Classificação e localização de genes cry em plasmidios e

51º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 51º Congresso Brasileiro de Genética • 7 a 10 de setembro de 2005
Hotel Monte Real • Águas de Lindóia • São Paulo • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 85-89109-05-4
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Palavras-chaves: Bacillus thuringiensis, genes cry, plasmidio
Mandú, LMT; Neves. MC; Abreu. IL; Martins, LS; Lemos, EGM;Lemos, MVF
Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias – Universidade Paulista – Campus de Jaboticabal.
Classificação e localização de genes
cry em plasmidios e cromossomos
em linhagens de Bacillus thuringiensis
Os inseticidas químicos são tóxicos ao homem e ao meio ambiente e além disso, podem atingir
organismos não - alvo. Assim, é fundamental reduzir o uso de inseticidas químicos e buscar novas
alternativas para o controle das pragas. Dentre essas alternativas, pode-se destacar o controle biológico
por meio da bactéria Bacillus thuringiensis, que nos últimos 40 anos tem apresentado um controle
efetivo sobre vários insetos-pragas na agricultura. Trata-se de um microrganismo entomopatogênico,
que apresenta atividade tóxica através de proteínas cristal ou δ-endotoxinas, codificadas pelos genes
cry, atingindo pragas pertencentes às ordens Lepidoptera, Díptera, Coleoptera e Nematoda. Uma
subespécie ou variedade de B. thuringiensis pode conter uma ou várias cópias de um mesmo gene
cry ou cópias de diferentes genes cujos produtos formarão um mesmo cristal misto. A localização
preferencial em plasmidios geralmente conjugativos, juntamente com uma freqüente associação a
elementos genéticos móveis, determina a grande diversidade destes genes e a conseqüente ocorrência de
linhagens contendo diferentes combinações dos mesmos e, portanto, com perfis de toxicidade distintos.
Este trabalho analisou a localização de diferentes genes cry e identificou sua diversidade em 9 isolados
de B. thuringiensis efetivos contra insetos da ordem Lepidoptera. Foram analisadas linhagens de B.
thuringiensis disponíveis no Laboratório de Genética de Bactérias e Biotecnologia Aplicada e o DNA
total foi extraído conforme um protocolo modificado. O conteúdo plasmidial e cromossomal foram
separados por ultracentrifigação, e em seguida amplificados com primers específicos e analisados pelo
fotodocumentodor. Dentre as 9 amostras analisadas com os primers específicos para os genes cry Aa,
Ac e Ea, foi detectada a presença do gene Aa nos cromossomos de 8 amostras ( MT6, RN1, Br37, SP8,
Pr2, MT7, BR41, Br45) e nos plasmidios de 6 linhagens ( MT6, RN1, BR37, SP8, MT7, BR41 ) .
O gene cry Ac foi verificado nos cromossomos de 9 amostras ( MT6, HD73, BR37, SP8, PR2, MT7,
SP6, BR41, BR45) e nos plasmidios de 8 amostras ( MT6, HD73, BR37, SP8, PR2, MT7 ,SP6 e
BR45). O gene cry Ea foi identificado nos cromossomos e plasmidios das amostras BR37 e BR45. Por
esses resultados pode-se verificar a ocorrência de evento de recombinação gênica devido a uma grande
diversidade genética e variação quanto à localização dos genes cry e mesmo a presença de diferentes
genes em ambos (plasmidios e cromossomos), fatos que podem ser considerados responsáveis pela
variação na patogenicidade e na virulência das amostras analisadas.
Apoio: CNPq.
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