1 FACULDADE ASSIS GURGACZ PREVALÊNCIA E PERFIL DE SENSIBILIDADE ANTIMICROBIANA DE BACTÉRIAS ISOLADAS EM HEMOCULTURA DE HOSPITAIS PRIVADOS CASCAVEL 2015 2 TELINE SCHEFFER DALLACORTE PREVALÊNCIA E PERFIL DE SENSIBILIDADE ANTIMICROBIANA DE BACTÉRIAS ISOLADAS EM HEMOCULTURA DE HOSPITAIS PRIVADOS Trabalho de conclusão de curso apresentado como requisito de avaliação da disciplina de TCC II do curso de Farmácia da Faculdade Assis Gurgacz. Prof. Orientador: Claudinei Mesquita da Silva Profa. Co-Orientadora: Leyde D. Peder CASCAVEL 2015 3 TELINE SCHEFFER DALLACORTE PREVALÊNCIA E PERFIL DE SENSIBILIDADE ANTIMICROBIANA DE BACTÉRIAS ISOLADAS EM HEMOCULTURA DE HOSPITAIS PRIVADOS Trabalho apresentado no Curso de Farmácia da FAG, como requisito parcial para obtenção do título de Bacharel em Farmácia, sob a orientação do Professor Claudinei Mesquita da Silva e co-orientação da Professora Leyde Daiane de Peder. BANCA EXAMINADORA _______________________________ Claudinei Mesquita da Silva Mestre _______________________________ Emerson Machado Especialista _______________________________ Jacqueline Godinho Doutoranda Cascavel, 20 de Junho de 2015. 4 Sumário 1 - REVISÃO DE LITERATURA ................................................................................. 5 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ......................................................................... 22 2 - ARTIGO ............................................................................................................... 24 NORMAS DA REVISTA CIENTÍFICA 5 1 – REVISÃO DE LITERATURA Conceituação e caracterização de bacteremia O sangue é um tecido vivo líquido que em condições normais é estéril, mas frequentemente é invadido por diferentes espécies bacterianas, ocasionando um quadro clínico conhecido como bacteremia (BRAZ, 2013). Pode-se definir bacteremia conforme a afirmação de Araujo (2012): Bacteremia é o termo que designa a indicação da presença de microrganismos viáveis na corrente sanguínea. É um fenômeno de grande relevância diagnóstica, pois frequentemente está associado a um aumento considerável nas taxas de morbidade e mortalidade, além de representar uma das mais significativas complicações no processo infeccioso, o que torna a hemocultura um exame de importante valor preditivo de infecção (ARAUJO, p. 08, 2012) A bacteremia também é conhecida como infecção da corrente sanguínea, expressa a presença de bactérias em circulação no sangue, comprovada laboratorialmente pela hemocultura. As bacteremias são classificadas em primárias e secundárias. As primárias são aquelas em que a fonte de infecção não é conhecida e geralmente são associadas a dispositivos intravasculares, principalmente cateteres venosos centrais. As bacteremias secundárias ocorrem devido a infecção de outros sistemas que migram para a corrente sanguínea, sendo os focos primários o pulmão, o trato urinário e a cirurgia abdominal (CUNHA; LINARDI, 2013). As fontes mais comuns de bacteremia, sejam de origem comunitária ou hospitalar, são “dispositivos intravasculares (19%), trato geniturinário (17%), trato respiratório (12%), intestino e peritônio (5%), pele (5%), trato biliar (4%), abcesso intra-abdominal (3%), outros sítios (8%) e sítios desconhecidos (27%)” (ARAUJO, 2012). De acordo com Diament et al (2011), a pneumonia e as infecções intraabdominais são as causas mais frequentemente associadas à bacteremia secundária. Mencionam ainda que quando há um foco definido de origem da bacteremia e esse foco for passível de análise microbiológica (como urina, líquidos cavitários, líquor, escarro, etc), a colheita desses materiais deve ser concomitante à hemocultura. 6 As bacteremias primárias correspondem a aproximadamente 25% das ocorrências de bacteremia em geral, sendo frequentemente relacionadas a métodos invasivos, como catéteres intravasculares, arteriais ou venosos, centrais ou periféricos e nutrição parenteral (ANDRADE et al, 2006). Há ainda como fontes de bacteremias secundárias infecções originárias de feridas, do sistema nervoso central e do sistema osteoarticular (FREIRE et al, 2013). As bacteremias também podem ser classificadas como transitória, intermitente, contínua ou de escape (ARAUJO, 2012). A do tipo transitória, que em geral é rápida (com duração que pode variar de alguns minutos a poucas horas) é a mais comum, e ocorre após a manipulação de algum tecido infectado como em casos de abscessos, furúnculos e celulites; durante algum procedimento cirúrgico envolvendo tecidos contaminados ou colonizados como em procedimentos dentários; manipulações geniturinárias como cistoscopia, cateterização ou dilatação uretral; abortamento ou endoscopias digestivas; e cirurgias que envolvem áreas contaminadas, como ressecção transuretral de próstata, histerectomia vaginal e debridamento de queimaduras. Este tipo de bacteremia também ocorre em algumas infecções agudas, localizadas ou sistêmicas, como pneumonias, meningites, artrites sépticas e osteomielites. Já quando a bacteremia se manifesta em intervalos variáveis de tempo (com o mesmo microrganismo) é denominada de intermitente. Geralmente este tipo ocorre em processos infecciosos relacionados a abscessos intraabdominais, pélvicos, perinefréticos, hepáticos, prostáticos e outros, configurando assim causas frequentes de febre de origem indeterminada. A bacteremia contínua é característica da endocardite infecciosa aguda e subaguda e de outras infecções endovasculares. Este padrão também é encontrado nas primeiras semanas da febre tifoide e na brucelose. A bacteremia de escape (“breakthrough”) ocorre mesmo enquanto o paciente esteja recebendo antibioticoterapia sistêmica apropriada (germe sensível). Quando se dá no início da terapêutica, geralmente deve-se a concentrações insuficientes do antimicrobiano atingidas na corrente sanguínea (...). Já os episódios de escape que ocorrem tardiamente geralmente se dão por drenagem inadequada do foco infeccioso ou por debilidade das defesas do hospedeiro. ARAUJO, p. 09, 2012. Estudos estatísticos realizados nos Estados Unidos da América estimaram que anualmente ocorram 250.000 episódios de bacteremias nosocomiais, o que representa a décima causa mais frequente de óbito naquele país. Esta afecção aumenta a morbidade e a mortalidade, tempo de internação, custos e sofrimento para o pacientes, especialmente os de idade pediátrica (FREIRE et al, 2013). Além disso, existe uma relação direta de bacteremias e sepses e microrganismos multirresistentes a antimicrobianos, exigindo que as unidades hospitalares de maior potencial para esses eventos (como UTIs, CTIs) tenham conhecimento da microbiota, permitindo a localização do foco e a determinação do 7 microrganismo causador da infecção, permitindo que o tratamento antimicrobiano seja mais racional e dirigido (PEREIRA et al, 2012). Na maioria das vezes, a bacteremia é causada por apenas um microorganismo. Mas em alguns casos podem ter etiologia polimicrobiana (ARAUJO, 2012). O ambiente hospitalar possui fatores que tornam os pacientes mais susceptíveis aos microrganismos, principalmente pacientes imunossuprimidos. São exemplos de fatores, o número de procedimentos e o tempo de internação hospitalar, internação em unidade de terapia intensiva (UTI), cirurgia, diabetes melito, cirrose hepática e queimaduras (VIANA et al, 2011; CUNHA; LINARDI, 2013). O paciente queimado é altamente suscetível a bacteremia e consequente infecção hospitalar, sendo a principal causa de morte desses pacientes. A perda da cobertura cutânea, a baixa taxa de linfócitos T e o aumento da atividade supressora celular causam um quadro de imunossupressão. Adiciona-se que o tempo de internação desses pacientes é mais prolongado pela própria causa de agravo, a necessidade de monitorização com cateteres vascular e urinário, intubação orotraqueal e sondas nasogástrica são importantes fatores de risco de bacteremia e septicemia (MILLAN et al, 2012). Andrade et al (2006) citam que dependências químicas, como o alcoolismo e o tabagismo, predispõe a risco aumentado de bacteremia e infecção. Em indivíduos com sistema imunológico sadio, essas bactérias são normalmente destruídas pelas próprias células imunológicas. Contudo, no indivíduo com o sistema imunológico comprometido, tais bactérias não são destruídas e sua multiplicação determina o aparecimento de manifestações clínicas (BRAZ, 2013). Nesse sentido, enfatiza-se a afirmação de Andrade et al (2006): É significativo o número de publicações associadas aos elementos que compõem a cadeia epidemiológica de infecção com ênfase nos fatores de risco. Os estudos são unânimes ao reconhecer a existência dos riscos inerentes aos pacientes e os exógenos. Assim, pacientes com doenças clínicas diversas, imuno-comprometidos, extremos de idade, caracterizam o perfil de uma situação que merece prioridade nos serviços de saúde. (ANDRADE et al, p. 31, 2006) De acordo com Ferreira (2007), as bacteremias transitórias não deixam sequelas em pessoas com bons hábitos. Entretanto, nos indivíduos com lesões cardíacas suscetíveis, a bactéria pode se alojar na valva cardíaca, endocárdio e no 8 endotélio próximo a defeitos anatômicos e congênitos, resultando em endocardite infecciosa ou ainda em endarterite. A bacteremia também é considerada um risco de infecção em próteses ortopédicas e enxertos vasculares. A detecção de bacteremia ou fungemia pode remeter a uma falha nas defesas do hospedeiro em localizar e neutralizar determinada infecção em seu foco inicial, ou eventual insucesso na remoção ou drenagem de determinado foco infeccioso. No paciente imunocompetente, geralmente as defesas naturais respondem prontamente à presença de microrganismos estranhos. Essa eliminação pode ser menos eficiente quando se trata de microrganismos encapsulados ou é mais eficaz quando o paciente já apresenta anticorpos contra o organismo infectante. Há situações determinadas em que essa eliminação é menos efetiva, como nos casos de infecções a partir de focos intravasculares, na presença de dispositivos invasivos (pela formação de biofilme) ou em endocardites. As condições que predispõem um paciente ao quadro de bacteremia ou fungemia incluem a idade, doenças de base, medicamentos (corticoides, quimioterápicos, drogas citotóxicas) e alguns procedimentos médicos invasivos (cateteres e procedimentos endoscópicos). O risco é maior nas faixas etárias extremas e nos pacientes portadores de doenças hematológicas, neoplasias, diabetes mellitus, insuficiência renal em diálise, cirrose hepática, imunodepressão e grandes queimaduras. Alguns procedimentos cirúrgicos são também predisponentes, particularmente os do trato geniturinário e gastrointestinal. ARAUJO, p. 09, 2012. O início precoce da antibioticoterapia melhora o prognóstico do paciente afetado por uma infecção bacteriana, porém, a confirmação microbiológica da mesma não costuma ser imediata e frequentemente inicia-se a antibioticoterapia empírica até a obtenção dos dados laboratoriais. Ao mesmo tempo, existe um debate sobre a necessidade de controle da antibioticoterapia empírica indiscriminada, para evitar-se problemas ecológicos de sensibilidade, assim como gastos injustificados (TUDELA et al, 2012). Nesse sentido, o procedimento da hemocultura constitui-se metodologia essencial para confirmação de bacteremia com subsequente realização de antibiogramas para definição do antimicrobiano mais eficaz contra o microrganismo infectante, evitando-se o agravamento para a sepse e desenvolvimento de infecção em sítios anatômicos específicos (GIR et al, 1998; ANDRADE et al, 2006). “O termo sepse refere-se à condição pela qual a resposta do organismo ao agente infeccioso se manifesta, por meio de sinais e sintomas da doença, como a síndrome da resposta inflamatória sistêmica, independente da presença ou não de hemocultura positiva” (ARAUJO, 2012). 