AULA 02: Morfologia da célula procariótica
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4/3/2010 Microbiologia Básica Objetivos AULA 02: Morfologia da célula procariótica Professor Luiz Felipe Leomil Coelho Departamento de Ciências Biológicas E-mail: [email protected] Caracterização dos microrganismos Macroscópico Associar os métodos citados nesta aula com as estratégias de identificação de bactérias Associar as diferentes estruturas da célula procariótica com suas respectivas funções Caracterização dos microrganismos Quem está causando a doença? Microscópico B A Caracterização dos microrganismos Amostra A amostra deve ser coletada de forma asséptica e no local mais provável de conter o microrganismo a ser estudado Vários tipos de Microrganismos (Cultura mista) Em um laboratório de Microbiologia, as amostras que foram coletadas através de procedimentos estéreis (frascos, swabs, etc) são inoculadas em meios de cultura estéreis, que favorecem o crescimento ou o isolamento de um determinado tipo de microrganismo. Caracterização dos microrganismos Amostra Vários tipos de Microrganismos (Cultura mista) Estudar o microrganismo isolamento 1 4/3/2010 Isolamento dos microrganismos Isolamento dos microrganismos Técnicas de Cultura Pura Cultura Mista Técnicas utilizadas na microbiologia que tem como objetivo certificar que todas as células na população em estudo são idênticas (se originaram de uma única célula parental) Separação das células Em meio sólido Células parentais Crescimento celular aumenta o número de células Colônias isoladas são milhões de bactérias Isolamento dos microrganismos Microscópico Incubação Macroscópico Cultura mista ou pura? Técnica de semeadura de bactérias por estrias ou esgotamento Filme Caracterização microscópica dos Mos Caracterização microscópica dos Mos Técnicas de Microscopia e Coloração Os novos microscópicos e as novas técnicas de microscopia possibilitaram um avanço significativo na caracterização, identificação e classificação dos microrganismos. MÉTODOS DE COLORAÇÃO Coloração positiva ou negativa Coloração Positiva Corado pelo corante Coloração Negativa Não se cora 2 4/3/2010 Caracterização microscópica dos Mos Caracterização microscópica dos Mos MÉTODOS DE COLORAÇÃO MÉTODOS DE COLORAÇÃO Coloração positiva: Coloração simples Coloração positiva: Um corante Informações simples (forma, tamanho, presença ou não de estruturas) Caracterização microscópica dos Mos MÉTODOS DE COLORAÇÃO Coloração de Gram Álcool-ácido resistência Morfologia da célula procariótica TAMANHO Micrômetros (µm) = 1/1000 mm Variáveis: 0,2 a 2 µm de diâmetro e 2 a 8 µm de Endósporo Morfologia da célula procariótica FORMAS: Esféricas (COCOS) Cilíndricas (BACILOS) Espiraladas (ESPIRILOS) Coloração diferencial Dois ou mais corantes Distingue tipos celulares ou partes de uma célula Gram, álcool-ácido resistência, endósporo largura Morfologia da célula procariótica ARRANJO: Maneira como as formas estão agrupadas ou como elas se apresentam Plano de divisão Diplococos Estreptococos 3 4/3/2010 Morfologia da célula procariótica Morfologia da célula procariótica Plano de divisão Bacilo Tetracocos Sarcinas Diplobacilo Estafilococos Morfologia da célula procariótica Morfologia da célula procariótica Vibrio Estreptobacilo Espirilo Paliçada Espiroqueta Morfologia da célula procariótica Ultraestrutura da célula procariótica 4 4/3/2010 Ultraestrutura da célula procariótica Ultraestrutura da célula procariótica Apêndices celulares para locomoção Flagelos: Finos Helicoidais Flagelina Motilidade Presentes em todos