ECTS - Escola Superior de Saúde Curso: Licenciatura em - EU-IPP

ECTS - Escola Superior de Saúde
Curso: Licenciatura em Análises Clínicas e Saúde Pública
Unidade Curricular: Imunologia
Ano Lectivo: 2012/2013
Ano curricular: 2
Período Lectivo: 1º Semestre
Frequência: Obrigatória
Nº créditos (ECTS): 4.0
Horas teóricas: 30.0 h
Horas práticas e laboratoriais: 30.0 h
Docente Responsável: Regina Silva
Objectivos:
- Conhecer e aplicar a terminologia e os conceitos gerais sobre a imunologia e o sistema imunitário;
- Identificar e caracterizar as células, os órgãos e as moléculas características do sistema imunitário e reconhecer a ontogenia dos
linfócitos T e B;
- Citar, identificar e caracterizar os mecanismos efetores do sistema imunitário e conhecer a sua importância na
eliminação/contribuição da doença;
- Citar, identificar e caracterizar os elementos celulares e moleculares intervenientes na imunidade inata e na imunidade
adaptativa;
- Distinguir a resposta imunológica primária da resposta imunológica secundária e nomear as suas características;
- Reconhecer e explicar a estrutura básica das imunoglobulinas, classes, subclasses e atividades biológicas;
- Reconhecer a organização multigénica dos genes das imunoglobulinas, o rearranjo dos genes para codificação das regiões
variáveis, os mecanismos de geração de diversidade e o ¿switch¿ de classe;
- Reconhecer a organização dos genes codificadores do Complexo Major de Histocompatibilidade (MHC) no genoma, o modo de
transmissão, a estrutura molecular dos MHC classe I e do MHC classe II, a sua distribuição celular e regulação da expressão;
- Identificar e distinguir as moléculas de MHC classe I e classe II ao nível estrutural e funcional e reconhecer a sua importância na
susceptibilidade e/ou resistência a doenças e na rejeição de transplantes;
- Nomear, identificar e explicar os diferentes tipos de processamento de antigénios;
- Identificar e caracterizar as células apresentadoras de antigénio (APC) e as células alvo;
- Reconhecer os mecanismos de geração de diversidade dos receptores dos linfócitos T (TCR), a estrutura e função dos TCR na
geração de uma resposta imunológica específica e sua interação com o MHC;
- Citar, identificar e caracterizar os elementos celulares e moleculares intervenientes na ativação dos linfócitos e no
desenvolvimento e regulação das respostas imunológicas humoral e mediadas por células;
- Explicar os mecanismos que intervêm no desenvolvimento e regulação de respostas imunológicas específicas humorais e
mediadas por células T;
- Identificar os agentes etiológicos e os mecanismos imunológicos que geram as reações de hipersensibilidade;
- Identificar e distinguir e caracterizar as principais imunodeficiências primárias e doenças associadas a alterações de células ou de
moléculas do sistema imunológico;
- Identificar as principais características da resposta imunológica contra bactérias e vírus, e os mecanismos dos agentes
patogénicos para evasão da resposta imunológica do hospedeiro;
- Identificar a melhor resposta imunológica no combate a uma dada doença infeciosa;
- Distinguir tolerância imunológica central da tolerância imunológica periférica;
- Caracterizar e nomear os mecanismos imunológicos subjacentes à tolerância central e periférica;
- Identificar e nomear os fatores que contribuem para a rutura da tolerância imunológica e desenvolvimento de doença
auto-imunes;
- Nomear e descrever métodos de separação e isolamento dos diferentes tipos leucocitários do sangue periférico e sua aplicação;
- Nomear, identificar e descrever os métodos imunológicos para a avaliação das atividades das células do sistema imunológico,
bem como da resposta imunológica;
- Desenvolver o espírito crítico, raciocínio e a autonomia através da resolução de problemas e análise de casos práticos;
- Analisar e interpretar os resultados obtidos em imunfenotipagem por citómetro de fluxo;
- Elaborar relatórios de actividades laboratoriais executadas nas aulas práticas;
- Aplicar as boas práticas de trabalho num laboratório de Imunologia;
- Desenvolver as diferentes tarefas laboratoriais tendo em conta as normas de biossegurança;
- Coordenar e organizar as diferentes tarefas inerentes ao protocolo laboratorial;
- Executar com rigor e precisão um determinado protocolo laboratorial e reconhecer a sua importância na prática profissional.
Programa:
CONTEÚDOS TEÓRICOS
1. Conceitos gerais sobre a imunologia e o sistema imunológico. (2 Horas)
1.1. Características gerais da resposta imunológica: fases da resposta imunológica; resposta imune humoral e mediada por
células; resposta imunológica primária e secundária.
