ANTI – HUMANO Anti – IgG Anti – C3d Poliespecífico

ANTI – HUMANO
Anti – IgG
Anti – C3d
Poliespecífico
PROTHEMO
Produtos Hemoterápicos Ltda.
PARA TESTES EM
LÂMINA OU TUBO
SOMENTE PARA
USO DIAGNÓSTICO
“IN VITRO”
Conservar entre: 2º e 8ºC
Não congelar
Conservante: Azida de Sódio 0,1 %
Responsável Técnico:
Janaina Martins
CRF: 30.331
PRINCÍPIO DO TESTE
O Soro Anti-Humano “PROTHEMO”, também conhecido como Soro
Antiglobulina de largo espectro, é empregado na pesquisa de
anticorpos adsorvidos às hemácias humanas. Os anticorpos dos
grupos sangüíneos, na sua maioria, são gamaglobulinas. Entretanto,
alguns são mais bem detectados pela propriedade de fixar frações do
complemento ao reagirem com o antígeno correspondente (tais como
alguns anticorpos dos Sistemas Kidd e Lewis).
DESCRIÇÃO DO PRODUTO
O Soro Anti-Humano “PROTHEMO” é preparado a partir de soro de
coelhos e/ou cabras imunizados com uma fração específica do plasma
humano, para a produção de anticorpos contra as gamaglobulinas e
componentes do complemento.
O diluente do reagente contém: Cloreto de Sódio, Albumina Bovina,
Tampão Fosfato, Potencializadores e Azida de Sódio a 0,1%.
O reagente foi otimizado para ser utilizado como fornecido, sem adições
ou diluições.
O produto é fornecido em frascos de 10 ml, acompanhados de contagotas.
Cada gota equivale a 50 l.
SORO ANTI-HUMANO “PROTHEMO”
Anti-IgG e Anti-C3d - Poliespecífico
Código
Embalagem
1062
10 ml
1063
5x10 ml
MATERIAIS NECESSÁRIOS NÃO FORNECIDOS
- Teste em Lâmina: lâminas de vidro, pipetas Pasteur e solução salina à
0,9%.
- Teste em Tubo: tubos de vidro (10x75mm ou 12 x 75 mm), pipetas
Pasteur, Banho-Maria à 37ºC, centrífuga e solução salina à 0,9%.
ARMAZENAMENTO E PRECAUÇÕES
Conservar em geladeira entre 2º e 8ºC. Não congelar ou expor o produto a
temperaturas elevadas. Não utilizar após o vencimento.
Não utilizar o produto se observar nítida turvação, o que pode indicar
contaminação bacteriana ou deterioração do produto.
Evitar a contaminação do reagente. Não reutilizar frascos vazios.
SOMENTE PARA USO DIAGNÓSTICO “IN VITRO”
Os materiais de origem biológica devem ser considerados como se fossem
“potencialmente infectantes”. Devem ser estabelecidos métodos
adequados para o manuseio e descarte equivalente aos utilizados para as
amostras de sangue.
O não seguimento das instruções de uso pode resultar em diminuição da
performance ótima do produto.
COLETA DA AMOSTRA
O sangue deve ser coletado por procedimento asséptico aprovado, com
ou sem adição de anticoagulante.
As hemácias obtidas de coágulo podem ser utilizadas em até 5 dias
após sangria. As amostras coletadas em EDTA ou Heparina devem ser
utilizadas em até 48 horas. Se a demora para a execução do teste for
inevitável, hemácias de sangue coagulado e as colhidas em EDTA ou
Heparina devem ser separadas do soro/plasma, lavadas e
ressuspendidas em solução preservativa de glóbulos. Estocar a 2º a 8°C
por no máximo, 20 dias.
O sangue coletado em anticoagulante ACD, CPD e CPDA-1 pode ser
utilizado até a data de expiração, se armazenado entre 2º a 8ºC.
O armazenamento prolongado de hemácias antes da execução do teste
pode causar deterioração dos antígenos e resultar em reações mais
fracas.
