Propriedades físico-químicas dos ácidos nucleicos

Propriedades físico-químicas
dos ácidos nucleicos
Desnaturação
• térmica
• variações da constante dielétrica
• variações extremas de pH
Desnaturação térmica
Conseqüencias
• perda da viscosidade
• aumento da absorbância da luz UV
• aumento dos coeficientes de sedimentação
Efeito hipercrômico
Composição em bases
Temperatura Média de Fusão
DNA bacteriano
DNA viral
Centrifugação em gradiente de
densidade
• cloreto de césio – 8 M
• sacarose (gradientes pré-construídos)
– 20 a 30 %
– 25 a 35 %
– etc
Eletroforese
• migração de partículas é dependente de:
– carga elétrica
– tamanho das partículas
– formato das partículas
Migração eletroforética
Hibridização molecular
• pareamento de bases entre cadeias
– DNA/DNA
– DNA/RNA
Hibridização Molecular
Decorrências:
• Análise genética visando o conhecimento
do grau de homologia entre amostras de
ácidos nucleicos
• Construção de sondas moleculares que
permitam a identificação de regiões
específicas do genoma
Aplicações práticas:
• determinação de paternidade
• estudos filogenia molecular
Teste do DNA