Sistema de endomembranas Constituído por: Involucro nuclear (junto ao núcleo) Reticulo Endoplasmático Complexo de Golgi Núcleo: Posição: Central, Paracentral ou Excêntrica Forma: Acompanha a forma da célula Número: Único, Binucleado, Multinucleado, Inexistente Constituído por: 1-Nucleolo, 2 Cromatina, 3-Involucro Nuclear, 4-Nucleoplasma (contem ATP, Enzimas e Iões) Envelope Nuclear – É formado por uma membrana dupla, sendo que o espaço entre cada membrana é denominado de espaço perinuclear. Esta membrana é impermeável a iões e moléculas pelo que o transporte destes (fluxo citoplasma/núcleo) é feito pelos poros nucleares (pequenas descontinuidades na membrana). Os poros nucleares são constituídos por 8 subunidades de natureza proteica (simetria octagonal). Cada subunidade projecta uma espicula em direcção ao interior (roda com raios), sendo que no interior está um grânulo central. Os poros são altamente selectivos: Impede a entrada de ribossomas no núcleo; Somente a porção central é usada para trocas; O núcleo possui proteínas específicas que são sintetizados no citoplasma sendo depois transportadas para o núcleo onde são armazenadas; Cromatina – É constituída por nucleossomas (octómeros de histonas á volta das quais se enrola a dupla hélice de DNA) Pode-se dividir em heterocromatina e eucromatina. A heterocromatina é a parte da cromatina condensada (impede a transcrição de genes), ou seja inactiva; apresenta uma coloração elevada com corantes básicos. Esta pode ser heterocromatina facultativa (condensada somente em determinados momentos do desenvolvimento, ex. neutrófilos), ou heterocromatina constitutiva (permanece condensada em ambos os cromossomas homólogos). A eucromatina é a parte desespiralada ou activa, podendo assim ocorrer a transcrição e por fim uma maior síntese proteica. Apresenta uma coloração menos corada. Nucléolo – São de número variável e são local de biossíntese de ribossomas. Com coloração de Hematoxilina e Eosina apresentam uma coloração muito densa (basófila). Reticulo endoplasmático: Complexo de conjuntos membranares de cisternas, geralmente agrupadas paralelamente umas às outras, constituídas por 2 partes: R.E.R; R.E.L. O grau de desenvolvimento do R.E. varia com: o Tipo Celular o Funções celulares 1.Reticulo endoplasmático rugoso Desenvolvido em células que participam activamente na síntese de proteínas. Formado por grupos paralelos de vesículas achatadas ou cisternas que ocupam grande parte do citoplasma. Ao M.O é basófilo. Associado ao reticulo encontram-se ribossomas (polirribossomas) Funções do RER: o Armazena Proteínas (para posterior Glicosilação) o Suporte mecânico à estrutura coloidal do citoplasma o Promove a fluidez da membrana o Faz a síntese de proteínas para exportação o Glicosilação o Promove os gradientes iónicos e os potenciais eléctricos 1.1– Ribossomas Constituição: RNA (60%) e Proteínas (40%). Formado por duas subunidades: maior e menor Função: Síntese proteica Evidenciam uma marcada basófila Podem ser: o Livres – Polirribossomas o Associados a membranas – RER (polirribossomas) Membrana nuclear externa (ligação através de riboforinas) 2. – Reticulo Endoplasmático Liso As suas membranas têm mais lípidos e menos proteínas que as do RER Abundante em: hepatócitos, células de Leydig, Corpo Lúteo, Córtex Adrenal Funções (além das iguais às do RER): o Síntese de Lípidos (fosfolipidos e colesterol) o Síntese de derivados lipídicos (hormonas, esteróides, quilomicrons, ácidos biliares, lipoproteínas) o Metabolismo de carbohidratos (glucogénese e glucogenólise) o Biotransformação (substâncias endógenas e exógenas) o Transporte e armazenamento de iões (cálcio no reticulo sarcoplasmático) Aparelho de Golgi Sistema citoplasmático de membranas formado por pilhas de sáculos achatados (dictiossomas) e outras vesículas. Localização: entre o R.E e a Membrana plasmática. Justanuclear (ou Perinuclear).Zona de Exclusão (da qual se encontram excluídos ribossomas, glicogénio e mitocôndrias). Coloração: o De rotina: imagem negativa o Prata ou ósmio: grânulos e bastonetes negros o Microscópio de contraste de fase: área escura com rede de vacúolos e canalículos claros. Constituição – 3 elementos membranosos: o Cisternas achatadas o Grupos de túbulos e vesículas o Grandes vacúolos Dictiossomas: conjunto de cisternas discóides e achatadas associadas a vesículas de secreção. Apresentam-se polarizados: face Cis e Trans: o Face Cis (ou externa ou de formação) – convexa, localizada próximo do envelope nuclear e do R.E., onde se encontram as vesículas de transição o Face Trans (ou distal ou de maturação) – côncava, inclui a região que contém vesículas secretoras grandes. Rica em fosfatase ácida. Desta região saem os Vacúolos de Condensação e os grânulos de zimogénio. Composição Bioquimica: o Tem mais enfingosina e colesterol que o RER o Menor complexidade das proteínas o Enzimas características (relacionadas com a transferência de oligossacarideos) são: glicosiltransferases e sulfotransferases. o Aumento da espessura da membrana desde a face cis até à face trans. Funções: o Transito continuo de substâncias que são modificadas e transformadas enquanto estão a ser transportadas (sempre cis-trans) o Glicosilação de lípidos e proteínas o Formação de enzimas lisossomais (como vesículas revestidas por clatrina) o Síntese proteica (transporte, concentração, acumulação intracelular e exocitose). 2.1 – Lisossomas Organito citoplasmático de membrana única que se caracteriza pela presença de diversas hidrólases ácidas (actuam a pH 3-6) Função – digestão intra e extracelular São polimórficos Aspectos ultraestruturais: o Circulares ou ovais o Limitados por membrana resistente às hidrólases ácidas o Lisossomas primários: pequenas vesículas de conteúdo homogéneo denso o Lisossomas secundários: grandes dimensões e de conteúdo heterogéneo Podem ser: o Primários - grânulos de reserva o Secundários – Autolisossoma (relacionada com autofagia) Heterolisossoma (relacionada com heterofagia) Corpos Residuais ou Telolisossoma Podem ser corados com: o Coloração citoquímica – corante de Gomori para a fosfatase ácida o Imunocitoquímica – anticorpos marcados Retículo endoplasmático e Aparelho de Golgi - (1) Membrana nuclear, (2) Poro nuclear, (3) Retículo endoplasmático rugoso (RER), (4) endoplasmático liso (REL), (5) Ribossoma no RER, (6) Proteínas que são transportadas, (7)Vesícula transportadora, (8) Aparelho de Golgi ou complexo lameloso (9) Cisterna do AG, (10) Transmembranares do AG, (11) Cisterna do AG, (12) Vesícula secretora, (13) Membrana plasmática, (14) Proteína secretada, (15) Citoplasma, (16) Espaço extracelular.