TESTE DE COOMBS DIRETO OU TESTE DA ANTIGLOBULINA
DIRETO
APLICAÇÕES:
Na pesquisa de anticorpos já fixados às hemácias, como ocorre em:
- Doença Hemolítica do Recém-Nascido
- Anemia Hemolítica Adquirida Autoimune
- Pacientes que tenham recebido transfusões incompatíveis.
PROCEDIMENTO DO TESTE
1.
Colocar em um tubo de hemólise uma gota de suspensão a
5% de hemácias do paciente previamente preparadas em solução
salina à 0,9%.
2.
Lavar as hemácias do tubo por três vezes com solução salina à
0,9%, secando bem as bordas do tubo na última lavagem, para retirar
toda a solução.
3.
Acrescentar duas gotas de Soro Anti-Humano “Prothemo”.
Misturar bem.
4.
Centrifugar imediatamente a 3 400 rpm por 15 segundos.
5.
Agitar suavemente o tubo para pesquisar a presença ou não de
aglutinação.
INTERPRETAÇÃO
Teste da Antiglobulina Direto (Coombs
Direto)
Aglutinação
Positivo
Ausência de aglutinação
Negativo
TESTE DE COOMBS INDIRETO OU TESTE DA ANTIGLOBULINA
INDIRETO
APLICAÇÕES:
- Provas de compatibilidade pré-transfusional
- Pesquisa de anticorpos no soro de gestantes
- Identificação de anticorpos utilizando hemácias com antígenos
conhecidos
- Titulação de anticorpos
- Pesquisa de variantes fracas do antígeno D (DU).
PROCEDIMENTO DO TESTE
1- Colocar em um tubo de hemólise uma gota de suspensão de
hemácias a 5% escolhidas para o teste, previamente preparadas
em solução salina à 0,9%.
2 - Adicionar duas gotas de soro a ser testado.
3 - Acrescentar duas gotas de Albumina Bovina a 22% “Prothemo”.
Misturar bem.
4 - Incubar o tubo em Banho-Maria durante 15-30 minutos a 37ºC.
5 - Lavar as hemácias do tubo por três vezes com solução salina à 0,9%
secando bem as bordas do tubo na última lavagem para retirar toda a
solução.
6 - Acrescentar duas gotas do Soro Anti-Humano “Prothemo”. Misturar
bem.
7 - Centrifugar imediatamente a 3 400 rpm por 15 segundos.
8 - Agitar suavemente o tubo para pesquisar a presença ou não de
aglutinação.
INTERPRETAÇÃO
Teste da Antiglobulina Indireto
(Coombs Indireto)
Aglutinação
Positivo
Ausência de
Negativo
aglutinação
CONTROLES POSITIVO E NEGATIVO
PARA O TESTE DA ANTIGLOBULINA INDIRETO
Na execução do Teste da Antiglobulina Indireto é de primordial
importância realizar em paralelo os controles Positivo e Negativo.
1. Colocar em dois tubos de hemólise uma gota de suspensão a 5%
de hemácias O Rh positivo, previamente preparadas em solução
salina à 0,9%. Identificá-los.
2. Adicionar ao tubo Controle Negativo uma gota de solução salina à
0,9% e ao tubo Controle Positivo, uma gota de Soro Anti-D
“Prothemo”.
3. Executar o mesmo procedimento técnico descrito para o Teste de
Coombs Indireto a partir do item n.o3.
PROVA DE COMPATIBILIDADE “MAIOR” PRÉ-TRANSFUSIONAL
A prova de compatibilidade “Maior” Pré-Transfusional é um método
eficaz e oferece a máxima segurança ao receptor, protegendo-o contra
uma reação transfusional e assegurando o aproveitamento da transfusão
recebida. As hemácias do doador são colocadas em presença do soro do
receptor
Esta prova permite revelar a existência de anticorpos de diferentes
grupos sangüíneos, os quais poderiam destruir as hemácias
transfundidas.
