Morfologia leucocitária Marcos K. Fleury Laboratório de Hemoglobinas Faculdade de Farmácia - UFRJ [email protected] Morfologia Leucocitária. 1 Morfologia Leucocitária. CFU - Eos Eosinófilo Stem cell CFU - Mast/Bas Basófilo CFU - G Neutrófilo CFU - GM BFU - E BFU - Meg CFU - M Monócito CFU - E Hemácias CFU - Meg Plaquetas φ Fleury CFU-GEMM Morfologia Leucocitária. Stem cell Progenitor mielóide Progenitor linfóide Hemácias Mastócitos Mieloblastos Linfócito pequeno Natural Killer (Grande linfócito granular) Megacariócito Linfócito B Basófilo Neutrófilo Eosinófilo Linfócito T Monócitos Plasmócito Plaquetas Macrófago 2 Morfologia Leucocitária. Série Granulocitária Tipo celular Função Contagem (%) Bastões Precursores das células segmentadas 0 – 4% Segmentados Fagocitose; diapedese 50 – 70% Linfócitos B (20%); produção de Ac T (70%) defesa citotóxica. 20 – 50% Monócitos Fagocitose 2 – 8% Eosinófilos Defesa contra parasitos regulação imune 1 – 4% Basófilos Resposta a inflamações localizadas 0 – 1% Morfologia Leucocitária. Série Granulocitária Mieloblastos Pró-mielócitos Mielócitos Metamielócitos Bastões Granulócitos 3 Morfologia Leucocitária. Série Granulocitária. Granulocitária. Mieloblasto – É a célula mais imatura da linhagem mielóide morfologicamente identificável identificável.. Estão geralmente confinados à medula óssea e constituem cerca de 3% das células nucleadas neste ambiente.. ambiente Tem de 15 a 20 µ de diâmetro com alta relação núcleo núcleo--citoplasma (7:1 a 5:1). A célula e o núcleo são arredondados arredondados.. A cromatina nuclear é finamente reticulada apresentando nucléolo evidente evidente.. O citoplasma é basofílico basofílico.. Morfologia Leucocitária. Série Granulocitária. Promielócito – Também estão confinados à medula óssea e constituem cerca de 2% das células nucleadas neste ambiente ambiente.. São geralmente maiores que os mieloblastos, com diâmetro de 12 a 24 µ. O núcleo é redondo ou oval, com cromatina delicada e apresenta nucléolo evidente evidente.. O citoplasma é basofílico e apresenta grânulos azurófilos evidentes evidentes.. 4 Morfologia Leucocitária. Série Granulocitária. Granulocitária. Mielócito – A transição do promielócito para mielócito ocorre com o início da produção da granulação específica específica.. Estão confinados à medula óssea e constituem cerca de 10% 10% das células medulares nucleadas.. nucleadas São menores que os promielócitos, de 10 a 18 m. São células redondas ou ovais com núcleo redondo, excêntrico sem nucléolo evidente e começam a apresentar condensação nuclear nuclear.. Uma área clara perinuclear pode ser identificada indicando o Sistema de Golgi. Golgi. O citoplasma é mais abundante e a granulação específica da série pode ser identificada identificada.. Morfologia Leucocitária. Série Granulocitária. Granulocitária. Metamielócito – Primeira etapa do período pós pós--mitótico mitótico.. Têm diâmetro de 10 a 18 m, são células arredondadas e apresentam núcleo indentado com cromatina condensada condensada.. O citoplasma é levemente azulado exibindo granulações específicas da linhagem linhagem.. 5 Morfologia Leucocitária. Série Granulocitária. Granulocitária. Neutrófilo em bastão ou bastonete – Constituem de 10 a 15% 15% das células nucleadas da medula óssea em condições normais normais.. Podem aparecer em maior número na circulação em algumas situações fisiológicas e patológicas patológicas.. A célula é redonda ou oval com 10 a 18 mm de diâmetro apresentando núcleo com cromatina condensada condensada.. O diâmetro nuclear é, geralmente, uniforme não havendo condensação formando um filamento ou ponte. ponte. O núcleo pode assumir a forma de “S”, “C” ou “U” podendo apresentar apresentar--se torcido ou dobrado sobre si mesmo mesmo.. O citoplasma é idêntico ao observado no metamielócito