9 Silva et al (2006) citam que na bacteremia, os agentes infecciosos além de promoverem a invasão da corrente sanguínea, passam a multiplicar-se, gerando a sepse ou septicemia, que segundo os autores, é um quadro clínico de bacteremia mais severa com sintomas que envolvem desde a febre e calafrios, até taquicardia e o choque séptico. A infecção resulta do desequilíbrio entre os mecanismos imunitários e o patógeno. Geralmente, o microrganismo infectante ou seus produtos, por exemplo, endotoxina da parede bacteriana de bactérias Gram-negativas, peptideoglicanos de microrganismos Gram-positivos, exotoxinas e hemolisinas, ao invadirem o paciente, geram reações locais que iniciam o processo infeccioso (ANDRADE et al, 2006). A pneumonia é a infecção mais comum na UTI, podendo ter origem comunitária ou nosocomial. No caso da pneumonia nosocomial, ela ocorre entre 5 a 10 casos em 1000 internamentos hospitalares e sua ocorrência pode ser aumentada de 5 a 20 vezes em pacientes com ventilação mecânica. A infecção urinária é a segunda mais comum topografia infecciosa, com consequências menos graves, geralmente sendo associada à catéter (ANDRADE et al, 2006). Hemocultura: importância e breve descrição da técnica A hemocultura é um dos mais relevantes recursos diagnósticos para o esclarecimento de febres indeterminas, cuja origem geralmente é infecciosa. Muitas vezes, as culturas de sangue constituem a única fonte disponível para se identificar o micro-organismo em casos de infecções sistêmicas graves. Em outras situações, as hemoculturas podem indicar a gravidade e a extensão da disseminação da infecção (GIR et al, 1998). A coleta de hemocultura deve ser realizada preferencialmente antes do início da antibioticoterapia nos pacientes que apresentem quadro clínico sugestivo de infecção e suficiente para serem submetidos à internação, que apresentem febre (> 38° C) ou hipotermia (< 36°C), leucocitose (> 10.000 mm3, principalmente com desvio à esquerda) ou granulocitopenia absoluta (<1000 leucócitos/mm3) (ARAUJO, 2012). Se o paciente já estiver com conduta antimicrobiana, as hemoculturas devem ser obtidas imediatamente antes da administração da próxima dose. O ideal é que a coleta se realize imediatamente após o aumento da temperatura do paciente. O uso 10 de antitérmicos não influencia nos resultados das hemoculturas (DIAMENT et al, 2011). A coleta da hemocultura é um ponto crítico, devendo rigorosamente seguir as técnicas de antissepsia, evitando a contaminação do material, podendo ocasionar um resultado que não é fidedigno a situação clínica do paciente (BRAZ, 2013; AGÊNCIA NACIONAL DE VIGILÂNCIA SANITÁRIA – ANVISA, 2004). Em um trabalho realizado com profissionais de enfermagem enfatizou-se ainda mais o cuidado que deve se ter durante a coleta da hemocultura. A atualização e reciclagem dos profissionais que realizam a punção é um ponto crítico bastante importante que deve ser observado na rotina hospitalar (GIR et al, 1998). A utilização de equipamentos de proteção individual (EPI), como luvas (que protegem o profissional dos fluidos corporais do paciente, agindo como barreira mecânica aos patógenos) e máscaras (que limitam a transmissão de microrganismos, reduzindo a contaminação da amostra por fonte exógena), demonstrou-se aspecto importante para a garantia da qualidade do processo de coleta da hemocultura (GIR et al, 1998). É muito preocupante notar na pesquisa de GIR et al, (1998), a incoerência das atitudes e das falhas dos profissionais que colaboraram com o estudo no que se refere a técnica de lavagem de mãos. Os 12 entrevistados foram observados em coletas de hemoculturas e responderam um questionário após essas coletas. Durante a entrevista, 100% (n = 12) responderam que realizaram a lavagem das mãos antes e após a coleta. Contudo, o que as pesquisadoras observaram foi que 91,67% (n = 11) não lavaram as mãos antes do procedimento e 66,67% (n = 8) lavaram as mãos após a técnica. Concorda-se com os autores em sua afirmação que a lavagem de mãos é uma das mais importantes maneiras de remover os mecanismos mecanicamente presentes, contribuindo para minimizar o risco de infecções hospitalares. O preparo da pele do paciente com soluções antissépticas é tão importante quanto a lavagem de mãos pelo profissional, pois a desinfecção do local da coleta é importante para reduzir a incidência de contaminação da cultura de sangue, seja pela flora microbiana residente ou transitória (GIR et al, 1998). A flora microbiana da pele é formada pela flora residente e pela transitória. A residente é composta pelos microrganismos que vivem e se multiplicam na pele, viáveis por longo período. As bactérias desta flora mais comumente 11 encontradas são as gram-positivas e dificilmente removidas com escovação; entretanto, podem ser inativadas por antissépticos. Esta flora é de baixa virulência e raramente causa infecção, contudo pode ocasionar infecções sistêmicas em pacientes imunodeprimidos e após procedimentos invasivos. Quanto à flora transitória, os microrganismos que a compõem são viáveis por um curto período. Suas bactérias são mais fáceis de serem removidas, uma vez que se encontram na superfície da pele junto à gordura e sujidades. Compõe-se de microrganismos responsáveis, mais frequentemente, pelas infecções hospitalares, ou seja, as bactérias gram-negativas e os estafilococos, o que reforça o papel de serem as mãos um veículo de transmissão. GIR et al, p. 97, 1998. A técnica de antissepsia também deve ser aplicada às tampas dos frascos de hemocultura, utilizando-se álcool 70% para a assepsia (ANVISA, 2004). A autoridade sanitária brasileira recomenda que para realizar a antissepsia do local de coleta, deve-se garrotear para seleção de veia adequada, seguida pela antissepsia da área com álcool 70% de forma circular e de dentro para fora, seguida da aplicação de solução de iodo (tintura de iodo 1% a 2% ou PVPI 10%), igualmente com movimentos circulares de dentro para fora (ANVISA, 2004). Em sua revisão sobre a técnica de hemocultura, Araújo (2004) indica que a solução antisséptica mais adequada seria o clorexidine alcoólico 0,5% com fricção em círculos semiabertos a partir do ponto de punção, com pausa de 30 segundos com repetição da técnica com a mesma solução. Pontua, contudo, que na ausência ou não-padronização do clorexidine alcoólico, este pode ser substituído por álcooliodado ou álcool 70%. Importante também não tocar a área após a assepsia para não recontaminar e necessitar refazer o processo, aumentando os custos (GIR et al, 1998). A técnica de coleta de sangue por catéteres ou cânulas não é recomendada quando existe a possibilidade da punção venosa, minimizando riscos de contaminação da amostra por esses dispositivos. A punção arterial não demonstrou ter significância superior à punção venosa na recuperação de microrganismos circulantes, sendo sua realização não estimulada pelo risco maior de contaminação do tecido sanguíneo, podendo agravar o quadro de bacteremia. A troca de agulhas entre coleta e distribuição no frasco não é recomendável (ANVISA, 2004). O método de coleta e o volume de sangue coletado influem diretamente na qualidade da recuperação de micro-organismos e uma interpretação adequada dos resultados (ANVISA, 2004). 12 A hemocultura é composta por dois frascos, um que contém cultura apropriada para o crescimento de microrganismos aeróbicos e outro com meio de cultura propício para o crescimento de microrganismos anaeróbicos. A figura 1 tem alguns exemplos de frascos aeróbicos e anaeróbicos da marca Becton & Dickinson (BD) para hemocultura. Figura 1: Exemplos de frascos de hemocultura aeróbicos e anaeróbicos (fonte: http://www.bd.com/resource.aspx?IDX=3562). O volume de sangue a ser coletado depende da faixa etária do paciente (adulto ou criança) e o volume recomendado pelo fabricante para os tipos de frascos utilizados, devendo manter uma proporção entre sangue/caldo de cultura 1:5 a 1:10. Para adultos, coleta-se de 5 a 10 ml de sangue por frasco em cada punção, totalizando 20 ml, distribuídos pelo número de frascos indicados (Tabela 1). O anticoagulante indicado é o Polianetolsufonato sódico (SPS) (ARAUJO, 2012; ANVISA, 2004). Tabela 1: Tipos de frascos e volume de sangue sugeridos por amostra de hemocultura* 13 Crianças até 13 kg Crianças de 13 a 36 kg Frasco AERÓBIO Crianças > 36 kg e adultos 1 a 4 ml 5 ml 5 a 10 ml Frasco ANAERÓBIO - 5 ml 5 a 10 ml Volume total/amostra 1 a 4 ml 10 ml 10 a 20 ml *Adaptado de ARAUJO, 2012 Para crianças, o volume ótimo de sangue não está bem definido, com artigos recomendando amostras com volume igual ou maior a 1 ml, para melhor detecção de bacteremias. Contudo, considerando-se que em alguns casos onde há dificuldade de coleta (principalmente lactentes), pode se coletar um volume não inferior a 0,5 ml (ARAUJO, 2012; ANVISA, 2004). Em trabalho realizado por Pereira et al (1999), afirma que o volume médio das amostras analisadas em pacientes pediátricos foi de 3,01 ml, sendo o menor volume de 0,5 ml e máximo de 5 ml. Duas culturas são recomendadas para diagnóstica de bacteremias em recém-natos (ANVISA, 2004). Sobre o momento e o intervalo entre as coletas, o que determina é o estado clínico do paciente. Em infecções agudas, recomenda-se a coleta de duas a três amostras (dois frascos por amostra) sequenciais ou dentro de 1 hora. Intervalos maiores de 1 a 2 horas são recomendáveis para coletas cujo objetivo seja monitorar bacteremia contínua em pacientes com suspeita de endocardite ou infecção endovascular associada a dispositivo invasivo como catéteres (ARAUJO, 2012). Para adultos e adolescentes, o número de frascos utilizados na hemocultura dependerá do estado clínico do paciente. A quantidade de culturas/punções costuma variar entre duas a quatro, existindo autores que afirmam que três culturas em 24 horas sejam suficientes para descartar bacteremia ou endocardite. Mais de quatro amostras no período não demonstraram maior índice de recuperação microbiana (ANVISA, 2004). A tabela 2 contém recomendações relativas à coleta para hemocultura em diferentes condições patológicas. Tabela 2: Recomendações para coleta de hemocultura conforme quadro clínico* 14 Endocardite bacteriana aguda Coletar três amostras de punções venosas diferentes (braço direito e esquerdo), com intervalo de 15 a 30 minutos, 1 a 2 horas antes da antibioticoterapia. Endocardite bacteriana subaguda Coletar três amostras, nas primeiras 24 horas, com intervalo mínimo de 15 minutos, com punções venosas diferentes. Colher, de preferência, as duas primeiras antes do início da febre. Se após 24 horas de cultivo, não apresentarem crescimento bacteriano, colher mais três amostras. Infecções sistêmicas e localizadas (sepse Coletar duas amostras de punções venosas aguda, meningite, osteomielite, artrite ou diferentes, antes da antibioticoterapia, com pneumonia bacteriana aguda) intervalos de cinco minutos entre as punções. Se possível, de 10 a 20 ml por amostra. Bacteremia de origem indeterminada Coletar quatro a seis amostras de punções venosas diferentes em 48 horas. Se após 24 horas de cultivo, não apresentarem crescimento bacteriano, colher mais duas amostras. Pacientes com picos febris regulares Coletar não mais que três amostras 1 hora antes do início da febre, evitando-se o pico febril. *Adaptado de ANVISA, 2004. Um par de hemoculturas tradicionalmente equivale a uma amostra/punção e é formado por um frasco aeróbio e um frasco anaeróbio (ARAUJO, 2012). As metodologias para hemocultura podem ser (ARAUJO, 2012; FERREIRA, 2007): Manual, com meios de cultura comerciais, como caldo infusão cérebrocoração (BHI), ou caldo caseína digerida de soja (TSB) para aeróbios, facultativos e leveduras; e caldo Columbia para micro-organismos anaeróbios, que ainda favorece o crescimento da maioria dos micro-organismos fastidiosos; 15 Método de Lise-centrifugação: constitui-se de tubo a vácuo (tem específico para adulto e para paciente pediátrico) que contém uma substância que lisa leucócitos e hemácias, liberando microrganismos intracelulares. Os tubos são submetidos a centrifugação, desprezando-se o sobrenadante e semeando-se o sedimento que possui o provável micro-organismo em qualquer meio. Permite a contagem de colônias por ml de sangue; Métodos semi-automatizados: composto por laminocultivos de duas faces (Hemobac Trifásico – Probac®), acoplado à parte superior de um recipiente plástico suplementado com extrato de levedura e SPS, que pode ser acrescido de substâncias neutralizadoras de antibióticos. As faces do laminocultivo contêm ágar-chocolate, ágar Sabouraud e ágar MacConkey. A positividade é visualizada por meio de um indicador de CO2. É interessante por permitir o processamento de bacterioscopia, identificação e antibiograma diretamente a partir de colônias desenvolvidas no laminocultivo, não havendo necessidade de subcultivo, promovendo maior agilidade na obtenção do resultado. Métodos automatizados: a grande vantagem dessa metodologia é a rapidez dos resultados, diminuição do trabalho técnico e a monitorização contínua do crescimento bacteriano e a detecção é baseada em técnicas de fluorescência ou colorimetria. Os principais sistemas automatizados incluem BacT/ALERT® SA BIOMÉRIEUX (Organon Teknika), geração 9000 BACTEC® (Becton & Dickinson), DIFCO ESP® (Difco Laboratories) e MicroScan Blood Culture System 5® (Baxter MicroScan). Perfil etiológico de bacteremias e sepse Quanto a interpretação dos resultados pode se resumir conforme afirmado por Diament et al (2011): Em relação à interpretação dos resultados, quando bactérias da flora cutânea (Staphylococcus epidermidis, Corynebacterium sp, Propionobacterium acnes, Bacillus sp, exceto B. anthracis) crescem em apenas uma amostra, é maior a probabilidade que sejam contaminantes. O risco de contaminação, em geral, é estimado em 3% para uma amostra. Se há crescimento dessas bactérias em duas amostras ou mais, a probabilidade de contaminação cai para menos de um em 1000 (0,03 x 0,03 16 = 0,0009). Assim, deve-se ter precaução ao interpretar esse tipo de resultado de hemoculturas como falso-positivo. Todavia, quando há crescimento de microrganismos do tipo S. aureus, S. pyogenes, S. agalactiae, S.pneumoniae, E. coli e outras enterobactérias, P. aeruginosa, B. fragilis e Candida sp, quase sempre se trata de infecção da corrente sanguínea. DIAMENT et al, p. 136, 2011. Além da pele, outros órgãos podem acarretar num risco de bacteremia. Um exemplo, é o que ocorre na patogenia da colecistite aguda calculosa, que desencadeia uma reação inflamatória pela combinação de três fatores: mecânico (que produz elevação da pressão intralumial e distensão da vesícula biliar), químico (pela liberação de mediadores inflamatórios, como lisolecitina, fosfolipase A e prostaglandinas, que causam lesão direta da mucosa) e infecciosa (onde agentes bacterianos crescem na bile, num quadro denominado de bactibilia) (BAITELLO et al, 2004). No caso da bactibilia, as bactérias envolvidas são predominantemente enterobactérias (Escherichia coli, Klebsiella sp, Enterococcus, bacterióides e Clostridium sp). A bactibilia é um foco primário de infecção, podendo propiciar um quadro de bacteriemia nos portadores da colecistite aguda litiásica (BAITELLO et al, 2004). Alguns procedimentos diagnósticos que manipulem com sítios anatômicos com alta carga contaminante, como o intestino, também podem levar a ocorrência de bacteriemia. É o caso da colonoscopia, que por meio de um aparelho (o colonoscópio) acaba causando microtraumas na mucosa por manobras de rotação e tração do aparelho, o que pode ocasionar a translocação bacteriana, com bacteremia transitória. A translocação bacteriana consiste na passagem de bactérias entéricas viáveis, fragmentos bacterianos entéricos e endotoxinas através da barreira intestinal e ocorre por disfunção dessa barreira, alteração da microbiota intestinal e deficiência imunológica do hospedeiro (FERREIRA, 2007). A bacteremia que segue a esse procedimento, geralmente é causada por bactérias Gram-negativas do sistema digestivo, como Escherichia coli, Enterobacter sp., Bacteroides sp. e Klebsiella sp.; os cocos Gram-negativos Corynebacterium sp., Clostridium sp. e Bacillus sp. Os representantes dos cocos Gram-positivos são os Streptococcus sp., Staphylococcus sp. e Peptostreptococcus sp do sistema digestivo e o Streptococcus viridans da microbiota bucal (FERREIRA, 2007). 17 Epidemiologicamente, os cocos Gram-positivos são os principais agentes encontrados em amostras de hemoculturas, com destaque para Staphylococcus coagulase-negativa, Staphylococcus aureus e os Enterococcus sp. Os Staphylococcus coagulase-negativa isolados de culturas frequentemente são considerados contaminantes em 70% dos casos, sendo essas bactérias causadoras de 10% dos casos. Já as bacteremias causadas por bastonetes Gram-negativos são menos frequentes, porém, a mortalidade associada é maior quando comparada a causada por cocos Gram-positivos (FERNANDES et al, 2011). Dentre as tendências observadas nos estudos sobre bacteremia o isolamento de bactérias multirresistentes é uma das mais atuais, pois com isso o arsenal antimicrobiano disponível atualmente tem se tornado menos ativo, reduzindo o número de opções terapêuticas e aumentando o impacto clínico causado por essas infecções. Destacam-se como preocupações decorrentes do processo de resistência antimicrobiana, os Staphylococcus coagulase-negativa resistente à oxacilina, os Enterococcus sp. vancomicina resistentes, a produção de beta-lactamases de amplo espectro e a resistência de Pseudomonas sp. aos carbapenêmicos (FERNANDES et al, 2011) Durante a pesquisa, verificou-se que existem uma série de trabalhos acadêmicos que buscam analisar a ocorrência, prevalência e incidência de determinadas espécies microbianas nas hemoculturas, demonstrando a importância desse estudo para a área da Saúde. Há diferentes focos nesses estudos, como consideração bacteremias que ocorrem em crianças, em ala de queimados, em gestantes, e ainda avaliando determinados micro-organismos. Estudos de incidência de bacteremia realizados por Fernandes et al (2011) e Cunha & Linardi (2013) corroboram com a literatura mostrando resultados em que a bactéria mais prevalente foi Staphylococcus epidermidis (uma espécie de Staphylococcus coagulase-negativa) com incidência de 22,44% e 40,6%, respectivamente. Staphylococcus aureus teve incidência de aproximadamente 18% em ambos os estudos. Além disso, no trabalho de Cunha & Linardi (2013) verificouse que apenas 15,4% das amostras de S. epidermidis encontradas apresentavam sensibilidade à oxacilina, uma quantidade considerada baixa. A apresentação desses resultados estaria relacionado com o aumento crescente de catéter venoso e ao estado de imunossupressão desenvolvidos pelos 18 pacientes com internações prolongadas, tornando-se um patógeno oportunista (CUNHA; LINARDI, 2013). Do ponto de vista epidemiológico, o S. epidermidis em desenvolvido estratégias interessantes para conquistar o ambiente hospitalar e se transformar em patógeno notório. Destaca-se a sua capacidade de colonizar a superfície inerte de dispositivos médicos invasivos, formando biofilmes de difícil tratamento, bem como o carreamento de diferentes elementos genéticos móveis, os quais são responsáveis pela resistência a oxacilina. (CUNHA; LINARDI, P. 153, 2013) Em trabalho realizado no CTI do Hospital de Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo (HCFMRP/USP) buscou avaliar a ocorrência de bactérias multirresistentes por meio de um estudo retrospectivo com dados coletados de prontuários atendidos nessa unidade desde o mês de outubro de 2003 a setembro de 2004. Nesse período, encontraram 68 casos de pacientes com bactérias multirresistentes, o que de acordo com o artigo, correspondeu a uma prevalência 12,98%. Do total de pacientes com essas bactérias, 50% (n = 34) foram à óbito, 45,6% (n = 31) tiveram alta hospitalar e 4,4% (n = 3) transferidos para outro hospital (ANDRADE et al, 2006). Interessante notar que no estudo a hemocultura não foi a única metodologia de identificação microbiana nos pacientes, mas também analisaram dados de uroculturas, ponta de cateter e líquor. No referido estudo, as bactérias Grampositivas foram as mais frequentes nas culturas, sendo o Staphylococcus sp. coagulase-negativa a mais encontrada, seguido por Staphylococcus aureus (tabela 3) (ANDRADE et al, 2006). Tabela 3: Distribuição numérica e percentual das bactérias multirresistentes isoladas de pacientes hospitalizados* Bactérias isoladas N % Staphylococcus sp. coagulase-negativa 54 36,7 Staphylococcus aureus 28 19,0 Acinetobacter baumanii 21 14,3 Pseudomonas aeruginosa 18 12,3 Klebsiella sp. 15 10,2 Stenotrophomonas maltrophilia 9 6,1 Serratia marcenses 1 0,7 Enterobacter cloacae 1 0,7 147 100 Total *Adaptado de ANDRADE et al (2006). 19 Em sua discussão, Andrade et al (2006) afirma que as espécies de Staphylococcus são importantes patógenos na apresentação de multirresistência, com prevalência de colonização de 40% dos adultos saudáveis, o que configura um importante problema de saúde pública com relevantes implicações econômicas, sociais e políticas em âmbito global, independente dos limites ambientais e étnicos. As espécies de Staphylococcus fazem parte da microbiota normal de narina, faringe, axilas, mãos, umbigo, trato urinário e feridas abertas. Em um estudo realizado no Hospital São Lucas da Pontifícia Universitária do Rio Grande do Sul (PUCRS), buscou avaliar a prevalência de produção da betalactamase de espectro estendido (Extended Spectrum Beta-Lactamases - ESBL) em bacteremias causadas por Klebsiella pneumoniae e Escherichia coli de pacientes hospitalizados (AUGUSTI et al, 2007). As ESBL são enzimas que hidrolisam a ligação do anel beta-lactâmico de antimicrobianos e conferem resistência a cefalosporinas (como cefotaxima, ceftazidima, ceftriaxona, cefepime) e monobactâmicos (como aztreonam). Sua ocorrência é predominante em espécies de Klebsiella e E. coli, mas podem ocorrer em outros gêneros da família Enterobacteriaceae (como Citrobacter, Proteus e Salmonella). A importância de caracterizar as bactérias produtoras de ESBL é porque são associadas à plasmídeos e estes podem ser trocados entre várias espécies bacterianas. Em países como os Estados Unidos a prevalência de K. pneumoniae e E. coli resistentes às cefalosporinas de terceira geração chegou a 8,9% a 3,2%, respectivamente, em grandes hospitais universitários desse país essa resistência chegou a 44% para K. pneumoniae. No Brasil, a prevalência de resistência a esses antimicrobianos chegou a 45,4% e 6% para K. pneumoniae e E. coli, respectivamente (AUGUSTI et al, 2007). Nesse estudo, 145 pacientes foram incluídos e a prevalência de bacteremias por bactérias produtoras de ESBL foi de 35,2% (n = 51 pacientes). A tabela 4 mostra o perfil de sensibilidade das bactérias isoladas (AUGUSTI et al, 2007). Tabela 4: Perfil de sensibilidade dos antimicrobianos de bactérias produtoras e não produtoras de ESBL* 20 Sensibilidade n (%) ESBL+ ESBL – n = 51 n = 94 Amicacina 17 (33,3) 81 (86,2) Aztreonam 0 83 (88,3) Cefepime 1 (2) 64 (68,1) Ceftriaxona 0 69 (73,4) Caftazidime 2 (3,9) 75 (79,8) Ciprofloxacino 5 (9,8) 72 (76,6) Ertapenem 46 (90,2) _ Imipenem 51 (100) 92 (97,9) _ _ Antimicrobiano Meropenem *Adaptado de AUGUSTI et al, 2007 ESBL+: bactérias produtoras de ESBL. ESBL-: bactérias não produtoras de ESBL. Os resultados apresentados no artigo apontaram para a necessidade de vigilância contínua quanto a possibilidade de produção de tais enzimas serem a falta de resposta terapêutica em pacientes com fatores de risco ou para infecções causadas pelas bactérias analisadas. Outro ponto interessante do estudo, é que analisaram as condições clínicas dos pacientes e uma importante constatação foi que houve maiores taxas de utilização prévia de antimicrobianos (principalmente da classe dos beta-lactâmicos) nos pacientes em que houve o isolamento de bactérias produtoras de ESBL. A exposição prévia a antibióticos pode levar a resistência em E. coli e K. pneumoniae, pela pressão seletiva que esses medicamentos exercem sobre as cepas mais sensíveis. As cefalosporinas de terceira geração são os antibióticos mais utilizados em hospitais, exercendo um papel predominante na pressão seletiva para o desenvolvimento da resistência, sugerindo que as ESBL possam emergir como resultado do uso excessivo de cefalosporinas (AUGUSTI et al, 2007). O estudo realizado por Freire et al (2013), em UTI pediátrica, demonstrou um resultado diferenciado nas hemoculturas com crescimento positivo. Nessa pesquisa, o microrganismo mais frequente nas hemoculturas foram leveduras, seguida por Staphylococcus aureus e Staphylococcus epidermidis. Outros microrganismos 21 encontrados foram: Klebsiella sp., Alcaligenes xylosoxidans, Cedecea lapegei, Staphylococcus hominis e Pseudomonas aeruginosa. As infecções fúngicas realizadas por leveduras são as mais comuns, em virtude do variado modo de transmissão, que pode ser pela via endógena ou exógena, pelas mãos dos profissionais, infusos contaminados, biomateriais e fontes ambientais inanimadas. As infecções causadas por esses micro-organismos apresentam elevada taxa de morbidade e mortalidade (FREIRE et al, 2013). Desse modo, verifica-se que o estudo da epidemiologia bacteriana é um importante instrumento de auxílio para elaboração e implementação de medidas efetivas de prevenção e controle de infecções hospitalares, com consequente redução do tempo de internação hospitalar, dos custos hospitalares e na redução das taxas de morbidade e mortalidade (FERNANDES et al, 2013). 