Modelo Resumo
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Aedes Test Alunos: Gabriella Arienne Alves Santana Orientador: Renata Soares Alves Escola: Miguel Couto Rua Sebastião Herculano de Matos, 131-Nova Iguaçu-CEP- 26255-220 e-mail: [email protected] Resumo O Brasil está sofrendo uma epidemia causada pelo mosquito Aedes aegypti que está transmitindo diversos vírus que estão sendo investigados por causar doenças como a dengue, a zika e a chikungunya e posteriormente podendo causar até microcefalia e a síndrome de Guillain- Barrée , Os sintomas das doenças são muito parecidos e muitas vezes seus diagnósticos são confundidos. Foram descobertos vestígios desses vírus na urina ,na saliva e em outras secreções com potencial infeccioso .Diante dessa situação a rápidez e precisão no diagnóstico ajudam no tratamento adequado do paciente, Criei um protótipo feito basicamente de plástico reciclável, papel absovente, e corante insolúvel para diagnóstico rápido,simultâneo,não invasivo,indolor e acessível economicamente desses vírus através da urina.Ao entrar em contato com o papel absorvente impregnado de anticorpos monoclonais conjugados ao corante insolúvel o antígeno reage com essas substâncias revelando a variação de cor .Ao aglomerar-se com a interação antígeno-anticorpo as moléculas de ouro coloidal sofrem uma mudança de cor como não tive acesso aos vírus e anticorpos, pude evidenciar isso através da adição de de cloreto de sódio (NaCl) à uma solução de ouro coloidal , a adição de eletrólitos como o sal cloreto de sódio na solução coloidal de nanopartículas de ouro, ocasiona uma mudança na força iônica do meio reacional, diminuindo as forças eletrostáticas repulsivas feitas pela camada de íons boroidreto e, por conseguinte, possibilitando a agregação das nanopartículas o que causa a mudança de cor. A partir disso pude prever que ao colocar anticorpos monoclonais para cada suposto vírus a ser detectado na urina, ao entrar em contato com esse vírus o anticorpo irá reagir aglomerando-se com o antígeno e mostrando a alteração de sua cor indicando um resultado positivo.É importante ressaltar que todo o processo aconteceria na fita que tem o modelo semelhante à usada em exames de urianálise. Palavras chave: Diagnóstico. Teste. Vírus. Introdução A epidemia das doenças causadas pelo mosquito Aedes aegypti tem agravado o sistema de saúde Brasileiro que está sobrecarregado, diante desse fato os médicos tem acelerado o tempo de consulta e o diagnóstico não está sendo preciso, dentre os motivos está a grande semelhança dos sintomas causados pelo mosquito , o alto custo do exame e o grande número de pessoas esperando atendimento. Os atuais testes para diagnóstico dessas doenças não são indolores , são demorados e caros, esses fatores agravam a situação já que a doença agora pode ser transmitida por secreções e vem deixando sequelas graves. Objetivo O objetivo do projeto é a construção de um teste rápido, barato, acessível, e prático que visa a identificar 3 vírus simultaneamente e ajudar a combater no controle das doenças, com rapidez no atendimento evitando imensas filas nos hospitais e diagnóstico preciso para facilitar o trabalho do médico para receitar um tratamento adequado ao paciente e realizar as devidas recomendações em determinados casos, como evitar contato direto com grávidas, isolar talheres para conter a transmissão da doença pela saliva, evitar relações sexuais sem o uso do preservativo mesmo após o período de manifestação da doença. O teste é uma ótima alternativa para evitar que a doença continue se dissipando pelo Brasil , e uma ótima alternativa para ser usada em aeroportos para conter a disseminação no exterior. Materiais e Métodos Este Uma reação de antígeno-anticorpo é marcada pela aglomeração das moléculas. Em um teste imunocromático um anticorpo específico acoplado ao ouro coloidal ao entrar