Análise por citometria de imagem da ploidia de DNA em núcleos de

56º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 56º Congresso Brasileiro de Genética • 14 a 17 de setembro de 2010
Casa Grande Hotel Resort • Guarujá • SP • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2
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Análise por citometria de imagem da ploidia de DNA
em núcleos de epitélio cervical uterino suspeitos de
malignidade: relato de caso
Duarte, CEM1; Carvalho, CR1; Silva-Filho, AL2
Laboratório de Citogenética e Citometria, Departamento de Biologia Geral, Universidade Federal de Viçosa, Minas Gerais, Brasil
Faculdade de Medicina – Departamento de Ginecologia e Obstetrícia, Universidade Federal de Minas Gerais
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Palavras-chave: citometria de imagem, ploidia de DNA, diagnóstico, câncer de colo uterino, valor C
O câncer de colo uterino é o segundo tipo de tumor mais comum entre as mulheres em todo o mundo, com cerca de
500.000 novos casos e 250.000 mortes a cada ano. A citometria de imagem (CI) tem sido utilizada com sucesso em
mais de 40 países, como metodologia adjuvante, principalmente por apresentar alta especificidade e sensibilidade
na detecção de lesões pré-malignas em diferentes tecidos. No presente relato, pretendeu-se analisar por meio
da CI um caso clinico suspeito de malignidade. A paciente havia sido previamente diagnosticada pela citologia
convencional como portadora de lesão intra-epitelial de alto grau. A avaliação histológica identificou um carcinoma
cervical microinvasor. A análise da ploidia de DNA foi executada sem o conhecimento prévio dos resultados da
citotopatologia. Para a execução da análise via CI, três lâminas de suspensão celular da amostra foram preparadas
via citocentrifugacão, contendo em cada uma delas células de referência do epitélio oral em regiões opostas da
mesma lâmina. O material foi submetido à reação de Feulgen. As imagens dos núcleos foram digitalizadas pelo
sistema de análise de imagens Image Pro® Plus 6.1 e os valores das densidades ópticas de cada núcleo processados
automaticamente pelo algoritmo do software e convertidos em densidades ópticas integradas (DOI). Esses valores
foram reescalonados em termos de conteúdo relativo de DNA (valor C) a partir dos quais foram plotados histogramas
para visualização e avaliação estatística dos picos G0/G1 e G2/M. No total, 644 núcleos foram analisados, detectouse 21 células com conteúdo de DNA excedente a 5C (5cEE) e uma célula excedente a 9C (9cEE). O coeficiente de
variação da razão entre a MODA da DOI das células de referência e das células não-patológicas G0/G1 obtido foi
de 1,5%, adequando-se ao limiar de 5%, internacionalmente proposto pela European Society for Analytical Cellular
Pathology. A detecção de células com conteúdo de DNA > 5C corresponde a uma ploidia anormal, e a presença de pelo
menos um 9cEE, qualifica a lesão como aneuplóide, prospectivamente maligna. Tem sido reportada que eventos
excedentes a 9C estão associados exclusivamente com infecção por papilomavírus de alto risco. Os resultados obtidos
ratificam a utilidade da citometria de imagem como ferramenta adjuvante para o diagnóstico de lesões cervicais.
Órgão Financiador: CNPq, UFV