ESTUDO DE UM INIBIDOR DE TRIPSINA DE SEMENTES

BIOQUÍMICA
ESTUDO DE UM INIBIDOR DE TRIPSINA DE SEMENTES DE Poecilanthe
parviflora SOBRE ENZIMAS DIGESTIVAS DE DIFERENTES LEPIDOPTEROS
Viviane Alves Garcia1*, Maria das Graças Machado Freire2 (Co-orientadora), Maria Lígia Rodrigues
Macedo3 (Orientadora) [email protected]
1,3
Laboratório de Purificação de proteína e suas funções biológicas - Departamento de Ciências
Naturais- CEUL - Universidade Federal do Mato Grosso do Sul
Departamentos de Bioquímica, UNICAMP
2
(INTRODUÇÃO) Os inibidores são capazes de produzir complexos estequiometricos com enzimas
e, assim inibir competitivamente as atividades catalíticas destas. Os inibidores constituem uma das
muitas famílias de macromoléculas que realizam com êxito as mais variadas funções biológicas,
como: ação na coagulação sanguínea, ação anticarcinogênica, proteína de defesa de plantas
contra ataque de pragas e outros. O presente trabalho tem por objetivo a ação do inibidor de
tripsina de sementes de Poecilanthe parvilhora (PPTI) sobre as enzimas digestivas de 6 espécies
de insetos predadores da ordem Lepidoptera ( Anagasta kueniella, Diatraes saccaralis, Anticarsia
gemmatalis, Sitotroga cercalella, Corcyra cephalonica, Spodoptera frugiperda), visto que, é nessa
ordem de insetos que se encontra o maior número de espécies que se constituem pragas de
nossas culturas, causando grandes prejuízos financeiros.
(METODOLOGIA) Os ensaios de inibição in vitro foram realizados utilizando enzimas presentes no
intestino médio de larvas de 4º instar das 6 espécies de insetos da ordem lepidoptera os intestinos
médios incubados com concentrações crescentes do inibidor PPTI (1mg/10ml) dissolvido em
tampão Tris/HCl 0,05M pH 8,0. Após 20 minutos de incubação a 37ºC, a atividade inibitória foi
avaliada através da hidrólise de BAPNA (N-benzol-DL-arginina-p-nitroanilida). O ensaio foi
paralizado com ácido-acético 30%, acompanhada fotometricamente a 410nm, a atividade residual
de enzima foi calculada..
(RESULTADOS) O inibidor de P. parviflora quando incubados com enzimas de diferentes insetos
mostrou capaz de inibir cerca de 42% da atividade de enzimas serínicas presentes no trato
digestivo de A. kueniella, 93% de D. saccaralis, 63% Spodoptera frugiperda, 9% de A. gemmatalis,
PPTI não foi capaz de inibir as enzimas digestivas de S. cercalella e C. cephalonica.
(CONCLUSÃO) Ao final desse trabalho podemos concluir que PPTI apresenta uma alta
capacidade de inibir enzima presente no trato intestinal de vários lepidópteros, sugerindo assim
que o mesmo possa ser empregado no melhoramento de plantas ao ataque das mesmas.
Agência Financiadora: CNPq, FUNDECT, PROP/UFMS
TRABALHO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA
54a Reunião Anual da SBPC - Goiânia, GO - Julho/2002