Estudo comparativo entre dupla centrifugação e utilização do filtro E

Estudo comparativo entre dupla centrifugação e utilização do filtro EPET para obtenção do plasma rico em plaquetas em equinos
Mariana Lopes da Conceição (aluno-autor), Ana Liz Garcia Alves (orientador), Ana Lúcia Miluzzi Yamada
(colaborador), Jaqueline Brandão de Souza (colaborador) e Gustavo Gonçalves Parisi (colaborador).
Campus de Botucatu, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ), Medicina Veterinária,
[email protected], bolsa de Iniciação Científica FAPESP.
Palavras Chave: plasma rico em plaquetas (PRP), equino, filtro E-PET.
Introdução
O Plasma Rico em Plaquetas (PRP) consiste em
uma alta concentração de plaquetas em um
pequeno volume de plasma, sendo de quatro a
cinco vezes maior que a concentração sérica. O uso
de PRP é justificado pela alta concentração de
fatores de crescimento presentes em grânulos no
interior das plaquetas. Há diversos protocolos para
obtenção do PRP em equinos descritos na
literatura, dentre os quais destacam-se os de dupla
centrifugação, os automatizados e os filtros.
Objetivos
Este estudo objetivou comparar a utilização do PRP
obtido por protocolo de dupla centrifugação e pelo
filtro E-PET (Equine Platelet Enhancement
Therapy),
levando-se
em
consideração
a
concentração plaquetária e leucocitária final e a
relação custo-benefício entre tais métodos.
Material e Métodos
Foram utilizados quatro equinos saudáveis que
apresentavam seus valores de hemograma total
dentro da normalidade para a espécie. Foram
utilizadas duas amostras de cada um dos quatro
animais para avaliar comparativamente os dois
métodos de obtenção. Filtro E-PET: foram coletados
55 mL de sangue total venoso desses animais em
uma seringa de 60 mL contendo 5mL de solução
anticoagulante. Esse sangue foi transferido para o
kit e filtrado por um sistema gravitacional segundo
as instruções do fabricante. Segundo este, a
concentração plaquetária obtida é, em média, sete
vezes maior que a concentração sérica. Protocolo
de dupla centrifugação: foram coletados 20 mL de
sangue total venoso em tubos contendo o
anticoagulante citrato de sódio. Foram realizadas
duas centrifugações (300g por 5 minutos e 700g por
17 minutos) intercaladas entre descansos de, em
média, 35 minutos, no qual se visou separar o
plasma. Após a segunda centrifugação, descartouse os 75% superiores, sendo que o restante (25%
inferiores) é o PRP. As plaquetas e os leucócitos
foram contados utilizando a câmara de Neubauer.
Resultados e Discussão
Dupla centrifugação: A1: 936.775 plaquetas/l de
sangue e 16.985 leucócitos/l de sangue; A2:
XXVI Congresso de Iniciação Científica
939.300 plaquetas/l de sangue e 17.587,5
leucócitos/l de sangue; A3: 1.121.000 plaquetas/l
de sangue e 15.225 leucócitos/l de sangue; A4:
1.179.175 plaquetas/l de sangue e 13.440
leucócitos/l de sangue. Desvio padrão: 124.713,7
plaquetas e 1.870,76 leucócitos
E-PET: A1: 1.262.500 plaquetas/l de sangue e
12.810 leucócitos/l de sangue; A2: 1.595.200
plaquetas/l de sangue e 22.257,50 leucócitos/l de
sangue; A3: 808.000 plaquetas/l de sangue e
23.307,50 leucócitos/l de sangue; A4: 1.315.525
plaquetas/l de sangue e 19.897,50 leucócitos/l de
sangue. Desvio padrão: 326.031 plaquetas e
4.725,68 leucócitos
A quantidade de plaquetas e leucócitos obtida pela
dupla
centrifugação
e
pelo
filtro
E-PET
assemelham-se. Dessa forma, é questionável a
necessidade de importação do filtro E-PET a um
custo elevado, uma vez que é possível a obtenção
de PRP com concentrações semelhantes através da
dupla centrifugação. Entretanto, o preparo
laboratorial é necessário e dispendioso de tempo.
Conclusões
Quanto à concentração de plaquetas e leucócitos
obtida, a dupla centrifugação e o filtro E-PET
assemelham-se, diferindo-se em relação ao tempo
de preparo (melhor no filtro), por ser um sistema
fechado (filtro) e ao custo (maior no filtro).
Entretanto, ainda é necessário o estudo em relação
à concentração de fatores de crescimento
apresentada pelos dois métodos
Agradecimentos
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São
Paulo (FAPESP)
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CARMONA, J.U.; ARGULLES, D.; CLIMENT, F.; PRADES, M.
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