclo vital de um bacteriófago Prof. Manoel Victor Colônias de fagos (Placas de Lise) Prof. Manoel Victor Tipos de transdução | generalizada z | restrita z | fagos específicos Ex; fago λ em E. coli abortiva z Prof. Manoel Victor fagos comuns Ex: M13, φ X174, etc situação anormal em que o cromossomo do fago é impedido de agir normalmente Transdução generalizada Prof. Manoel Victor Transdução restrita Prof. Manoel Victor Mapeamento por transdução | os eventos de recombinação genética via transferência por fagos restringem-se às vizinhaças dos sítios de inserção do profago Prof. Manoel Victor Mapeamento de regiões muito específicas próximas ao ponto de inserção dos profagos nos cromossomos das bactérias receptoras Prof. Manoel Victor