metamielócito.. . Morfologia Leucocitária. Série Granulocitária. Neutrófilo maduro ou segmentado – É a célula mais madura da série mielóide sendo o leucócito predominante no sangue periférico periférico.. O tamanho da célula é equivalente a etapa anterior e o aspecto do citoplasma também é o mesmo mesmo.. A cromatina nuclear é muito condensada e o núcleo é lobulado (2 a 5 lóbulos) lóbulos).. Os lóbulos são conectados por finos filamentos filamentos.. A presença destes filamentos é a base para a distinção entre os segmentados e seus precursores (College of American Pathologists 2005 2005)). 6 Morfologia Leucocitária. Série Granulocitária. Granulocitária. Eosinófilo – São leucócitos redondos ou ovais e estão presentes no sangue periférico, na medula óssea e em vários tecidos de indivíduos normais normais.. São facilmente reconhecidos pela sua granulação característica constituída por numerosos grânulos grandes de tamanho uniforme e coloração alaranjada alaranjada.. Estes grânulos raramente sobrepõem o núcleo que, geralmente, apresenta dois lóbulos separados por um fino filamento filamento.. Os eosinófilos também apresentam as mesmas etapas evolutivas dos neutrófilos sendo o estágio de mielócito, da mesma forma que os basófilos, a primeira etapa reconhecível à microscopia ótica ótica.. Morfologia Leucocitária. Série Granulocitária. Granulocitária. Basófilo – As células da linhagem basofílica apresentam sua seqüência evolutiva análoga a linhagem neutrofílica neutrofílica.. No estágio de mielócito, quando a granulação específica começa a ser produzida, os precursores dos basófilos podem ser identificados identificados.. Todas as etapas se caracterizam pela presença marcante de grânulos grosseiros intensamente corados de azul ou negro. negro. Estão distribuídos por toda a célula, freqüentemente impedindo a visualização do núcleo. núcleo. Os basófilos estarão aumentados na circulação nas doenças mieloproliferativas e nos estados de hipersensibilidade e no hipotiroidismo hipotiroidismo.. 7 Morfologia Leucocitária. Série Linfocitária. Linfoblastos – Representam a mais imatura das células da linhagem linfóide. São células arredondadas com diâmetro que varia entre 10 a 20 mm. Existe uma grande variabilidade morfológica, mesmo numa mesma preparação. Podem ser encontradas células menores com núcleo redondo, cromatina densa e citoplasma escasso e, por outro lado, células grandes, com cromatina delicada, nucléolos evidentes e citoplasma moderado. A forma do núcleo dos linfoblastos é arredondada ou levemente convoluta e o citoplasma apresentaapresenta-se tipicamente escasso, moderadamente basofílico, geralmente agranular, podendo conter alguma granulação em alguns casos. Morfologia Leucocitária. Série Linfocitária. Linfócito – A maioria dos linfócitos exibe, em condições normais, características morfológicas bastante uniformes.. São células pequenas, redondas, com diâmetro entre 7 e 15 mm apresentando relação uniformes núcleo citoplasma de 5:1 a 2:1. Muitos apresentam núcleo pequeno com cromatina densa e levemente indentados.. Alguns linfócitos normais podem ser maiores e apresentar citoplasma mais abundante. indentados abundante. O nucléolo está ausente na maioria dos casos casos.. O citoplasma apresenta apresenta--se escasso, levemente azulado e agranular agranular.. Ocasionalmente a margem da célula pode exibir uma coloração azul mais intensa causada pelo dobramento do citoplasma durante a confecção da lâmina lâmina.. Algumas células apresentam uma região mais clara perinuclear. perinuclear. 