1.2. Imunidade inata e imunidade adaptativa.
2. Imunidade inata (2 Horas)
2.1. Reconhecimento dos agentes patogénicos pelo sistema da imunidade inata. Padrões moleculares associados aos patogénios
(PAMPs) e receptores de reconhecimento de patogénios (PRR).
2.2 Componentes celulares e solúveis da imunidade inata e suas actividades na resposta imunológica inata.
2.3 Evasão da imunidade inata por agentes patogénicos.
2.4 Papel da imunidade inata no desenvolvimento da imunidade adaptativa.
3. Captura, processamento e apresentação de antigénios aos linfócitos T (4 Horas)
3.1 Complexo Major de Histocompatibilidade (MHC).
3.2 Processamento e apresentação de antigénios no contexto das moléculas MHC classe I e MHC classe II.
3.2.1 Restrição das células T ao MHC do próprio.
3.2.1 Células apresentadoras de antigénio e células alvo.
3.2.2 Processamento de antigénios: via citosólica e via endocítica.
3.2.3 Apresentação de antigénios bacterianos não peptídicos no contexto da molécula CD1.
4. Reconhecimento antigénico pelo sistema imunológico adaptativo (4 Horas)
4.1 Estrutura e função dos receptores dos linfócitos T (TCR) e linfócitos B (BCR)
4.1.1 Imunoglobulinas.
4.1.2 Receptores dos linfócitos T (TCR) e a sua interação com o MHC.
4.2 Desenvolvimento do reportório imunitário
4.2.1 Maturação dos linfócitos
4.2.2 Diversidade dos receptores antigénicos
4.2.3 Maturação e seleção dos linfócitos T
4.2.4 Maturação e seleção dos linfócitos B
5. Resposta imunológica mediada por células (4 Horas)
5.1 Fases da resposta imunológica mediada por células
5.2 Reconhecimento do antigénio e ativação dos linfócitos T
5.3 Respostas funcionais dos linfócitos T ativados
5.3.1 Secreção de citocinas e expressão de receptores de citocinas
5.3.2 Expansão clonal; o papel da IL-2
5.3.3 Diferenciação dos linfócitos T naive ativados em linfócitos efetores
5.3.4 Desenvolvimento de linfócitos T memória
5.3.5 Declínio da resposta imunológica
5.4 Papel das citocinas na indução, desenvolvimento, modulação e regulação da resposta imunológica mediada por células
6. Mecanismos efetores da imunidade mediada por células (2 Horas)
6.1 Tipos de imunidade mediada por células
6.2 Migração dos linfócitos T efetores para os locais de infeção
6.3 Funções efetoras dos linfócitos T CD4+ helper 1
6.4 Papel dos linfócitos Th2 na imunidade mediada por células
6.5 Atividades efetoras dos linfócitos T CD8+ e o seu papel no combate a infeções víricas e bacterianas intracelulares
6.6 Contribuição da resposta imunológica na patogénese infeciosa
6.7 Mecanismos de evasão dos patogénios à resposta imunológica
7. Resposta imunológica humoral (2 Horas)
7.1 Fases e tipos de resposta humoral
7.2 Ativação dos linfócitos B a antigénos independentes dos linfócitos T (polissacarídeos e glicolípidos) e dependentes dos
linfócitos T (antigénios proteicos)
7.3 Papel das proteínas do complemento na ativação dos linfócitos B
7.4 Vias de sinalização intracelulares ativadas durante ativação dos linfócitos B
7.5 A função dos linfócitos Th no desenvolvimento da resposta humoral a antigénios proteicos
7.6 O papel dos linfócitos Th1 no desenvolvimento de resposta imunológica a conjugados
7.7 Características da resposta imunológica primária e da resposta imunológica secundária
7.8 Efeito da competição antigénica e da presença de anticorpos no desenvolvimento de resposta imunológica humoral
7.9 Regulação da resposta imunológica humoral
8. Mecanismos efetores da imunidade humoral. (2 Horas)
8.1 Neutralização de microrganismos e toxinas microbianas
8.2 Opsonização e fagocitose
8.3 Citotoxicidade mediada por células dependente de anticorpos (ADCC)
8.4 Ativação do sistema complemento pela via clássica
8.4.1 Regulação e consequências biológicas da ativação do sistema complemento
8.4.2 Imunodeficiências por défice de proteínas do complemento
8.5 Mecanismos de resistência dos patogénios à imunidade humoral
8.6 Vacinas contra agentes patogénicos (vírus e bactérias) e imunidade humoral a longo prazo
9. Inflamação. (2 Horas)
9.1 Mediadores da inflamação.
9.2 Células e moléculas intervenientes no desenvolvimento e manutenção da resposta inflamatória aguda e crónica
9.3 Papel das moléculas de adesão na extravasão de células da linha mielóide e linfóide.
9.4 Características da inflamação aguda e inflamação crónica.
10. Reações de hipersensibilidade. (3 Horas)
10.1 Classificação de Gell e Coombs: reações de hipersensibilidade imediata (Tipo I, Tipo II e Tipo III) e de hipersensibilidade
retardada (Tipo IV).