22 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS AGÊNCIA NACIONAL DE VIGILÂNCIA SANITÁRIA – ANVISA. Procedimentos laboratoriais: da requisição do exame à análise microbiológica. 45 p, 2004. Disponível em < http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/microbiologia/mod_3_2004.pdf>. Acesso em 04 out. 2014. ALMEIDA NETO, J. A. R. Características das hemoculturas em pacientes internados em um hospital universitário da cidade de Salvador, Bahia, de 2007 a 2011. Monografia de conclusão do curso de Medicina, Faculdade de Medicina da Bahia, Universidade Federal da Bahia. Salvador, 56 p, 2013. ANDRADE, D.; LEOPOLDO, V. C.; HAAS, V. J. Ocorrência de bactérias multirresistentes em um centro de terapia intensiva de hospital brasileiro de emergências. Revista Brasileira de Terapia Intensiva, v. 18, n. 1, 27 – 33, 2006. ARAUJO, M. R. E. Hemocultura: recomendações de coleta, processamento e interpretação dos dados. J Infect Control, v. 1, n. 1, 08 – 19, 2002. AUGUSTI, G. R.; SUPERTI, S.; ZAVASCKI, A. P. Prevalência de produção de beta-lactamases de espectro estendido em bacteremias por Klebsiella pneumoniae e Escherichia coli. Scientia Medica, v. 17, n. 4, 192 – 196, 2007. BAITELO, A. L.; COLLEONI NETO, R.; HERANI FILHO, B; CORDEIRO, J. A.; MACHADO, A. M. O.; GODOY, M. F.; GAIA, F. F. P. Prevalência e fatores associados à bacteriemia nos portadores de colecistite aguda litiásica. Revista da Associação Médica Brasileira, v. 50, n. 4, 373 – 379, 2004. BRAZ, D. M. L. Prevalência bacteriana nas hemoculturas do hospital de urgência da Região Sudoeste (HURSO) – GO. Monografia de conclusão de curso de Especialização em Farmácia Clínica e Atenção Farmacêutica, Pontifícia Universidade Católica de Goiás, Goiânia, 24 p, 2013. CUNHA, M. N.; LINARDI, V. R. Incidência de bacteriemia em um hospital terciário do leste de Minas Gerais. Revista de Medicina de Minas Gerais, v. 23, n. 2, 149 – 153, 2013. DIAMENT, D.; SALOMÃO, R.; RIGATTO, O.; GOMES, B.; SILVA, E.; CARVALHO, N. B.; MACHADO, F. R. Diretrizes para tratamento da sepse grave/choque séptico – abordagem do agente infeccioso-diagnóstico. Revista Brasileira de Terapia Intensiva, v. 23, n. 2, 134 – 144, 2011. FERNANDES, A. P.; SILVA, C. J.; COSTA, C.; SCHREIBER, A. Z.; MELLO, F. A.; TEIXEIRA-LOYOLA, A. B. A. Incidência bacteriana em hemoculturas no Hospital das Clínicas Samuel Libânio de Pouso Alegre MG. Revista Eletrônica Acervo Saúde, v. 2, 122 – 133, 2011. 23 FERREIRA, L. C. Determinação da translocação bacteriana durante colonoscopia mediante hemocultura e PCR. Dissertação de Mestrado em Clínica Cirúrgica do Setor de Ciências da Saúde da Universidade Federal do Paraná, Curitiba, 80 p, 2007. FREIRE, I. L. S.; OLIVEIRA E ARAUJO, R.; VASCONCELOS, Q. L. D. A. Q.; MENEZES L. C. C.; COSTA, I. K. F.; TORRES, G. V. Perfil microbiológico de sensibilidade bacteriana das hemoculturas de unidade de terapia intensiva pediátrica. Revista de Enfermagem da Universidade Federal de Santa Maria, v. 3, n. 3, 429 – 439, 2013. GIR, E.; STUCHI, R. A. G.; MACEDO, R. F. C.; DRESLER, D. E. Ações de enfermagem em hemocultura. Revista Gaúcha de Enfermagem, v. 19, n. 2, 95 – 105, 1998. LEÃO, S. N. O.; PASSOS, X. S.; REIS, C.; VALADÃO, L. M. A.; SILVA, M. R. R.; PIMENTA, F. C. Fenotipagem de bactérias isoladas em hemoculturas de pacientes críticos. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, v. 40, n. 5, 537 – 540, 2007. MILLAN, L. S.; BENEDETTE, C. E. M.; MAXIMO, L. Z.; ALMEIDA, P. C. C.; GOMES, D. S.; GEMPERLI, R.; FERREIRA, M. C. Infecções de corrente sanguínea por bactérias multirresistentes em UTI de tratamento de queimados: experiência de quatro anos. Revista Brasileira de Cirurgia Plástica, v. 27, n. 3, 374 – 378, 2012. PEREIRA, C. S. B.; GOULART, M. E.; TUPINAMBÁ, G.; MORAES, S. R. Prevalência microbiana em diversas amostras clínicas obtidas de pacientes do CTI de um hospital militar. Revista Saúde Vassouras, v. 3, n. 2, 49 – 58, 2012. SILVA, C. M. L.; SENA, K. X. F. R.; CHIAPETTA, A. A.; QUEIROZ, M. M. O.; VILLAR, M. C. M.; COUTINHO, H. M. Incidência bacteriana em hemoculturas. NewsLab, ed. 77, 132 – 144, 2006. TUDELA, P.; PRAT, C.; LACOMA, A.; MÒDOL, J. M.; DOMÍNGUEZ, J.; GÌMENEZ, M.; TOR, J. Biomarcadores para la predicción em urgências de infección bacteriana, bacteriemia y gravedad. Emergencias, v. 24, 348 – 356, 2012. VIANA, A. P. P.; SOARES, R. S.; CASTRO, A. R. L.; KLUCZYNIK, C. E. N.; CATÃO, R. M. R. Incidência bacteriana em hemoculturas de recém-nascidos e perfil de suscetibilidade frente aos antimicrobianos. Biofar – Revista de Biologia e Farmácia, v. 5, n. 1, 102 – 110, 2011. 24 2 – ARTIGO PREVALÊNCIA E PERFIL DE SENSIBILIDADE ANTIMICROBIANA DE BACTÉRIAS ISOLADAS DE HEMOCULTURA DE HOSPITAIS PRIVADOS PREVALENCE AND PROFILE OF ANTIMICROBIAL SENSITIVITY BACTERIA ISOLATED OF BLOOD CULTURE FROM HOSPITALS PRIVATE Teline Scheffer Dallacorte1, Leyde Daiane de Peder2, Claudinei Mesquita da Silva3 1 Discente do curso de Farmácia da Faculdade Assis Gurgacz. 2 Mestre em Ciências, docente do curso de Farmácia da Faculdade Assis Gurgacz. 3 Mestre em Biologia Molecular, docente do curso de Farmácia da Faculdade Assis Gurgacz. Endereço para correspondência: Teline Scheffer Dallacorte. Rua Visconde do Rio Branco, 2949. CEP: 85810-180. Email: [email protected]. Subtítulo a ser utilizado: Prevalência de bactérias de hemoculturas 25 RESUMO: O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalência das bactérias presentes em hemoculturas positivas realizadas em seis hospitais privados na cidade de Cascavel– PR, bem como sua sensibilidade aos antimicrobianos envolvidos na terapia. Trata-se de um estudo restrospectivo, com análises de laudos laboratoriais de pacientes submetidos à hemocultura durante o período de janeiro de 2012 a dezembro de 2014. Nesse período, foram analisados 5059 laudos de pacientes submetidos a hemoculturas, dos quais 613 obtiveram hemocultura positiva. Encontrou-se 29 espécies bacterianas diferentes nas hemoculturas nos seis hospitais, onde Staphylococcus aureus foi a mais prevalente, seguida por S. epidermidis, K. pneumoniae, E. coli, A. baumanii, P. aeruginosa, S. haemolythicus e S. hominis. A sensibilidade a antimicrobianos foi considerada satisfatória para a maioria das espécies, em que houve sensibilidade há 4 ou mais diferentes antimicrobianos. A exceção foi o Acinetobacter baumanii, que teve sensibilidade reduzida para a maioria dos antibióticos, sendo sensível principalmente à Amicacina, Polimixina B e Tigeciclina. Os antimicrobianos que apresentaram maior sensibilidade foram Daptomicina, Imipenem, Meropenem e Vancomicina. O estudo mostrou que o Staphylococcus aureus e o Staphylococcus epidermidis são os principais agentes responsáveis pelas infecções sanguíneas nos hospitais privados na cidade de Cascavel-PR, o que está provavelmente relacionado ao uso crescente de cateter venoso e ao estado de imunossupressão desenvolvido pelos pacientes com internações por um longo período e que a resistência dessas bactérias não foram elevada, inclusive a sensibilidade de S. aureus a oxacilina, em que houve sensibilidade razoável para as cepas encontradas em todas as unidades hospitalares. PALAVRAS-CHAVE: Bacteremia; Hemocultura; Prevalência; Antimicrobianos; 26 ABSTRACT: The objective of this research was to verify the prevalence of bacterias presents in positive blood cultures realized at six private hospitals in Cascavel City – PR, since your sensibility to the antimicrobial envolved in therapy. It is about a restrospective study, with analysis of laboratory valuations of patients submitted to blood culture during the period between January 2012 to December 2014. During this period, were analyzed 5.059 valuations of patients submitted to blood culture, which 613 got positive bloodstream. It has found 29 different bacterias species at these hospitals, where Staphylococcus aureus was the most prevalent, followed by S. epidermidis, K. pneumoniae, E. coli, A. baumanii, P. aeruginosa, S. haemolythicus and S. hominis. The sensibility in cause antimicrobial was considered satisfied to the most of species, where there was sensibility to four or more different antimicrobials. The exception was the Acinetobacter baumanii, that there was sensibility reduced to the most of antibiotics been sensible especially the Amikacin, Polymyxyn B and Tigecycline. The antimicrobials that presented more sensibility were Daptomycin, Imipenem, Meropenem and Vancomycin. The study showed that the Staphylococcus aureus and the Staphylococcus epidermidis are the principal responsible agents by the blood infections at the private hospitals in Cascavel City, what is probably related to the increasing use of venous catheter and to the state of imunosupressure desenvolved by the patients with hospitalization for a long period and that the resistence of these bacterias were not elevated, inclusive the sensibility of S. aureus the oxacilin, where there was reasonable sensibility to the vines found in all hospital units. KEYWORDS: Bacteremia; Bloodculture; Prevalence; Antimicrobials. 27 INTRODUÇÃO A bacteremia consiste na indicação da presença de microrganismos viáveis na corrente sanguínea, de grande relevância diagnóstica, com relação direta com aumento nas taxas de morbidade e mortalidade, representando uma das mais significativas complicações no processo infeccioso, comprovada laboratorialmente pela hemocultura 1,2. A hemocultura é um exame de solicitação de grande frequência e de reconhecida importância em ambientes hospitalares, determinando o agente etiológico e a conduta terapêutica necessária, com a determinação do antimicrobiano mais adequado para o tratamento, com consequente redução dos índices de mortalidade 2,3. As altas taxas de morbidade e mortalidade estão muitas vezes relacionadas às infecções da corrente sanguínea, exigindo a implantação de um processo de vigilância diária das hemoculturas. Determinar os microrganismos mais prevalentes em hemoculturas, contribui também para adoção de medidas preventivas de minimização de contaminações por tais microrganismos, com a adoção de técnicas de punção mais seguras, diagnóstico precoce de infecções em outros sistemas orgânicos que podem migrar para a corrente sanguínea, exemplificando novamente a importância da vigilância de hemoculturas 3. Estudos estatísticos realizados nos Estados Unidos da América estimaram que anualmente ocorram 250.000 episódios de bacteremias nosocomiais, o que representa a décima causa mais frequente de óbito naquele país. Essa afecção aumenta a morbidade e a mortalidade, tempo de internação, custos e sofrimento para o pacientes, especialmente os de idade pediátrica 4. Na literatura, coagulase-negativo microrganismos (SCN) (com mais prevalentes predominância do são Staphylococcus Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Enterococcus spp.), Candida spp., estes estão relacionadas a bacteremias primárias, relacionadas