em contato com uma substância contendo o antígeno específico para o anticorpo selecionado revela a alteração da cor causada pela reação dessas duas moléculas que resulta no crescimento e aglomeração das mesmas. Devido a falta de acesso à um laboratório com equipamentos e recursos adequados provei que ao aglomerar-se as moléculas de ouro coloidal sofrem uma mudança de cor, isso foi evidenciado através da adição de de cloreto de sódio (NaCl) á uma solução de ouro coloidal , a adição de eletrólitos como o sal cloreto de sódio na solução coloidal de nanopartículas de ouro, ocasiona uma mudança na força iônica do meio reacional, diminuindo as forças eletrostáticas repulsivas feitas pela camada de íons boroidreto e, por conseguinte, possibilitando a agregação das nanopartículas que causa a mudança de cor. Em dois recipientes esterelizados foram colocados aproximadamente 20ml de ouro coloidal vermelho rubi ,usando luvas esterelizadas, foi acrescentado 2,0 grama de cloreto de sódio (NaCl) em um dos recipientes após alguns segundos já foi possível verificar a modificação da cor como mostrado no vídeo: Meu experimento comprova que quando o líquido (urina) compondo o suposto antígeno fosse pipetado em uma das três almofadas contendo anticorpos monoclonais diferentes e específicos para cada doença acoplados ao ouro coloidal do meu teste, havendo a presença de uma das doença em uma das "almofadas" de papel absorvente esse contato resultaria em uma reação onde ocorreria a aglomeração de moléculas e posteriormente o escurecimento do ouro coloidal na almofada que será exclusiva de uma doença característica, revelando a doença presente no organismo. Todo esse processo resultaria em um diagnóstico simultâneo para essas doenças Resultados e Discussão Após a adição de cloreto de sódio à solução de ouro coloidal foi possível perceber em apenas 1 minuto a alternância da cor da solução, provando que de fato a reação das moléculas causada por uma reação que provoca aglomeração delas implica em uma mudança de cor quando ao menos uma das substâncias que supostamente ira reagir com a outra está acoplada ao ouro coloidal, a partir disso pude prever que ao colocar um anticorpo monoclonal para cada suposto vírus a ser detectado ao entrar em contato com esse vírus o anticorpo irá reagir aglomerandose com o antígeno e mostrando a alteração de sua cor indicando um resultado positivo, as outras duas almofadas que não reagiram portanto permanecem com sua cor e marcam um resultado negativo, o meu teste apresenta inúmeras vantagens em relação aos já existentes e utilizados. Segue a tabela com a comparação com os outros testes e a imagem com o ouro coloidal com o sal (à esquerda) e sem (à direita). Comparação com outros testes TESTE TEMPO DE CUSTO INVASIVO Máximo de 5 Aproximada Não INDOLOR Sim minutos mente Não Não Não Não DIAGNÓSTI CO Aedes test R$15,00 PCR Em torno de Aproximada 30 minutos mente R$1000,00 Sorologia A partir de 20 minutos R$ 300,00 Ouro coloidal com moléculas aglomeradas e não aglomeradas Conclusões Ao promover uma reação de aglomeração entre o sal (NaCl) e o ouro coloidal consegui obter uma mudança de cor devido a adição de eletrólitos como o sal cloreto de sódio na solução coloidal de nanopartículas de ouro, ocasiona uma mudança na força iônica do meio reacional, diminuindo as forças eletrostáticas repulsivas e por conseguinte, possibilitando a agregação das nanopartículas que causa a mudança de cor . Em uma relação em que o anticorpo é específico para o antígeno acontece uma reação de aglomeração assim como aconteceu com o ouro coloidal e o sal, infelizmente essa reação não pode ser vista claramente a olho nu porém com a ajuda do ouro coloidal que muda a sua cor quando há uma relação de agrupamento na reação isso se torna possível. Através da comprovação da mudança de cor vista em minha experiência pude verificar que