10.2 Células e moléculas intervenientes nos mecanismos imunológicos que desencadeiam e medeiam as reações de
hipersensibilidade.
10.3 Exposição de patologias mediadas pelos diferentes tipos de reações de hipersensibilidade.
10.4 Ensaios laboratoriais utilizados para a caracterização dos diferentes tipos de reações.
11. Tolerância imunológica e auto-imunidade. (2 Horas )
11.1 Tolerância central e tolerância periférica para os linfócitos T e linfócitos B.
11.2 Auto-imunidade.
11.2.1 Fatores que contribuem para a rutura da tolerância imunológica e desenvolvimento de doenças auto-imunes.
11.2.2 Apresentação de algumas doenças auto-imunes sistémicas e locais.
CONTEÚDOS PRÁTICOS
1. Células e órgãos do sistema imunológico. (2 Horas)
2. Métodos de isolamento e purificação dos diferentes tipos de leucócitos a partir do sangue periférico e de tecidos linfóides.
Apresentação de trabalhos e sua discussão. (1 Hora)
3. Métodos imunocitoquímicos. (1 Hora)
3.1 Método cromogénicos e de fluorescência.
4. Métodos para avaliação da atividade funcional dos fagócitos in vitro: testes para avaliação da quimiotaxia, adesão, produção de
radicais de azoto e de oxigénio. Aplicabilidade destes testes no disgnóstico de imunodeficiências primárias. Apresentação de
trabalho em grupo e discussão em turma. (4 Horas)
5. Imunofenotipagem e caracterização de leucemias por citometria de Fluxo. (4 Horas)
5.1 Análise e interpretação dos dados adquiridos em citómetro de fluxo relativos a amostras clínicas.
5.2 Apresentação de trabalhos no âmbito de leucemias e sua caracterização imunofenotípica
6. Métodos de isolamento e purificação de células estaminais da medula óssea por FACS. (2 Horas)
6.1 Apresentação de trabalho em grupo no âmbito de transplante de medula óssea.
7. Imunodeficiências linfocitárias e sua caracterização por imunofenotipagem e por estudos funcionais. (4 Horas)
7.1 Análise e interpretação de histogramas relativos a casos clínicos de imunodeficiências em linfócitos
7.2 Métodos para caracterização da actividade funcional dos linfócitos: ensaios de proliferação, de citotoxicidade e de produção de
citocinas.
7.3 Apresentação de trabalho em grupo no âmbito das várias metodologias para avaliação da actividade linfocitária.
TRABALHOS LABORATORIAIS (12 Horas)
1. Isolamento de populações celulares mononucleares do sangue periférico por centrifugação de gradiente de densidade;
realização de citospins e sua coloração pelo Wright para identificação e contagem dos monócitos e linfócitos por microscopia. (4
Horas)
2. Técnica imunocitoquímica indirecta para marcação dos linfócitos em citospins e em cortes de tecido ganglionar. Captura digital
de imagens microscópicas obtidas. Observação microscópica e análise dos resultados. (4 Horas)
3. Marcação dos leucócitos do sangue periférico com anticorpos monoclonais e sua aquisição no citómetro de Fluxo; análise e
interpretação dos resultados. (4 Horas)
Metodologias de Ensino:
Expositiva com apoio de audiovisuais, demonstrativa e participativa.
Análise e interpretação de resultados de ensaios imunológicos.
Execução de trabalhos laboratoriais.
Métodos de Avaliação:
A unidade curricular pode ser efetivada por avaliação distribuída ou por avaliação final, devendo os estudantes optar por um dos
tipos de avaliação até à quarta semana do início do semestre.
A classificação final da unidade curricular é expressa numa escala de 0 a 20 valores e é obtida a partir das classificações obtidas
em avaliação escrita (AE), numa apresentação oral de um trabalho elaborado em grupo (TG), dois relatórios escritos relativos a
dois trabalhos laboratoriais (R) e de uma avaliação prática (FP).