principalmente com problemas relacionadas à técnica de colocação de cateter venoso. Bacteremias em que os agentes etiológicos são bacilos Gram-negativos são causadas principalmente por Pseudomonas aeruginosa e Enterobacter spp. e Klebsiella pneumoniae 2,5. A vigilância de infecções nosocomiais é de grande importância na identificação e no controle de cepas com multirresistência a antimicrobianos, além 28 de minimizar o impacto na morbidade e na mortalidade relacionadas às bacteremias. Dessa forma, analisar a incidência de bactérias isoladas de hemoculturas realizadas em unidades hospitalares de âmbito privado contribui na vigilância da saúde, evitando que toda a coletividade seja afetada por essas bactérias. Dessa forma, o objetivo do estudo foi estabelecer o perfil etiológico em hemoculturas realizadas em seis hospitais privados da cidade de Cascavel – PR, bem como verificar a sensibilidade dos microrganismos aos antibióticos disponíveis para terapia. METODOLOGIA A pesquisa foi realizada a partir da análise de laudos laboratoriais de hemocultura realizados por um Laboratório de Análises Clínicas privado no município de Cascavel – PR, de pacientes internados em hospitais privados do mesmo município, no período de janeiro de 2012 a dezembro de 2014. Após o término das análises, os dados coletados foram tabulados e analisados estatisticamente para posterior publicação através do software Microsoft Office Excel® 2013 no Laboratório de Análises Clínicas da FAG. O estudo foi iniciado após a aprovação pelo Comitê de Ética da Faculdade Assis Gurgacz e encontra-se registrado na Plataforma Brasil sob o número 36861314.8.0000.5219. RESULTADOS Durante o período de janeiro de 2012 a dezembro de 2014, seis instituições hospitalares da iniciativa privada localizadas no município de Cascavel– PR realizaram análises de hemocultura no laboratório que forneceu os laudos para o estudo. Foram excluídos os laudos de instituições e hospitais de iniciativa pública e filantrópica localizadas nessa cidade e de outras localidades, assim como excluídos os laudos de hospitais privados de outros municípios. Também foram excluídos os laudos solicitados por seguradoras de saúde que não informavam a unidade hospitalar. No total, foram selecionados 5059 laudos que atendiam os requisitos da metodologia. Deste total, 4446 (87,88%) não apresentaram crescimento bacteriano 29 (hemocultura negativa) e 613 (12,12%) apresentaram crescimento bacteriano. A Tabela 1 apresenta a incidência bacteriana nas 06 instituições hospitalares privadas selecionadas. As instituições estão identificadas como H1, H2, H3, H4, H5 e H6. Tabela 1: Resultado das hemoculturas coletadas em seis hospitais privados do município de Cascavel – PR, no período de janeiro de 2012 a dezembro de 2014. Hemocultura Negativa Hemocultura Positiva N° (Total = 4446) N° (Total = 613) % 276 9,41 105 12,85 92 12,92 54 22,13 37 21,38 49 38,58 2657 712 673 190 136 78 % H1* 90,58 H2* 87,15 H3* 87,97 H4* 77,87 H5* 78,61 H6* 61,41 Legenda: *H1 = Hospital 1; H2 = Hospital 2; H3 = Hospital 3; H4 = Hospital 4; H5 = Hospital 5; H6 = Hospital 6. A unidade hospitalar H1 foi a que solicitou a maior quantidade de hemoculturas, em um total de 2933 laudos, em que 2657 (90,58%) foram de hemoculturas negativas e 276 (9,41%) hemoculturas positivas. A unidade hospitalar H2 solicitou a segunda maior quantidade de hemoculturas, com um total de 817 hemoculturas durante o período estudado. Destas, 712 (87,15%) apresentaram crescimento microbiano negativo e 105 (12,85%) crescimento positivo. A unidade hospitalar H3 solicitou 765 hemoculturas, onde 673 (87,97%) eram negativas e 92 (12,92%) eram positivas. A unidade H4 solicitou 244 hemoculturas, sendo que 190 (77,87%) não apresentaram crescimento microbiano e 54 (22,13%) apresentaram crescimento microbiano. A unidade H5 solicitou 173 hemoculturas no período estudado, com 136 (78,61%) hemoculturas negativas e 37 (21,38%) hemoculturas positivas. A unidade 30 hospitalar H6 solicitou 127 hemoculturas, onde 78 (61,41%) eram hemoculturas negativas e 49 (38,58%) eram positivas. As hemoculturas positivas foram organizadas conforme ocorrência no sexo, por ano para cada unidade hospitalar investigada, conforme apresenta a tabela 2. Tabela 2: Frequência de hemoculturas positivas por sexo a cada ano do período analisado no estudo 2012 Masculino Feminino Total 15 13 28 Masculino Feminino Total 29 5 34 Masculino Feminino Total 4 4 8 Masculino Feminino Total 6 6 12 Masculino Feminino Total 2 1 3 Masculino Feminino Total 11 3 14 2013 H1* 104 53 157 H2* 24 9 34 H3* 17 30 47 H4* 9 9 18 H5* 14 16 30 H6* 11 9 20 2014 42 49 91 23 14 37 28 9 37 10 13 23 3 1 4 13 2 15 Legenda: *H1 = Hospital 1; H2 = Hospital 2; H3 = Hospital 3; H4 = Hospital 4; H5 = Hospital 5; H6 = Hospital 6. Também se analisou a idade média dos pacientes que tiveram seus lados analisados no presente estudo, conforme tabela 3. 31 Tabela 3: Faixa etária média dos pacientes que tiveram hemoculturas positivas, de acordo com o sexo para cada unidade hospitalar privada. Mínima Máxima Média H1 Masculino 0 92 59,18 Feminino 0 101 60,42 H2 Masculino 2 87 54,36 Feminino 2 100 62 H3 Masculino 1 89 51,28 Feminino 1 95 55,62 H4 Masculino 2 91 59,16 Feminino 4 87 63,03 H5 Masculino 1 90 56,68 Feminino 1 91 56,11 Masculino 1 86 56,37 Feminino 1 87 49,54 H6 Legenda: *H1 = Hospital 1; H2 = Hospital 2; H3 = Hospital 3; H4 = Hospital 4; H5 = Hospital 5; H6 = Hospital 6. 32 Das 613 hemoculturas positivas analisadas dos seis hospitais privados de Cascavel – PR verificou-se a ocorrência de 29 espécies bacterianas, cuja frequência total está compilada na tabela 4. Tabela 4: Espécies bacterianas identificadas e frequência da identificação nos laudos analisados. Microorganismos Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Klebsiella pneumoniae Escherichia coli Acinetobacter baumanii Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus haemolythicus Staphylococcus hominis Enterobacter cloacae Serratia marscescens Enterococcus faecalis Staphylococcus capitis Stenotrophomonas maltophilia Citrobacter freundii Klebsiella oxytoca Burkholderia cepacia Enterobacter aerogenes Proteus mirabilis Streptococcus do grupo Viridans Salmonella spp. Streptococcus bovis Streptococcus pneumoniae Streptococcus pyogenes Enterococcus faecium Enterococcus spp. Morganella morganii Staphylococcus coagulase-negativo Staphylococcus faecalis Staphylococcus saprophyticus * N = número de laudos N* 110 98 89 55 54 51 34 29 14 14 11 8 7 6 5 4 4 3 3 2 2 2 2 1 1 1 1 1 1 % 17,94 16,15 14,52 8,97 8,80 8,32 5,55 4,73 2,28 2,28 1,79 1,31 1,14 0,98 0,82 0,65 0,65 0,49 0,49 0,33 0,33 0,33 0,33 0,16 0,16 0,16 016 0,16 0,16 A distribuição e a ocorrência de cada espécie por hospital analisado foi compilada na tabela 5. 33 Tabela 5: Distribuição e ocorrência das espécies bacterianas identificadas por cada instituição. Microorganismos H1 H2 H3 H4 H5 H6 Acinetobacter 22/(3,59%) 10/(1,63%) 12/(1,95%) 5/(0,82%) 2/(0,33%) 3/(0,49%) baumanii Burkholderia cepacea 1/(0,16%) 3/(0,49%) Citrobacter freundii 5/(0,82%) 1/(0,16%) Enterobacter 3/(0,49%) 1/(0,16%) aerogenes Enterobacter cloacae 6/(0,98%) 5/(0,82%) 2/(0,33%) 1/(0,16%) Enterococcus faecalis 6/(0,98%) 3/(0,49%) 1/(0,16%) 1/(0,16%) Enterococcus faecium 1/(0,16%) Enterococcus spp. 1/(0,16%) Escherichia coli 18/(2,94%) 10/(1,63%) 13/(2,12%) 3/(0,49%) 8/(1,30%) 3/(0,49%) Klebsiella oxytoca 3/(0,49%) 2/(0,33%) Klebsiella 43/(7,02%) 22/(3,59%) 10/(1,63%) 6/(0,98%) 4/(0,65%) 4/(0,65%) pneumoniae Morganella morganii 1/(0,16%) Proteus mirabilis 1/(0,16%) 1/(0,16%) 1/(0,16%) Pseudomonas 31/(5,06%) 6/(0,98%) 3/(0,49%) 4/(0,65%) 1/(0,16%) 6/(0,98%) aeruginosa Salmonella spp. 2/(0,33%) Serratia marscescens 4/(0,65%) 2/(0,33%) 2/(0,33%) 1/(0,16%) 3/(0,49%) 2/(0,33%) Staphylococcus 44/(7,18%) 23/(3,75%) 12/(1,96%) 14/(2,28%) 8/(1,30%) 9/(1,47%) aureus Staphylococcus 2/(0,33%) 1/(0,16%) 1/(0,16%) 4/(0,65%) capitis Staphylococcus 1/(0,16%) coagulase-negativo Staphylococcus 55/(9,06%) 10/(1,63%) 15/(2,47%) 6/(0,98%) 3/(0,49%) 9/(1,47%) epidermidis Staphylococcus 1/(0,16%) faecalis Staphylococcus 18/(2,94%) 3/(0,49%) 3/(0,49%) 5/(0,82%) 4/(0,65%) 1/(0,16%) haemolythicus Staphylococcus 11/(1,79%) 1/(0,16%) 10/(1,63%) 4/(0,65%) 1/(0,16%) 2/(0,33%) hominis Staphylococcus 1/(0,16%) saprophyticus Stenotrophomonas 1/(0,16%) 3/(0,49%) 1/(0,16%) 1/(0,16%) 1/(0,16%) maltophilia Streptococcus bovis 1/(0,16%) 1/(0,16%) Streptococcus do 2/(0,33%) 1/(0,16%) grupo Viridans Streptococcus 1/(0,16%) 1/(0,16%) pneumoniae Streptococcus 2/(0,33%) pyogenes *H1 = Hospital 1; H2 = Hospital 2; H3 = Hospital 3; H4 = Hospital 4; H5 = Hospital 5; H6 = Hospital 6. 34 35 36 37 38 39 40 41 42 DISCUSSÃO Os resultados obtidos a partir do estudo permitiram verificar que do período de janeiro de 2012 a janeiro de 2014, as seis unidades hospitalares que solicitaram hemoculturas ao laboratório de análises clínicas, que forneceu os laudos para confecção do estudo, obtiveram um total de 5059 laudos. A somatória de todos os laudos analisados mostra que a ocorrência de hemoculturas positivas foi baixa (12,12%). Contudo, quando se analisa individualmente cada unidade hospitalar, verifica-se que as unidades H4, H5 e H6 tiveram ocorrência de hemoculturas positivas superior a 20%, com destaque para a unidade H6, onde 38,58% de todas as hemoculturas solicitadas apresentaram crescimento microbiano. Estudo realizado em hospital privado da região leste de Minas Gerais, apresentou 81,4% de hemoculturas negativas e 18,6% de hemoculturas positivas 2. Já uma pesquisa desenvolvida em rede de hospitais privados de Fortaleza – CE, das 1.321 hemoculturas solicitadas, 55,94% apresentaram crescimento microbiano positivo 6. Em estudo desenvolvido em hospital filantrópico de Alfenas – MG de 846 hemoculturas solicitadas, 47,52% foram de hemoculturas positivas 7 . Estudo realizado em UTI de um hospital escola de Goiânia – GO verificou que 7.69% das 2.210 hemoculturas solicitadas apresentaram crescimento microbiano positivo 8 . Esses estudos demonstram que não há um perfil geral da prevalência e ocorrência de hemoculturas em território brasileiro, corroborando a necessidade de maiores estudos regionais e locais, para conhecer a realidade hospitalar de cada unidade, permitindo que cada unidade desenvolva estratégia necessária para a prevenção de bacteremia e sepse. No presente estudo, houve uma maior prevalência de hemoculturas positivas no sexo masculino, em um total de 366 (59,71%) e 247 (40,29%) eram de pacientes do sexo feminino. Esse resultado difere do estudo realizado por REIS et al (2013), onde 55,4% das hemoculturas positivas eram de pacientes do sexo feminino 7. Mas aproxima-se do estudo de Alves et al (2012), onde 60% dos laudos positivos eram de pacientes do sexo masculino 9. Analisou-se também a faixa etária dos pacientes que tiveram hemoculturas positivas. A tabela 3 demonstra que houve uma grande amplitude de faixa etária, com pacientes com menos de um ano até pacientes com idade superior a 100 anos, configurando-se extremos etários. A faixa etária média de todos os pacientes ficou 43 em 56,98%, pois já há comprometimento das funções imunológicas. A fragilidade do sistema imunológico é um fator importante para o desenvolvimento de bacteremia. Contudo, depende de outros fatores também, como hábitos alimentares e de higiene, presença de alcoolismo e tabagismo, além de outras doenças, como presença do vírus da imunodeficiência humana (HIV), câncer, etc., além de fatores relacionados com a própria estadia hospitalar, como tempo de internação, utilização de cateteres, intubação orotraqueal e sondas, são importantes fatores para o desenvolvimento de bacteremia e septicemia Verifica-se uma grande 10, 11, 3 diversidade . de bactérias identificadas em hemoculturas, incluindo espécies pouco citadas nos estudos analisados, mas com grande potencial de risco aos pacientes como Serratia marscescens, Stenotrophomonas maltophilia, Citrobacter freundii, Klebsiella oxytoca, Burkholderia cepacia, Proteus mirabilis, Salmonella e Morganella morganii. Alves et al (2012), Freire