8 Morfologia Leucocitária. Série Linfocitária. Grande linfócito granular – Estas células são grandes, com núcleo redondo, cromatina densa sem nucléolo aparente aparente.. O citoplasma é moderado ou abundante, claro ou levemente basofílico e contém vários grânulos azurofílicos grandes e distribuídos de modo desigual.. Estudos realizados com marcadores celulares mostram desigual que estas células são linfócitos T supressores, citotóxicos ou “natural killer” Morfologia Leucocitária. Série Linfocitária. Linfócito reativo (linfoplasmocitóide)– (linfoplasmocitóide)–Uma grande variedade de formas reativas têm sido descritas e podem ser observadas numa mesma amostra. São células de 10 a 25 mm com relação núcleo:citoplasma variando de 3:1 a 1:2. Apresentam núcleo redondo ou oval com cromatina moderadamente densa e raramente exibem nucléolo. O citoplasma é abundante de coloração azul cinzenta. Os grânulos, quando presentes, são pequenos e escassos. Freqüentemente estas células apresentam citoplasma amebóide que envolve parcialmente as células vizinhas exibindo as margens de coloração mais intensa por vezes exibindo uma região clara perinuclear. 9 Morfologia Leucocitária. Série Monocitária. Monócitos - Os monócitos maduros são maiores que os neutrófilos, 12 a 20 mm de diâmetro. A maioria apresenta forma arredondada com contorno suave podendo apresentar extensões citoplasmáticas semelhantes a pseudópodes. O citoplasma é abundante, cinza azulado podendo apresentar uma granulação extremamente fina e por vezes alguns vacúolos. A relação núcleonúcleo-citoplasma é de 4:1 a 2:1 e o núcleo assume formas variadas podendo apresentarapresentar-se dobrado ou torcido. A cromatina é condensada, porém mais delicada que a dos neutrófilos ou linfócitos. Raramente exibem esboço de nucléolo. Contagem diferencial. Parâmetros CLSI (lâminas normais e bem distribuídas). Avaliar a distribuição de leucócitos. Avaliar a distribuição e o número de plaquetas. 10 Contagem diferencial. Na borda da lâmina, realizar a contagem de 100 células. Avaliar a morfologia leucocitária. Neutrófilos hipersegmentados (> 5 lóbulos) Contagem diferencial. Vacuolização dos neutrófilos. 11 Contagem diferencial. Granulações grosseiras. Contagem diferencial. Corpúsculos de Döhle 12 Contagem diferencial. Variações morfológicas (ISLH). Pós--QT Pós Contagem diferencial. Linfócitos atípicos. 13 Contagem diferencial. Valores normais de linfócitos de acordo com a idade (x109 / l). Contagem diferencial. x109 / l Leucócitos Neutrófilos Linfócitos Monócitos Eosinófilos Nascimento 18,0 ± 8,0 4,0 a 14,0 3,0 a 8,0 0,5 a 2,0 0,1 a 1,0 3 dias 15,0 ± 8,0 3,0 a 5,0 2,0 a 8,0 0,5 a 1,0 0,1 a 2,0 1 mês 12,0 ± 7,0 3,0 a 9,0 3,0 a 16,0 0,3 a 1,0 0,2 a 1,0 2 meses 10,0 ± 5,0 1,0 a 5,0 4,0 a 10,0 0,4 a 1,2 0,1 a 1,0 3-6 meses 12,0 ± 6,0 1,0 a 6,0 4,0 a 12,0 0,2 a 1,2 0,1 a 1,0 1 ano 11,0 ± 5,0 1,0 a 7,0 3,5 a 11,0 0,2 a 1,0 0,1 a 1,0 2-6 anos 10,0 ± 5,0 1,5 a 8,0 6,0 a 9,0 0,2 a 1,0 0,1 a 1,0 6-12 anos 9,0 ± 4,0 2,0 a 8,0 1,0 a 5,0 0,2 a 1,0 0,1 a 1,0 Adultos 7,0 ± 3,0 2,0 a 7,0 1,0 a 3,0 0,2 a 1,0 0,02 a 0,5 14 Contagem diferencial. Variações morfológicas dos linfócitos normais. normais. Citoplasma abundante Neonatos Granulares Contagem diferencial. Variações morfológicas dos monócitos. monócitos. 15 Contagem diferencial. Parâmetros CLSI. Observar a presença de eritroblastos. Se mais de 10 / 100 leucócitos. leucócitos x 100 = Leucometria corrigida eritroblastos + 100 Contagem diferencial. Quando citar alterações morfológicas (ISLH) Morfologia eritrocitária - alterada em 2+/3 ou mais. Malária - qualquer achado deve ser considerado. Macroplaquetas e/ou agregados plaquetários - presença moderada ou intensa. Granulações tóxicas, corpos de Döhle e vacuolização citoplasmática. 16 Contagem diferencial. Na dúvida entre 2 estágios de maturação, opte pelo mais maduro. Compare as estimativas com a contagem eletrônica. Contagem diferencial. Bastões e segmentados (ISLH). 17 Marcos Fleury Laboratório de Hemoglobinas Faculdade de Farmácia – UFRJ [email protected] 18