A avaliação escrita é relativa aos conteúdos teóricos, é realizada por dois testes escritos e a sua classificação (CAE) é expressa
uma escala de 0 a 20 valores, tendo uma ponderação de 0,50 da classificação final. A CAE é um valor ponderado das
classificações obtidas nos dois testes escritos.
O trabalho apresentado oralmente é obrigatório e é no âmbito de ensaios imunológicos e sua aplicabilidade no diagnóstico. A sua
classificação (CTG) é expressa numa escala de 0 a 20 valores e tem uma ponderação de 0,05 da classificação final.
Os relatórios escritos são obrigatórios, elaborados individualmente, e são relativos a trabalhos laboratoriais. A sua classificação
(CR) é expressa numa escala de 0 a 20 valores e tem uma ponderação de 0,20 da classificação final. A CR é um valor médio das
classificações obtidas nos dois relatórios.
A avaliação prática é escrita, é relativa aos trabalhos práticos e aos conteúdos abordados nas aulas práticas. A sua classificação
(CAP) é expressa numa escala de 0 a 20 valores e tem uma ponderação de 0,25 na classificação final.
A classificação final (CF) é calculada a partir da seguinte fórmula:
CF = 0,58 (CAE) + 0,05 (CTG) + 0,12 (CR) + 0,25 (CAP)
Para aprovação da unidade curricular é necessário obter uma classificação igual ou superior a 9,5 valores na avaliação escrita
(CAE), no trabalho apresentado oralmente (CTG), nos dois relatórios escritos e na avaliação prática (CFP). A classificação mínima
nos testes escritos é de 7,5 valores.
Os estudantes que não obtenham as classificações mínimas exigidas para efetivação da unidade curricular poderão realizar em
época de recurso a(s) componente(s) não efetivada(s) por avaliação distribuída, nomeadamente: uma avaliação escrita relativa
aos conteúdos teóricos; uma avaliação escrita relativa aos trabalhos práticos e aos conteúdos abordados nas aulas práticas; um
trabalho laboratorial e respetivo relatório; e/ou uma apresentação oral cujo tema será disponibilizado 10 dias antes da data do
exame. Para tal, os estudantes devem contactar com o docente 20 dias antes da data do exame dessa época de forma ao docente
disponibilizar o tema para a apresentação oral.
Os estudantes que optem por efetivar a unidade curricular por avaliação final realizam, na época de exames: uma avaliação
escrita, relativa aos componentes teóricos (AE); uma avaliação escrita, relativa aos trabalhos práticos e aos conteúdos abordados
nas aulas práticas (AP); um trabalho laboratorial e respetivo relatório escrito (TR); e um trabalho apresentado oralmente (TO) cujo
tema será disponibilizado 10 dias antes da data do exame. Para tal, os estudantes devem contactar com o docente 20 dias antes
da data do exame dessa época de forma ao docente disponibilizar o tema para a apresentação oral
A classificação final (CF), quando as provas são realizadas na época de exames é calculada partir das classificações obtidas nos
diferentes instrumentos de avaliação através da seguinte fórmula:
CF = 0,58 (CAE) + 0,05 (CTO) + 0,12 (CTR) + 0,25 (CAP)
A condição de aprovação à unidade curricular em exame é obter uma classificação igual ou superior a 9,5 valores em todos os
instrumentos de avaliação aplicados.
Bibliografia:
Bibliografia de referência
- Abbas, A, Andrew H Lichtman. Basic Immunology Functions and Disorders of the Immune System. Third ed.
Philadelphia:Saunders Elsevier; 2011.
- Arosa Fernando A.; Elsa M. Cardoso; Pacheco F.C. Fundamentos de Imunologia. Lisboa: Lidel; 2007.
- Goldsby, Richard A.; Thomas J. Kindt; Barabara A. Osborne. Kuby. Immunology. 6th edition Freeman and Company. New York.
www.whfreeman.com/immunology.
Bibliografia complementar
- Parslow, T G; Daniel P Stites; Abba I Terr; John B Imboden. Imunologia Médica. 10ª ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan;
2004.
- Rich, R R; Thomas A Fleisher; W T Shearer; B L Kotzin; H W Schroeder. Clinical Immunology. Principles and Practice. Second
edition. London: Mosby; 2001.
Observações:
Equipa docente
Regente: Prof. Doutora Regina Augusta Alves Pereira da Silva ¿ [email protected];
Docente: Prof. Doutora Regina Augusta Alves Pereira da Silva ¿ [email protected];
Dr. Daniel Oliveira Gala ¿ [email protected]
Regina Silva
Vila Nova de Gaia, 12 de Setembro de 2012