et al (2013) e Magalhães et al (2014) também identificaram grande variedade de bactérias em seus estudos 9, 4, 12. O estudo desenvolvido por Alves et al (2012) para verificar a incidência bacteriana em hemoculturas, encontrou bactérias bastante identificadas em estudos do gênero, como os gram-positivos S. epidermidis e S. aureus, as enterobacteriácias K. pneumoniae e E. coli e as não-fermentadoras P. aeruginosa e A. baumanii, mas também identificou Serratia liquefaciens, Enterobacter cloacae, Proteus mirabilis, além de leveduras 9. Freire et al (2013) realizou seu estudo em uma UTI pediátrica e encontrou como principal microrganismo em hemoculturas leveduras, seguido por S. aureus e S. epidermidis; mas também encontrou espécies com Alcaligenes xylosoxidans e Cedecea lapagei, O estudo de Magalhães et al (2014) concentrou-se nas mais prevalentes bactérias encontradas (S. epidermidis, S. aureus, E. coli e Enterobacter spp, sendo que a última espécie foi a mais prevalente no estudo), mas informando que outras espécies foram identificadas em 27% dos laudos analisados 4, 12 . As bactérias do gênero Staphylococcus foram as mais prevalentes. São bactérias do tipo cocos Gram-positivos. No presente estudo foram encontradas oito espécies (S. aureus, S. epidermidis, S. haemolythicus, S. hominis, S. capitis, Staphylococos coagulase-negativo, S. faecalis e S. saprophyticus) desse gênero de grande relevância epidemiológica. De acordo com Magalhães et al (2014), S. aureus é o principal agente patológico de infecções nosocomiais e comunitárias, sendo 44 comumente encontrada nas fossas nasais, exigindo bons hábitos de higiene e uma postura profissional asseada para evitar sua disseminação no meio hospitalar. Se diferencia das demais espécies de Staphylococcus por apresentar resultado positivo na prova da coagulase 12. Staphylococcus epidermidis e/ou os Staphylococos coagulase-negativos são considerados saprófitas ou raramente patogênicos. Reconhecidos atualmente por serem oportunistas, já que fazem parte da microbiota da pele e são frequentemente inoculados durante procedimentos invasivos ou por veiculação através da equipe de saúde, com potencial de causar bacteremia, endocardite, peritonite e osteomielite. A patogenicidade dessas bactérias tem sido associada de determinados agentes antimicrobianos, chegando a casos de multirresistência a 80%, restringindo o espectro de antimicrobianos disponíveis para o tratamento 12, 4. A família da Enterobacteriaceae esteve presente com diversas espécies (Klebsiella, Citrobacter, Salmonella, Proteus. E. coli). São bacilos Gram-negativos que obtém energia a partir da fermentação de carboidratos, sendo responsável por uma grande variedade de infecções hospitalares e comunitárias, possuindo habilidade patológica variável, podendo ser apenas comensais e fazerem parte da microbiota intestinal, assim como serem agentes etiológicos de severas infecções por apresentarem alta prevalência de resistência a antimicrobianos, principalmente pela presença da enzima beta-lactamase de espectro ampliado (ESBL) 12. As ESBL conferem resistência aos antimicrobianos pertencentes a classe das cefalosporinas de amplo espectro (conhecidas também como de 3ª geração), como a cefotaxima, ceftazidima e ceftriaxona, além de aztreonam, um monobactâmico. As ESBL foram identificadas em 1983 na Alemanha, em uma cepa de Klebsiella pneumoniae, sendo posteriormente identificada em cepas de E. coli nos Estados Unidos. Essa enzima é codificada por genes plasmidiais mutantes, que são facilmente transferidos para outros microrganismos por meio da conjugação. Uma peculiaridade das cepas bacterianas, que produzem essa enzima, é que nas análises in vitro apresentam sensibilidade a antimicrobianos, contudo, in vivo é observada resistência bacteriana. O uso indiscriminado em ambientes hospitalares de cefalosporinas de espectro ampliado resultou em cepas que produzem ESBL também na comunidade 13. As espécies A. baumanii, P. aeruginosa, Stenotrophomonas maltophilia e Burkholderia cepacia são pertencentes a família dos bacilos Gram-negativos não- 45 fermentadores, bactérias estritamente aeróbias, não esporuladas, que não possuem a capacidade de utilizar carboidratos como fonte de energia através da fermentação, utilizando para esse fim, a via oxidativa. Essas bactérias tiveram sua incidência aumentada a partir da década de 70, em razão da sensibilidade diminuída a um grande número de antimicrobianos 14. No presente estudo, a espécie Staphylococcus aureus foi a bactéria mais encontrada de forma geral, correspondendo a 17,94% de todas as bactérias identificadas, seguida pela espécie Staphylococcus epidermidis (16,15% do total) como se visualiza na tabela 4. Contudo, analisando atentamente a tabela 5, por unidade hospitalar, verificamos que esses números não são absolutos. Percebe-se, por exemplo, na unidade H1, a espécie mais prevalente foi S. epidermidis, com 9,06% (n = 55 laudos positivos) do percentual total dessa unidade, seguido por S. aureus com 7,18% (n = 44). S. epidermidis também foi a espécie mais prevalente na instituição H3, sendo identificado em 15 laudos, enquanto que S. aureus foi identificado em 12 laudos na mesma instituição. Esse resultado é semelhante ao encontrado com os estudos como o de Cunha & Linardi (2013), Coimbra et al (2012), Alves et al (2012) e Andrade et al (2006) 2, 15, 9, 11. Entretanto, na instituição H2, verifica-se o oposto, sendo o S. aureus a espécie mais prevalente nas hemoculturas positivas (n = 23) em comparação com S. epidermidis (n = 10). S. aureus também foi mais identificado na instituição H4 (n = 14) e H5 (n = 8) em contraposição ao S. epidermidis (6 laudos no H4 e 3 laudos no H5). Na instituição H6 houve 9 laudos onde se identificou S. aureus e 9 laudos onde se identificou S. epidermidis. Estudo de Leiser et al (2007) também teve como bactéria mais prevalente S. aureus 16. A investigação do gênero Staphylococcus é de grande importância devido à sua alta prevalência nas infecções hospitalares, além de apresentar elevadas taxas de resistência ao antimicrobiano oxacilina e a outros antimicrobianos, restringindo o elenco farmacológico para seu tratamento 2. Quanto à análise da sensibilidade a antimicrobianos, verificou-se que não foi realizado antibiograma para todas as hemoculturas positivas. Interessante notar que durante determinados períodos, determinadas unidades realizaram sequer um único antibiograma para determinados microrganismos. A razão é desconhecida, mas preocupante, pois o antibiograma é relevante para avaliação, triagem e monitoramento da resistência e sensibilidade dos microrganismos que causam 46 bacteremia e sepse nas instituições hospitalares, além de permitir definir a melhor estratégia farmacológica, permitindo a realização de uma antibioticoterapia racional e eficiente 9, 3. A tabela 6 apresenta a sensibilidade das cepas de S. aureus aos antimicrobianos. Clindamicina, daptomicina, linezolida, minociclina, rifampicina, sulfametoxazol + trimetoprima, tetraciclina e vancomicina chegaram a ter 15 ou mais hemoculturas contendo S. aureus sensíveis dependendo da unidade hospitalar. Não houve resistência a daptomicina e a vancomicina por nenhuma hemocultura de S. aureus em nenhuma das unidades hospitalares e em nenhum dos anos analisados. Já eritromicina, gentamicina e oxacilina tiveram maior resistência. S. epidermidis foi o coco Gram-positivo que teve mais antibiogramas realizados (tabela 7). Daptomicina, linezolida, minociclina, rifampicina, tetraciclina e vancomicina apresentaram bastante sensibilidade com esse microrganismo. Eritromicina e oxacilina apresentaram sensibilidade baixa. S. haemolythicus e S. hominis (tabelas 12 e 13, respectivamente), apresentaram sensibilidade semelhante a S. aureus e S. epidermidis aos antimicrobianos daptomicina, linezolida, rifampicina e vancomicina. O gênero dos Staphylococcus geralmente é encontrado em secreções gerais, com destaque para secreções do trato respiratório, sendo agentes etiológicos importantes de pneumonias. São microrganismos de grande importância, sendo considerados oportunistas. S. epidermidis, principalmente, vem chamando a atenção por ter desenvolvido estratégias interessantes para conquistar o ambiente hospitalar, com a capacidade de colonizar a superfície inerte de dispositivos médicos invasivos (como cateteres), formando biofilmes, além de carrear diferentes elementos genéticos móveis, estando identificados como os responsáveis pela resistência à oxacilina 16, 2. Daptomicina linezolida e vancomicina são as atuais estratégias para o tratamento da bacteremia e sepse causadas por Staphylococcus resistentes. Contudo, há algumas desvantagens, pela dificuldade destes antimicrobianos em alcançarem a concentração terapêutica nos tecidos atingidos. A linezolida apresenta toxicidade associada ao uso prolongada. A nefrotoxicidade é observada com o uso de vancomicina e daptomicina. A rifampicina também vem se destacando no tratamento de Staphylococcus resistentes, entretanto, a nefrotoxicidade também é um efeito colateral grave a ser analisado durante a escolha farmacoterapêutica 17 . 47 K. pneumoniae (tabela 8), bactéria de grande interesse para infecções hospitalares, particularmente pelo potencial de apresentar ESBLs que causam resistência às cefalosporinas de espectro ampliado, apresentou sensibilidade bastante diversa conforme a unidade hospitalar. Na unidade H1, amicacina, cefepima, ciprofloxacino, ertapenem, gentamicina, imipenem, meropenem, piperacilina + tazobactam e tetraciclina, foram sensíveis em seis ou mais hemoculturas que continham essa enterobacteriácea, com destaque para imipenem e meropenem que foram sensíveis nas 15 hemoculturas de K. pneumoniae realizadas no ano de 2013. Na unidade H2, novamente, imipenem e meropenem destacam-se pela sua alta eficácia antimicrobiana nas culturas dessa unidade, mas também há alta sensibilidade de amicacina, ertapenem, gentamicina e tobramicina no ano de 2012; já no ano de 2014, o antimicrobiano sulfametoxazol + trimetoprima apresenta alta sensibilidade nessas bactérias. As cepas dessa bactéria isoladas na unidade H4 apresentaram alta sensibilidade a todos os antimicrobianos. E. coli é outro bacilo Gram-negativo de grande interesse para infecções hospitalares. Contudo, verifica-se, a partir da tabela 9, que a unidade H4 não realizou um antibiograma dessa bactéria em todo o período de estudo, sendo que, conforme tabela 5, ocorreram 3 hemoculturas positivas com essa bactéria. A sensibilidade desse microrganismo a todos os antimicrobianos investigados foi alta, havendo pouca resistência, sendo que amicacina, ciprofloxacino, ertapenem, imipenem, meropenem, piperacilina + tazobactam e tobramicina foram os mais sensíveis. As bacteremias causadas por K. pneumoniae e E. coli geralmente são oriundas de infecções do trato genitourinário, que frequentemente são tratadas de forma empírica, aumentando a pressão seletiva e a probabilidade de ocorrência de resistência antimicrobiana 18, 16. No presente estudo, os antimicrobianos testados foram mais sensíveis a K. pneumoniae do que em estudo realizado em hospital público do Rio de Janeiro 20 . Entretanto, apesar de algumas cepas serem sensíveis aos antimicrobianos cefepima, ceftriaxona, ceftazidima e ciprofloxacino, os índices de sensibilidade a esses fármacos foram inferiores ao de imipenem, meropenem e tetraciclina, recomendando-se que as unidades hospitalares analisadas investiguem melhor a produção de ESBL pelas cepas de K. pneumoniae que são residentes de suas unidades 13. 