PROCEDIMENTO
1 - Pesquisa de anticorpos salinos (à temperatura ambiente)
- Em um tubo de hemólise colocar duas gotas de soro do receptor.
- Adicionar uma gota de suspensão a 5% de hemácias do doador em
solução salina à 0,9%.
- Centrifugar a 3 400 rpm por 15 segundos.
- Ressuspender as hemácias, agitando o tubo e examinar a presença
ou não de aglutinação e/ou hemólise.
- Registrar o resultado
2 - Pesquisa de anticorpos albuminosos (à temperatura ambiente)
- Adicionar ao mesmo tubo, duas gotas de Albumina Bovina à 22%
“Prothemo”.
- Centrifugar a 3 400 rpm por 15 segundos.
- Ressuspender as hemácias, agitando suavemente o tubo e examinar
a presença ou não de aglutinação e/ou hemólise.
- Registrar o resultado.
3 - Pesquisa de anticorpos albuminosos (à temperatura de 37ºC)
- Incubar o tubo em Banho-Maria durante 15-30 minutos à 37ºC.
- Centrifugar a 3 400 rpm por 15 segundos.
- Ressuspender as hemácias, agitando suavemente o tubo e examinar
a presença ou não de aglutinação e/ou hemólise.
- Registrar o resultado.
4 – Pesquisa de anticorpos bloqueadores.
- Lavar as hemácias do tubo por três vezes com solução salina à
0,9%.
- Desprezar o sobrenadante, secando as bordas do tubo na última
lavagem para retirar toda a solução.
- Acrescentar duas gotas do Soro Anti-Humano “Prothemo”. Misturar
bem.
- Centrifugar a 3 400 rpm por 15 segundos.
- Agitar suavemente o tubo para pesquisar a presença ou não de
aglutinação.
INTERPRETAÇÃO:
Se não ocorrer aglutinação em todas as fases do teste, o sangue pode ser
considerado compatível.
PROVA DE COMPATIBILIDADE “MENOR” PRÉ-TRANSFUSIONAL
Este teste vem complementar a prova anterior e tem como objetivo
detectar anticorpos presentes no plasma do doador, os quais, se
transfundidos, poderiam causar destruição dos glóbulos do receptor.
PROCEDIMENTO
Executar o mesmo procedimento para o Teste de Compatibilidade
“Maior” Pré-transfusional, com as seguintes alterações:
- Usar duas gotas de soro do doador.
- Usar suspensão de hemácias à 5% de glóbulos do receptor em solução
salina à 0,9%.
LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO TÉCNICO
I – Resultados FALSO-NEGATIVOS podem ocorrer:
1. Se as hemácias não forem apropriadamente lavadas ou se na vidraria
utilizada restarem traços de globulinas humanas.
2. Se a incubação for inadequada.
3. Se o reagente antiglobulina perdeu sua reatividade, por conservação
inadequada, ou se as hemácias utilizadas estiverem deterioradas.
4. Se o Soro Anti-Humano foi omitido durante o teste.
II – Resultados FALSO-POSITIVOS podem ocorrer:
1. Quando o soro, as hemácias e o Soro Anti-Humano estiverem
excessivamente frios, detectando a presença de aglutininas frias.
2. Se a centrifugação for excessiva.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1-Walker Rh, ed. Technical Manual. 11th Edition. Bethesda: AABB, 1993.
2-Race R.R and Sanger R. Blood Groups in Man, 6th Edition Oxford
Blackwell Scientific Publishers,1975.
3-Mollison PL. Blood Transfusion in Clinical Medicine. 7th Edition. Oxford
Blackwell Scientific, 1983.
4-Guidelines for the Blood Transfusion Service H.M.S.O.
GARANTIA
Este produto é garantido por Prothemo Produtos Hemoterápicos Ltda
durante o prazo de validade indicado no rótulo se conservado e utilizado
segundo as instruções recomendadas.
PROTHEMO PRODUTOS HEMOTERÁPICOS LTDA.
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Data da edição: Nov/2009