30/03/2010 Disciplina Biologia Molecular Profª Cristina Lacerda Soares Petrarolha Silva Curso de Biotecnologia FISMA / FEA Cálculo de Similaridade Genética pelo Índice de Jaccard e Construção de Dendrograma pelo Método Bio Mol Profª Cristina 1 30/03/2010 • O objetivo do uso de dissimilaridades genéticas é representar o grau de divergência genética entre diferentes populações ou indivíduos. • Emprega-se marcadores moleculares Bio Mol Profª Cristina Bio Mol Profª Cristina 2 30/03/2010 Introdução • Conceito de Marcador Dominante • Exemplos de Marcadores Dominantes: – Marcadores RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA): • são fragmentos de DNA obtidos pela amplificação via PCR de DNA genômico com um único primer de seqüência arbitrária - Marcadores AFLP (Restriction fragment length polymorphism) Bio Mol Profª Cristina Exemplos http://www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/genome/probe/doc/TechRAPD.shtml Bio Mol Profª Cristina 3 30/03/2010 Marcador Codominante X Marcador Dominante Fonte: http://www.cenargen.embrapa.br/publica/trabalhos/marcadores/arquivos/file018.pdf Bio Mol Profª Cristina Índices de Similaridade • Dentre as medidas de similaridade e dissimilaridade, empregadas em marcadores dominantes, uma das principais é a de JACCARD: SJ= a/(a+b+c) Onde: a= presença de banda em ambos indivíduos (11) b = presença de banda em um indivíduo e ausência no outro (1 0) c = ausência de banda em um indivíduo e presença no outro (0 1) d= ausência de banda em ambos indivíduos (00) Bio Mol Profª Cristina 4 30/03/2010 Exemplos: Bio Mol Profª Cristina Fonte: ZUCCHI MI Bio Mol Profª Cristina Fonte: ZUCCHI MI 5 30/03/2010 Bio Mol Profª Cristina Fonte: ZUCCHI MI Análise de Agrupamento: Construção de dendrMograma • Esta análise é utilizada para verificar a formação de grupos de similaridade genética de individuo dentro de uma população ou de populações dentro de espécie dentro de uma espécie. • A análise é apresentada na forma gráfica denominada dendrograma. Bio Mol Profª Cristina 6 30/03/2010 Exemplo Bio Mol Profª Cristina Método Hierárquico aglomerativo “UPGM” – distância média não ponderada ETAPAS: 1. Calcula-se o Índice de Jaccard para todos os pares de indivíduos. 2. Dispõem-se os valores do Índice de Jaccard em um diagrama de “trellis” 3. Transformam-se os coeficientes de similaridade em coeficientes de dissimilaridade subtraindo-se cada valor de 1 (DIJ =1-SIJ). 4. Calcula-se a similaridade entre os grupos já formados e os outros indivíduos a entrarem no grupo. Bio Mol Profª Cristina 7 30/03/2010 Exemplo: Etapa 1 Bandas Indivíduos Bio Mol Profª Cristina Exemplo: Etapa 2 Similaridade de Jaccard Indivíduos Indivíduos Dissimilaridade de Jaccard Etapa 3 • Escolhe-se o par que apresenta o menor índice de dissimilaridade Bio Mol Profª Cristina 8 30/03/2010 Exemplo: Etapa 4 Bio Mol Profª Cristina Exemplo: Etapa 5 • Determinam-se quais dos indivíduos ou pares de indivíduos restantes possuem a menor dissimilaridade média com o par de espécies 4 – 5 ou uma com a outra. Bio Mol Profª Cristina 9 30/03/2010 Exemplo: Etapa 6 • Agrupam-se os indivíduos 2 e 3 no nível 0,30 Bio Mol Profª Cristina Exemplo: Etapa 7 • Determina-se em que nível o indivíduo restante (no caso o ind 1) se liga ao grupo 2 – 3 ou 4 – 5, • e determina-se em que nível o grupo 2 – 3 se liga ao grupo 4 – 5. • Conecta-se o grupo 2 – 3 ao grupo 4 – 5 no nível 0,60. Bio Mol Profª Cristina 10 30/03/2010 Exemplo: Etapa 8 • Liga-se a espécie restante aos grupos já formados no menor nível calculado. Bio Mol Profª Cristina Fontes • GOMES AS, FERREIRA SP Apostila de Análise de Dados Ecológicos. 30p. 2004. Disponível em: http://www.uff.br/ecosed/apostila.pdf • ZUCCHI MI Introdução à biometria de marcadores genéticos aplicados a genética de populações. • COELHO AS Análise genética de populações utilizando marcadores moleculares. Disponível em: http://www.cenargen.embrapa.br/publica/trabalhos/ marcadores/arquivos/file018.pdf Bio Mol Profª Cristina 11