Biotecnologia Vegetal: Tecnologia do DNA - NBCGIB

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UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ – UESC
DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS E AMBIENTAIS - DCAA
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM PRODUÇÃO VEGETAL
PROGRAMA DE DISCIPLINA
CÓDIGO
DISCIPLINA
CAA662
Biotecnologia Vegetal: Tecnologia do DNA Recombinante
CRÉDITOS
Teóricos
Práticos
Total
4
4T
CARGA
HORÁRIA
60
60h
PROFESSOR (A)
Marcio Gilberto Cardoso Costa
Assinatura:
EMENTA
Organização e expressão de genes em plantas; manipulação de ácidos nucléicos in vitro;
estratégias de isolamento de genes de plantas; métodos de transformação genética de plantas;
manipulação genética de plantas visando resistência a estresses bióticos e abióticos; aspectos
éticos, legais e ecológicos da liberação e comercialização de plantas transgênicas.
OBJETIVOS
• Fornecer a fundamentação teórica necessária para a compreensão das principais técnicas
empregadas na manipulação genética de plantas, suas potencialidades e aplicações;
• Fornecer experiência na manipulação das técnicas mais comuns utilizadas no laboratório;
• Reforçar os conceitos de pensamento científico, planejamento e análise de experimentos,
leitura científica e apresentação de artigos científicos.
METODOLOGIA
Serão utilizadas aulas expositivas, atividades de dinâmica de grupo e estudos dirigidos, aulas
práticas e seminários para discussão de artigos científicos.
AVALIAÇÃO
Estudos dirigidos (25%), seminários (25%), relatórios (25%) de aulas práticas e prova (25%).
CONTEÚDO PROGRAMÁTICO
1. Organização e Expressão de Genes em Plantas
1.1 DNA, cromatina e estrutura do cromossomo
1.2 Estrutura do gene e regulação da expressão gênica
1.3 Endereçamento de proteínas
1.4 Promotores heterólogos
1.5 Tamanho e organização dos genomas
2. Técnicas Básicas em Biologia Molecular
3.
4.
5.
6.
7.
8.
2.1.
Extração de ácidos nucléicos
2.2.
Eletroforese em gel de agarose
2.3.
Southern, Northern e Western Blots (sondas moleculares)
2.4.
Transformação de células hospedeiras
2.5.
PCR
Manipulação de Ácidos Nucléicos In Vitro
3.1.
Enzimas de restrição
3.2.
Métodos de ligação de DNA
3.3.
Vetores de clonagem
Estratégias de Isolamento de Genes de Plantas
4.1.
Bibliotecas de DNA genômico e de cDNA
4.2.
Estratégias de “screening” de bibliotecas
4.3.
Clonagem baseada no padrão de expressão gênica diferencial
4.4.
Clonagem baseada em mapeamento
Análise e Modificação de Genes Clonados
5.1.
Sequenciamento
5.2.
Mutagênese
Métodos de Transformação Genética de Plantas
6.1.
Transformação genética mediada por Agrobacterium
6.2.
Biobalística
6.3.
Eletroporação de protoplastos
6.4.
Vetores para transformação de plantas
Manipulação Genética visando:
7.1.
Resistência a herbicidas
7.2.
Resistência a pragas e doenças
7.3.
Resistência a estresses abióticos
7.4.
Melhoria da produtividade e qualidade
7.5.
Estudos funcionais de genes
Princípios de Biossegurança
8.1.
Normas de biossegurança e obtenção do CQB (certificado de qualidade em
biossegurança)
8.2.
Avaliação dos riscos de introdução de organismos geneticamente modificados (OGMs)
no ambiente
8.3.
Definição de riscos
8.4.
Fluxo gênico
8.5.
Regulamentação
REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICA
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Embrapa-SPI / Embrapa-Cenargen, 1998. 309 p.
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Citovsky, V.; Kozlovsky, S.V.; Lacroix, B.; Zaltsman, A.; Dafny-Yelin, M.; Vyas, S.; Tovkach, A.;
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tool. Microbiology and Molecular Biology Reviews, v. 67, p. 16-37, 2003a.
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v. 21, p. 95-98, 2003b.
Slater A.; Scott, N.; Fowler, M. Plant biotechnology: the genetic manipulation of plants. Oxford:
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Torres, A.C.; Caldas, L.S.; Buso, J.A. Cultura de tecidos e transformação genética de plantas. Vol 2.
Brasília: Embrapa-SPI / Embrapa-CNPH, 1998.
Torres, A.C.; Dusi, A.N.; Santos, M.D.M. dos. Transformação genética de plantas via
Agrobacterium: teoria e prática. Embrapa Hortaliças, 2007.
Zaha, A. Biologia Molecular Básica. Ed. Mercado Aberto, Porto Alegre. 1996. 336 p.
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