51º Congresso Brasileiro de Genética Resumos do 51º Congresso Brasileiro de Genética • 7 a 10 de setembro de 2005 Hotel Monte Real • Águas de Lindóia • São Paulo • Brasil www.sbg.org.br - ISBN 85-89109-05-4 [email protected] Palavras chave: milho, lisina, zeina, mutantes Berdejo, BA; Gaziola, SA; Azevedo, RA Departamento de Genética, ESALQ, Universidade de São Paulo. Padrão de distribuição de proteínas da fração protéica zeína, e concentração do aminoácido essencial lisina em mutantes de endosperma de milho e seus respectivos selvagens O mutante de endosperma de milho, opaco-2 (o2) descoberto em 1963, é caracterizado por não apresentar uma banda de 22 kDa na fração protéica zeína e assim acumular uma grande quantidade do aminoácido essencial lisina, tornando-se um material de melhor qualidade protéica. A fração zeína representa cerca de 60% das proteínas do endosperma. Nossa pesquisa utilizou o mutante o2 com o objetivo de comparar o perfil protéico da fração zeína e a concentração de lisina nos mutantes opaco (o1, o5, o7, o10, o11 e o13) e floury (fl1, fl2 e fl3) e em seus selvagens (Oh43, W22, W23, B37, B79). Sementes secas dos materiais foram maceradas e a farinha produzida submetida a uma extração seqüencial de proteínas de reserva (Landry e Damerval, 2001), para separação das proteínas de reserva em albuminas, globulinas, zeínas I e II e glutelinas. A fração zeina foi fracionada em gel de poliacrilamida desnaturante (SDS-PAGE) e o perfil protéico caracterizado. Amostras de cada genótipo da fração zeína foram analisadas para aminoácidos solúveis totais e por cromatografia líquida de alta pressão (HPLC) para o aminoácido lisina. Dentre os resultados obtidos, os resultados obtidos mostraram que o mutante opaco-1 apresentou uma maior concentração da fração zeina, porém diferentemente do mutante o2, apresentou a banda de 22 kDa na fração zeína I e ausência de duas bandas, de 24 e de 66 kDa na fração zeína II. O mutante o2, como citado na literatura, não apresentou a proteína de 22 kDa na fração zeína I ou II e maior concentração do aminoácido lisina. O mutante fl2 apresentou níveis menores de lisina entre os mutantes do grupo, porém todos apresentaram níveis superiores ao genótipo selvagem. Entre os genótipos selvagens não houve muita variação nas concentrações das frações protéicas. Entretanto, ocorreram diferenças no acúmulo de lisina, sendo o genótipo selvagem B79 o de maior concentração. As análises evidenciaram que há outros genótipos que possuem uma alta concentração do aminoácido essencial lisina e uma baixa concentração da fração protéica zeína, sugerindo que as mutações podem influenciar o metabolismo de lisina e a síntese e acumulo das proteínas de reserva no milho. Apoio financeiro: FAPESP. 380 200-450. 619