ZOL820 – Sistemática Molecular- Quinto Tutorial Prof. Almir R. Pepato Aluno: Programas/Algoritmos a serem abordados: jModeltest MEGA5 MrBayes Instruções básicas: Não pule nenhum passo, siga com a turma cada etapa deste tutorial. Lembre-se: Ele é parte de sua avaliação. Você deve preenchê-lo de maneira sucinta mas completa, eventualmente com a captura de telas (Ctrl+PrtScr e Ctrl+V). Ao final da aula, mande o arquivo para [email protected] com o assunto “Tutorial DATA ALUNO”. 1.MEGA5 1.1- Caarregue o arquivo “primate-mtDNA.nex”. No menu principal do MEGA entre em “Models | Find Best DNA/Protein models (ML)”. Repare que uma das opções da tela que se abre é “tree to use”: O que ela significa para a análise? Quais são as opções deste item? Por quê? 1.2 Clique em “Compute”. Qual é o melhor modelo conforme o BIC? Que outras informações são fornecidas pelo programa? 2.jModeltest 2.1. Instalando e iniciando o programa. O jMODELTEST.jar pode ser baixado livremente no site http://darwin.uvigo.es/software/jmodeltest.html. Ele roda em Java portanto você precisa ter o ambiente Java rodando em seu computador (http://www.java.com/pt_BR/download/index.jsp). Depois de clicar duas vezes no ícone do arquivo .jar, o programa deverá abrir. Caso isso não ocorra entre no prompt de comandos e digite ‘‘java –jar jModeltest.1.0.jar’’). 2.2. O primeiro passo será o de carregar o alinhamento a ser testado. Carregue o alinhamento contido no arquivo “primate-mtDNA.nex” através do caminho: “File > Load DNA alignment”. 2.3 A qualquer momento você pode salvar tudo o que aparece na tela do programa usando o caminho ‘‘Edit > Save console’’ ou imprimi-lo utilizando o caminho ‘‘Edit > Print console’’. Experimente a primeira opção. Abra o arquivo resultante com o Bloco de Notas ou outro editor de textos. 2.4. Computando as verossimilhanças dos modelos. Existem 88 modelos implementados no jMODELTEST, incluindo 11 esquemas de substituição, freqüências nucleotídicas iguais e desiguais, porporção de sítios invaráveis e variação na taxa de substituição entre os sítios. Você pode selecionar os modelos a serem considerados na tela baixo, que você pode abri-lá seguindo o caminho “Analysis > ‘‘Compute likelihood scores’’ Observe as opções apresentadas pela janela e discuta cada uma delas. O primeiro passo será calcular as verossimilhanças. Para isso basta pressionar o botão “Compute Likelihods”. Teremos que fazer isso duas vezes. Uma com a topologia fixa, para a hLRT e outra onde podemos otimizar a topologia para cada modelo (“ML optimized”) para AIC e BIC. Por quê? 2.5. Seleção de Modelos. Uma vez que as verossimilhanças dos modelos foram estimadas passamos para a comparação entre os modelos a partir do menu ‘‘Analysis”. 2.5.1. A janela para a escolha dos modelos através de LRTs pode ser vista abaixo. Repare que você pode escolher a ordem em que os modelos são comparados. Há estudos que mostram que hLRT é sensível a ela! Qual modelo foi escolhido utilizando esse critério? 2.6.Repita o cálculo da verossimilhança dos modelos utilizando a opção “ML optimized”. Empregue agora os critérios AICc e BIC. Quais modelos foram selecionados? 1.7. Selecionando modelos utilizando fatores Bayesianos. Rode duas análises com modelos distintos empregando o arquivo “primate-mtDNA.nex” e parâmetros de análise adequados. Compare os valores Bayesianos estimados a partir da média harmônica da lnL. Mostre os resultados abaixo.