48 Os Gram-negativos não-fermentadores A. baumanii e P. aeruginosa são bactérias de grande relevância no estudo epidemiológico das bacteremias e sepses, com grande preocupação por desenvolverem estratégias de resistência a antimicrobianos. A tabela 10 demonstra que as culturas de A. baumanii analisadas apresentaram sensibilidade bastante restrita, com destaque para a polimixina B e a tigeciclina que foram sensíveis nas unidades H2, H3, H4, H5 e H6. Amicacina apresentou média sensibilidade nessas unidades hospitalares. Esse resultado é bastante diverso. Estudo realizado em um hospital de ensino do Estado do Paraná, em que foi encontrado sensibilidade média de 69,07% para amicacina, ampicilina + sulbactam, aztreonam, imipenem, meropenem e piperacilina. O percentual elevado de resistência de A. baumanii aos antimicrobianos carbapenêmicos é preocupante, recomendando-se monitoramento devido à letalidade dos casos 16. P. aeruginosa (tabela 11) apresentou maior sensibilidade que A. baumanii, sendo também mais investigada. Amicacina, aztreonam, cefepima, gentamicina, imipenem, meropenem, piperacilina + tazobactam e tobramicina tiveram sensibilidade em 5 ou mais hemoculturas. A pesquisa de Leiser et al (2007) apresentou resultados semelhantes de sensibilidade antimicrobiana de P. aeruginosa para os antimicrobianos amicacina, aztreonamm, cefepima, gentamicina, imipenem, meropenem e piperacilina 16. Acinetobacter baumanii é frequentemente isolado em pacientes submetidos à ventilação mecânica que desenvolveram pneumonia. Neurocirurgia, traumatismo e aspiração de conteúdo gástrico são fatores de risco para desenvolvimento de infecções causadas por A. baumanii. Já doença pulmonar crônica, ventilação mecânica superior a oito dias, traqueostomia e uso prévio de antimicrobianos são considerados fatores de risco para a infecção pulmonar por Pseudomonas aeruginosa que pode levar a bacteremia e sepse 19 . 49 CONCLUSÃO O presente estudo demonstrou que Staphylococcus aureus e Staphylococcus epidermidis são as bactérias mais prevalentes de hemoculturas de hospitais privados do município de Cascavel – PR. 29 espécies bacterianas foram identificadas em 613 hemoculturas positivas de um total de 5059 hemoculturas solicitadas por seis unidades hospitalares período de janeiro de 2012 a janeiro de 2014. Contudo, verificou-se que a realização de antibiograma não foi feita em todas as hemoculturas positivas, prejudicando um estudo com maior precisão e impacto. O Acinetobacter baumanii foi a que teve maior resistência a antimicrobianos. É necessário uma maior conscientização por parte das equipes de Controle de Infecção Hospitalar dessas unidades da importância da realização de antibiograma, como metodologia para implantação da antibioticoterapia racional com os pacientes, além da avaliação e do monitoramento das medidas de controle de microrganismos aplicadas na unidade hospitalar, bem como na equipe multiprofissional, levando, com isso, a uma diminuição do impacto da resistência antimicrobiana e dos gastos com bacteremia e sepse. 50 AGRADECIMENTOS Os autores gostariam de agradecer a Farmacêutica Denise Indras e ao Laboratório Biovel, estabelecido na cidade de Cascavel-PR, por todos os dados fornecidos para essa pesquisa. 51 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. ARAUJO, M. R. E. Hemocultura: recomendações de coleta, processamento e interpretação dos dados. J Infect Control, v. 1, n. 1, 08 – 19, 2002. 2. CUNHA, M. N.; LINARDI, V. R. Incidência de bacteriemia em um hospital terciário do leste de Minas Gerais. Revista de Medicina de Minas Gerais, v. 23, n. 2, 149 – 153, 2013. 3. BRAZ, D. M. L. Prevalência bacteriana nas hemoculturas do hospital de urgência da Região Sudoeste (HURSO) – GO. Monografia de conclusão de curso de Especialização em Farmácia Clínica e Atenção Farmacêutica, Pontifícia Universidade Católica de Goiás, Goiânia, 24 p, 2013. 4. FREIRE, I. L. S.; OLIVEIRA E ARAUJO, R.; VASCONCELOS, Q. L. D. A. Q.; MENEZES L. C. C.; COSTA, I. K. F.; TORRES, G. V. Perfil microbiológico de sensibilidade bacteriana das hemoculturas de unidade de terapia intensiva pediátrica. Revista de Enfermagem da Universidade Federal de Santa Maria, v. 3, n. 3, 429 – 439, 2013. 5. ALMEIDA NETO, J. A. R. Características das hemoculturas em pacientes internados em um hospital universitário da cidade de Salvador, Bahia, de 2007 a 2011. Monografia de conclusão do curso de Medicina, Faculdade de Medicina da Bahia, Universidade Federal da Bahia. Salvador, 56 p, 2013. 6. REIS, H. P. L. C.; VIEIRA, J. B.; MAGALHÃES, D. P.; SARTORI, D. P.; FONSECA, D. B.; VIANA, J. M.; CUNHA, F. A. Avaliação da resistência microbiana em hospitais privados de Fortaleza – Ceará. Revista Brasileira de Farmácia, v. 94, n. 1, 83 – 87, 2013. 7. DAMASCENO, D. D.; TERRA, F. S.; DUTRA, P. O.; LIBÂNIO, S. I. C. Perfil da incidência bacteriana e resistência antimicrobiana em uma instituição hospitalar. Revista Mineira de Enfermagem, v. 12, n. 1, 104 – 109, 2008. 8. SOUSA, M. A.; MEDEIROS, N. M.; CARNEIRO, J. R.; CARDOSO, A. M. Hemoculturas positivas de pacientes da unidade de terapia intensiva de um hospital escola de Goiânia – GO. Estudos, v. 41, n. 3, 627 – 635, 2014. 9. ALVES, L. N. S.; OLIVEIRA, C. R.; SILVA, L. A. P.; GERVÁSIO, S. M. D.; ALVES, S. R.; SGAVIOLLI, G. M. Hemoculturas: estudo da prevalência dos microrganismos e o perfil de sensibilidade dos anitbióticos utilizados em Unidade de Terapia Intensiva. Journal Health Science Institute, v. 30, n, 1, 44 – 47, 2012. 10. MILLAN, L. S.; BENEDETTE, C. E. M.; MAXIMO, L. Z.; ALMEIDA, P. C. C.; GOMES, D. S.; GEMPERLI, R.; FERREIRA, M. C. Infecções de corrente sanguínea por bactérias multirresistentes em UTI de tratamento de queimados: experiência de quatro anos. Revista Brasileira de Cirurgia Plástica, v. 27, n. 3, 374 – 378, 2012. 11. ANDRADE, D.; LEOPOLDO, V. C.; HAAS, V. J. Ocorrência de bactérias multirresistentes em um centro de terapia intensiva de hospital brasileiro de emergências. Revista Brasileira de Terapia Intensiva, v. 18, n. 1, 27 – 33, 2006. 12. MAGALHÃES, L. S.; ABREU, E. S.; PUSSENTE, C. G.; OLIVEIRA, C. G. A. Incidência e perfil de sensibilidade e resistência das estirpes bacterianas 52 isoladas das hemoculturas de um hospital oncológico. Revista Científica da FAMINAS, v. 10, n. 2, 39 – 53, 2014. 13. BRAOIOS, A. Incidência de Klebsiella pneumoniae e Escherichia coli produtoras de beta-lactamase de espectro estendido (ESBL) em um hospital universitário. Colloquium Vitae, v. 01, n. 2, 109 – 116, 2009. 14. BARBOZA, I. B.; GIOLO, N. L.; REZENDE, C. Pesquisa de bacilos gram negativos não fermentadores isolados de superfícies inanimadas no ambiente hospitalar. NewsLab, edição 121, 74 – 78, 2014. 15. COIMBRA, M. V. S.;COIMBRA FILHO, M. V. S.; LIMA, N. C. Estudo da prevalência e dos índices de resistência microbiana em um hospital público do Rio de Janeiro. Revisa, v. 1, n. 1, 58 – 67, 2012. 16. LEISER, J. J.; TOGNIM, M. C. B.; BEDENDO, J. Infecções hospitalares em um centro de terapia intensiva de um hospital de ensino no Norte do Paraná. Ciências e Cuidado com a Saúde, v. 6, n. 2, 181 – 186, 2007. 17. CORREAL, J. C. D.; MARQUES, E. A.; GUILHERME, W. L.; LEÃO, R. S.; DAMASCO, P. V. Infecções por Staphylococcus aureus: mudança no perfil etiológico no Hospital Universitário Pedro Ernesto. Revista HUPE, v. 12, n. 3, 31 – 46, 2013. 18. SILVEIRA, S. A.; ARAÚJO, M. C.; FONSECA, F. M.; OKURA, M. H.; OLIVEIRA, A. C. S. Prevalência e suscetibilidade bacteriana em infecções do trato urinário de pacientes atendidos no hospital universitário de Uberaba. Revista Brasileira de Análises Clínica, v. 42, n. 3, 157 – 160, 2010. 19. CARRILHO, C. M. D. M.; GRION, C. M. C.; MEDEIROS, E. A. S.; SARIDAKIS, H. O.; BELEI, R.; BONAMETI, A. M.; MATSUO, T. Pneumonia em UTI: incidência, etiologia e mortalidade em hospital universitário. Revista Brasileira de Terapia Intensiva, v. 16, n. 4, 222 – 227, 2004. 53 NORMAS DA REVISTA CIENTÍFICA REVISTA SBIOS – REVISTA DE SAÚDE E BIOLOGIA (Disponível em < http://revista.grupointegrado.br/revista/index.php/sabios2/about/submissions# authorGuidelines>). Diretrizes para Autores Diretrizes para o autor Atenção ao cadastrar os autores. Todos os autores devem ser cadastrados corretamente, com nome, afiliação e endereço para correspondência. Uma vez submetido o artigo, não será possível cadastrar autores adicionais. Please register the authors. All authors must be properly registered, with name, affiliation and correspondence address. Once submitted the article, it will not be possible to register additional authors. Elaboração do artigo Idioma: Serão aceitos artigos escritos em português ou inglês. Formato do arquivo: O artigo deve ser enviado no formato de arquivo do programa Microsoft Office Word. Formatação: O artigo deve conter a seguinte formatação: - Deve ser elaborado em folha tamanho A4 (210 mm x 297 mm), com margens superior e direita de 3 cm e inferior e esquerda de 2 cm. - A fonte deve ser Arial tamanho 12 e espaço entre linhas de 1,5 cm em todo o trabalho. - A numeração das páginas deve figurar no canto superior direito, iniciando pela página de título. - Todas as referências devem ser citadas no texto em formato numérico. - Os títulos das seções devem estar escritos em letra maiúscula, enquanto os subtítulos devem conter apenas as letras iniciais maiúsculas. - Unidades e abreviações: Utilize o Système International (SI) de unidades métricas para as unidades e abreviações de unidades. No texto as abreviações devem ser utilizadas apenas após terem sido citadas por extenso. Apresentação: Deve abranger os seguintes tópicos: -Título (em inglês e português) curto e informativo sem conter abreviações, escrito em letras maiúsculas e negritadas. -Nome(s) completo(s) do(s) autor(es). Todos os nomes devem ser seguidos de números sobrescritos identificando as instituições. - Instituição(ões) de cada autor (Departamento, Faculdade, Universidade)que devem ser antecedidas pelos números indicativos sobrescritos. - Nome, endereço completo para correspondência, incluindo o código postal, o número do telefone, o número do fax e o e-mail do autor para o qual a correspondência deve ser enviada. Esses dados devem ser antecedidos pelo termo: Endereço para correspondência. 54 - Subtítulo a ser utilizado como cabeçalho de página, não deve exceder 40 caracteres. Deve ser antecedido pelo termo: Subtítulo. - Resumo (em inglês e português): deve apresentar claramente os objetivos, a metodologia, os resultados e as conclusões. Sua extensão deve ser de 100 a 250 palavras, ser escrito em parágrafo único (NBR 6028). - Palavras-chave (em inglês e português): indicar de três a cinco palavras-chave que expressem o conteúdo do artigo de forma objetiva. Devem ser antecedidas pelo termo: Palavras-chave. - Texto: deve obedecer aos critérios de cada categoria, de acordo com as instruções disponíveis em foco e escopo. - Agradecimentos: devem ser breves e relacionados a assistência técnica, opiniões, bem como ao apoio financeiro para a pesquisa e bolsas de estudo. Tabelas e Quadros: devem ser inseridos o mais próximo possível do texto em que foram mencionados. O título deve figurar acima da tabela e/ou quadro e ser precedido da palavra Tabela e de seu número de ordem no texto (em algarismos arábicos). As tabelas devem ser compreensíveis e auto-explicativas. As abreviações devem ser definidas nas legendas. Ilustrações e fotos: devem ser inseridas o mais próximo possível do texto em que foram mencionados. O título deve estar localizado abaixo das figuras, precedido da palavra Figura e de seu número de ordem no texto (em algarismos arábicos). Defina todas as abreviações e símbolos usados na figura, mesmo se eles estiverem definidos no texto. As ilustrações e fotos devem ser coladas no texto com resolução de boa qualidade, e também enviadas em arquivos separados, em formato .jpg. As fotomicrografias devem incluir dados sobre a coloração e a ampliação no fim da legenda para cada parte da figura. Uma barra de ampliação deve ser adicionada a cada fotomicrografia. Caso não apareça nenhum marcador com escala na figura, a ampliação original deve ser informada na legenda. Referências: As referências bibliográficas devem ser digitadas em ordem numérica após a seção de agradecimentos. Numere as referências na ordem em que elas são citadas no texto pela primeira vez, usando algarismos arábicos entre parênteses. Duas ou mais referências devem ser separadas por vírgula sem espaço (1,5,7), três ou mais referências consecutivas devem ser separadas por um hífen (4-9) e duas ou mais referências consecutivas devem ser separadas por ponto e vírgula sem espaço (4-9;1316). As referências devem ser elaboradas de acordo com a NBR 6023. Exemplos: -Artigo de Periódico: ABESSA, D.M.S.; SOUSA, E.C.P.M.; TOMMASI, L.R. Utilização de testes de toxicidade na avaliação da qualidade de sedimentos marinhos. Revista de Geologia, Fortaleza, v. 19, n. 2, p. 253-261, jul./dez. 2006. -Livro: TAVARES, M. C. G. C. Imagem corporal: conceito e desenvolvimento. São Paulo: Manole, 2003. Quando existirem mais de três autores, indica-se apenas o primeiro, acrescentando-se a expressão et al. Exemplo: URANI, A. et al. Constituição de uma matriz de contabilidade social para o Brasil. Brasília, DF: IPEA, 1994. -Capítulo de livro com autoria própria: MOREIRA, A. A profissionalização da enfermagem. In: OGUISSO, T. (Org.). Trajetória histórica e legal da enfermagem. São Paulo: Manole, 2005. p. 98119. -Trabalho apresentado em evento: SIMÕES, G. S.; SILVA, J.; TOLEDO, A. S. Micobactérias não tuberculosas isoladas de pacientes com síndrome da imunodeficiência adquirida. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE MICROBIOLOGIA, 17., Santos. Anais... Santos: EDITORA, 1993. p.41. 55 -Teses e Dissertações: SILVA, M.A.B. Sistema de Classificação Fuzzy para áreas contaminadas. 2005. 221f. Tese (Doutorado em Engenharia) Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, 2005. -Documento em meio eletrônico: SLATER, P. J. B.; JOANES, A. E. Timing of songs and distance call learning in zebra finches. Disponível em: <http://journals.ohaiolink.edu/etext/>. Acesso em: 22 jul. 2004. -Artigo ou livro ainda não publicado: Ao citar um artigo ou livro aceito para publicação mas ainda não publicado, inclua todos os dados necessários e ao final da referência escreva entre parênteses, o termo: no prelo. -Comunicações informais (Informação verbal): Mencionar em nota os dados disponíveis, e indicar entre parênteses, a expressão: informação verbal. Article’s Elaboration Language: Articles may be written in Portuguese or English. File format: The article should be sent in Microsoft Office Word file format. Format: The manuscript should contain the following format: -- Must be prepared in A4 size (210mm x 297 mm) paper, with higher and right margins with 3cm, and down and left margins with 2cm. -- Font must be Arial size 12 and 1.5 cm line space in all the manuscript -- Number of pages must appear in the upper right corner, starting for the title page. -- All references should be cited in the text. -- Titles of sections should be written in capital letters, while the subtitles should contain only initial capital letters. --Abbreviations and Units: use the International System of Units (IS) for units and abbreviations of units. Presentation: It should cover the following topics: -- Short and informative title (in English and Portuguese)without abbreviations, written in capital and bold letters -- Complete name(s) of author(s). All names should be followed by overwrite numbers to identify the institutions. -- Institution(s) of each author (Department, College, University, preceded by overwrite indicative numbers. -- Name and full address for correspondence, including zip code, telephone number, number of fax and author’s e-mail to which the correspondence and copies requests should be sent. These data should be followed by the term: Correspondence address. -- Subtitle, used as a header of the page, should not exceed 40 characters. It should be preceded by the word: Subtitle. --Abstract (in English and Portuguese): should show clearly the objectives, methodology, results and conclusions. It should contains from 100 to 250 words and be written in single paragraph with simple space between lines (NBR 6028). 56 --Keywords (in English and Portuguese): from three to five keywords that clearly express the article’s content. They should be followed by the term: Keywords. --Text: should meet the criteria for each category, according to the instructions available in focus and scope. --Acknowledgements: They should be brief and related to technical assistance, opinions, as well as to research financial support and study grants. Tables and charts: should be inserted as close as possible of the text in which they were mentioned. Title should appear above the table and/or chart. It should be preceded by the word Table and by its sequential number in the text (Arabic numerals). Tables should be understandable and self-explanatory. Abbreviations should be defined on subtitles. llustrations and photos: should be inserted as close as possible to text in which they were mentioned. The title should be placed below the figures, preceded by the word Figure and its sequential number in the text (Arabic numerals). Abbreviations and symbols should be defined even if they are explained in text. Illustrations and photos should be pasted into text with good quality resolution, and they should also be sent in separate files, in .jpg. format. Photomicrographs should include data about stain technique and amplification at the end of legend to each part of the picture. A scale bar should be added to each photomicrograph. If any scaled marker does not appear in the picture, the original magnification should be informed in legend. References: The references should be typed into numerical order after the Acknowledgements section. Number the references in the order in which they are cited by the first time in the text. Use Arabic numerals. Two or more references should be separated by comma without space (1,5,7), three or more consecutive references should be separated by a hyphen (4-9) and two or more consecutive references should be separated by a semicolon without space (4-9;13-16). References should be organized according to NBR 6023. Examples: Periodic’s Article: ABESSA, D.M.S.; SOUSA, E.C.P.M.; TOMMASI, L.R. Utilização de testes de toxicidade na avaliação da qualidade de sedimentos marinhos. Revista de Geologia, Fortaleza, v. 19, n. 2, p. 253-261, jul./dez. 2006. Book: TAVARES, M. C. G. C. Imagem corporal: conceito e desenvolvimento. São Paulo: Manole, 2003. For more than 3 authors: URANI, A. et al. Constituição de uma matriz de contabilidade social para o Brasil. Brasília, DF: IPEA, 1994. Book chapter with proper authorship: MOREIRA, A. A profissionalização da enfermagem. In: OGUISSO, T. (Org.). Trajetória histórica e legal da enfermagem. São Paulo: Manole, 2005. p. 98-119. Work presented in event: SIMÕES, G. S.; SILVA, J.; TOLEDO, A. S. Micobactérias não tuberculosas isoladas de pacientes com síndrome da imunodeficiência adquirida. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE MICROBIOLOGIA, 17., Santos. Anais... Santos: EDITORA, 1993. p.41. Thesis: SILVA, M.A.B. Sistema de Classificação Fuzzy para áreas contaminadas. 2005. 221f. Tese (Doutorado em Engenharia) Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, 2005. Document in electronic way: 57 SLATER, P. J. B.; JOANES, A. E. Timing of songs and distance call learning in zebra finches. Disponível em: <http://journals.ohaiolink.edu/etext/>. Acesso em: 22 jul. 2004. Article or book not published yet: To cite an article or book accepted for publication but not published yet, you should include all necessary data and write at the end of the reference between parentheses, the term: in press. Informal communications (verbal information): Mention available data in note, and indicate between parentheses, the expression: verbal information. Condições para submissão Como parte do processo de submissão, os autores são obrigados a verificar a conformidade da submissão em relação a todos os itens listados a seguir. As submissões que não estiverem de acordo com as normas serão devolvidas aos autores. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Termo de Responsabilidade para Submissão de Artigo: O autor compromete-se de que o artigo enviado para avaliação é inédito, e não será submetido à outra revista durante o processo de análise e em caso de deferimento para a publicação. Os direitos autorais do artigo, caso publicado, ficam automaticamente cedidos à SaBios - Revista de Saúde e Biologia que está autorizada a publicá-lo em meio impresso, digital, ou outro existente, sem retribuição financeira para os autores. Responsibility Term for Article’s Submission: The author undertakes that article sent for evaluation is unprecedented, and that it will not be submitted to another journal during the review process and in case of publication is accepted. The article’s copyright, if it is published, are automatically transferred to SaBios - Revista de Saúde e Biologia which is authorized to publish it in printed, digital or other existing way, without financial reward to authors. Formato do arquivo: O autor deve certificar-se de que o artigo será enviado no formato de arquivo do programa Microsoft Office Word. File format: The author should make sure that the article will be sent in the Microsoft Office Word file format program. Formatação: O autor deve certificar-se de que a formatação do artigo foi realizada conforme descrito em diretrizes para o autor, encontradas na seção "Sobre". Formation: The author should make sure that the article’s formation was performed as described in guidelines to author, found in "About" section. Os trabalhos serão publicados na ordem de aceitação e não de seu recebimento pela revista. O artigo será avaliado pelo corpo editorial da revista e submetido para avaliação à dois membros do corpo editorial de localidades diferentes. Após o recebimento do artigo pela revista, o autor poderá acompanhar o trâmite do mesmo pelo endereço eletrônico da revista. Articles will be published in order of acceptance rather than its receipt by the journal. The article will be evaluated by the magazine's editorial board and submitted to evaluation of two members of editorial board from different locations. Author may monitor the process at the same journal’s electronic address. Todos os endereços "URL" no texto (ex.: http://pkp.ubc.ca) devem estar ativos. All "URL" addresses (e.g.: http://pkp.ubc.ca) should be active. Atenção ao cadastrar os autores. Todos os autores devem ser cadastrados corretamente, com nome, filiação e endereço para correspondência. Uma vez submetido o artigo, não será possível cadastrar autores adicionais. Attention when registering authors. All authors should be properly registered, with name, affiliation and address for correspondence. Once submitted the article, it will not be possible to register additional authors. Os Artigos submetidos por alunos (graduação, especialização, mestrado e doutorado) devem obrigatoriamente possuir a co-autoria de um professor orientador, responsável pela coordenação da pesquisa realizada. The articles submitted by students (graduate, specialization, master's and doctoral) must have the co-authors of a teacher advisor. 58 8. Todos os autores devem estar cientes e de acordo com a submissão do artigo para SaBiosRevista de Saúde e Biologia. All authors must be aware and in accordance with the submission of the article to SaBios-Revista de Saúde e Biologia. Declaração de Direito Autoral Direitos Autorais para artigos publicados nesta revista são cedidos pelo autor à SaBios-Revista de Saúde e Biologia, que está autorizada a publicá-lo em meio impresso, digital, ou outro existente, sem retribuição financeira para os autores. Em virtude da aparecerem nesta revista de acesso público, os artigos são de uso gratuito, com atribuições próprias, em aplicações educacionais e não-comerciais. Copyright of articles published in this journal are transferred by the author to SaBios-Journal of Health and Biology, which is authorized to publish them in printed, digital or other existing way, without financial reward for authors. Considering that articles appear in this public accessed journal, they are free to be used in educational and non-commercial applications. Política de Privacidade Os nomes e os e-mails submetidos para esta revista, serão utilizados exclusivamente para os fins de publicação. Names and e-mails submitted to the journal, will be used exclusively for publication’s purpose.