os espirilos, metade dos bacilos e alguns cocos Inclusões Ribossomo Citoplasma Nucleóide Flagelo Glicocálix Membrana celular Parede celular Tipos de Flagelo bacteriano Monotríquio Lofotríquio Corrida e desvio Anfitríquio Peritríquio Filme Tipos de Flagelo bacteriano – Flagelo Periplasmático Estrutura do Flagelo bacteriano Parede celular Membrana externa Membrana celular Peptideoglicano Espiroquetas Flagelo que no periplasma Filme Filamento Gancho Anéis Anéis Corpo basal Filme 5 4/3/2010 Ultraestrutura da célula procariótica Apêndices celulares “troca” genética adesão e Ultraestrutura da célula procariótica Fímbrias Fímbrias: Menores em tamanho Mais numerosos Maioria envolvido em adesão Minoria envolvido na “troca de material genético” Ultraestrutura da célula procariótica Glicocálice Camada extracelular formada de biomoléculas (aa e Ps) arranjadas na forma de polímeros Função: Adesão Proteção contra dessecamento, bacteriófagos e fagocitose Reservatório de nutrientes lise por Ultraestrutura da célula procariótica Ultraestrutura da célula procariótica Glicocálice Cápsula: organizado e aderido firmemente à parede celular Camada limosa: desorganizado e frouxo Capsula Glicocálice Camada limosa Glicocálice Parede celular Cápsula Klebsiella pneumoniae Bacillus anthracis 6 4/3/2010 Ultraestrutura da célula procariótica Parede Peptídeoglicano celular Determina a forma das bactérias Resistência à pressão osmótica Barra a evasão e entrada substâncias Rigidez=Peptideoglicano de Peptídeoglicano Parede celular – Bactérias Gram Positivas Esqueleto de carboidrato Tetrapeptídeo Tetrapeptídeo Parede celular – Bactérias Gram Negativas Parede celular GRAM POSITIVA Peptideoglicano Membrana citoplasmática GRAM NEGATIVA Membrana externa Membrana citoplasmática Peptideoglicano 7 4/3/2010 Parede celular – Coloração de Gram Ultraestrutura da célula procariótica Membrana citoplasmática Coloração de Gram: + ou -? Ultraestrutura da célula procariótica Membrana citoplasmática Bicamada lipídica (fosfolipídeos e proteínas) Não contém esteróis (colesterol) exceção: micoplama Atividade enzimática (produção de energia e síntese da parede) Transporte de moléculas Transporte passivo: não requer energia (ATP) Transporte ativo: requer energia (ATP) Ultraestrutura da célula procariótica Ultraestrutura da célula procariótica Membrana Membrana citoplasmática TRANSPORTE PASSIVO (água, CO2, O2, íons, moléculas lipofílicas) citoplasmática TRANSPORTE ATIVO (açúcares, proteínas, etc) Difusão Facilitada Difusão simples Translocação de Grupo Osmose 8 4/3/2010 Ultraestrutura da célula procariótica Ultraestrutura da célula procariótica Estruturas Estruturas celulares internas Àrea Citoplasmática: 80% água, proteínas, carboidratos, lipídeos, íons, ribossomos, inclusões de enxofre, grânulos metacromáticos, de glicogênio, etc celulares internas Material nuclear Cromossomo único e circular (agrupado em uma área denominada de nucleoíde) Plasmídeos Essencial vs não essencial Ultraestrutura da célula procariótica FORMAS LATENTES DE PROCARIOTOS Ultraestrutura da célula procariótica São formas metabolicamente desfavoráveis produzidas em condições adversas, tais como dessecamento e calor. ENDOSPOROS Formados internamente (endosporos) Resistentes ao calor, dessecamento, agentes químicos Clostridium sp. e Bacillus sp. 6 a 8 horas para produzir o esporo Ultraestrutura da célula procariótica Etapas: 1- Replicação do cromossomo 2- Invaginação do citoplasma, produzindo várias camadas 3Produção do córtex (peptideoglicano) 4- Deposição de dipicolinato de cálcio 9