mesmo não possuindo a maioria dos elementos necessários comprovei o mecanismo principal que envolve meu protótipo, a cromatografia. Acredito que meu protótipo tem grandes chances de funcionar visto que existem outros testes que usam o mesmo método de diagnóstico, meu projeto é um aprimoramento de uma técnica já existente e já usada, porém reconheço que o teste ainda precisa passar por pesquisas laboratoriais mais complexas ( às quais infelizmente não tive acesso) O efeito que meu trabalho gerará é de escala mundial visto que é uma técnica que pode ser usada não só para os vírus do Aedes Aegypti mas sim para inúmeras doenças que possuem sintomas parecidos e necessitam de tratamento específico, minha ideia é que o Aedes Test possa ser usado não somente em hospitais mas que também possa ser vendido em farmácias para que pessoas com suspeita da doença possam evitar contato direto (relações sexuais, compartilhamento de talheres) com mulheres grávidas e busquem logo em seguida por atendimento médico, a ideia é controlar o número de sequelas através de um diagnóstico, rápido, acessível, não invasivo, indolor e simultâneo das doenças, além de diminuir a espera por atendimento pela metade com um diagnóstico muito mais preciso e fazer a utilização de um material reutilizável barateando o teste. Meus resultados e minhas pesquisas me ajudaram a despertar a sede por procurar soluções para problemas que estão ao nosso redor e que na maioria das vezes achamos que não podemos fazer nada a respeito, hoje vejo que o Aedes Test é só o começo de uma longa jornada de esforço e trabalho duro em busca de aprimoramento e solução para problemas Agradecimentos Gostaria de deixar aqui os meus agradecimentos aos meus pais e minha irmã por me apoiarem e acreditarem em mim nas dezenas de vezes em que nem eu acreditei que fosse capaz, mesmo sem entender muita coisa sobre meu projeto e por me mostrarem a tamanha transformação que só a educação pode realizar, à alguns professores que despertaram um lado meu que até então estava esquecido, , á todos os jovens cientistas que me serviram de exemplo e indiretamente me deram força para continuar na tortuosa porém gratificante busca pelo conhecimento, á todas as mulheres que batalharam para que hoje possamos ter voz e liberdade para escolher nossos próprios caminhos, á população do meu país que me deu inspiração para tentar amenizar os efeitos de um problema que tem abalado milhares de famílias e deixado sequelas graves e permanentes, á todas as pessoas que transmitiram um pouco de seu conhecimento na internet que foi minha unica fonte de pesquisa, à todos os "nãos" que recebi durante a realização do projeto que só me ajudaram a batalhar pelos meus sonhos e pelo o que acredito. Referências Insira no mínimo 3 (três) referências, preferencialmente livros ou artigos científicos, utilizadas para a elaboração do trabalho, com alinhamento à esquerda, sem recuo de parágrafo, com espaçamento simples entre linhas e separadas entre si por linha em branco em espaço 1,5, fonte Times New Roman 12 regular. Devem ser listadas as referências em ordem alfabética do sobrenome, pelo primeiro autor. Dois ou mais autores, separar por ponto e vírgula. Os títulos dos periódicos não devem ser abreviados. Recomenda-se seguir as normas vigentes da Associação Brasileira de Normas Técnicas – ABNT (NBR 6023: 2002). Nome do livro ou do periódico devem estar grafados em itálico. Em caso de texto de internet, o título do texto deve estar em itálico. Biomedicina Padrão imunocromatografia http://www.biomedicinapadrao.com.br/2012/06/imunocromatogr afia.htmlhttp://www.biomedicinapadrao.com.br/2012/06/imunocromatografia.htmlh Wikipédia Urianálise https://pt.wikipedia.org/wiki/Uran%C3%A1lise Naturals Brazil Estabilidade das particulas de ouro https://naturalsbrazil.wordpress.com/2014/08/31/estabilidade-das-particulas-de-ouro- .
