Bioprospecção de estirpes formadoras de endosporos e produtoras

54º Congresso Brasileiro de Genética
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Resumos do 54º Congresso Brasileiro de Genética • 16 a 19 de setembro de 2008
Bahia Othon Palace Hotel • Salvador • BA • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2
Bioprospecção de estirpes formadoras
de endosporos e produtoras
de ciclodextrinas em amostras de solo
de cerrado e solo de floresta
Siqueira, SC; Vollú, RE; Mota, FF; Seldin, L
Laboratório de genética microbiana, Departamento de Microbiologia Geral, Instituto de Microbiologia, UFRJ
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A capacidade de produzir ciclodextrinas (CDs) está restrita a um pequeno grupo de bactérias que produz a enzima
extracelular CGTase (responsável pela síntese de CDs a partir de moléculas de amido). Dentre as bactérias que apresentam
essa característica encontram-se principalmente, estirpes dos gêneros Bacillus e Paenibacillus. Esse estudo teve como
objetivo, realizar a bioprospecção de estirpes formadoras de esporos em amostras de solo de cerrado e de floresta. Após
a pasteurização dos solos e plaqueamento em meio seletivo (TBN), foram isoladas 120 estirpes, sendo metade delas
de solo de cerrado e a outra metade do solo de floresta. Também foi avaliada a produção de amilases e de alfa-CDs e
gama-CDs por essas estirpes em meio sólido contendo amido (Horikoshi). Dentre estas, 40% produziram amilases
em meio Horikoshi, sendo 23 estirpes isoladas de solo de cerrado e 25 estirpes isoladas de solo de floresta. Entre as
48 estirpes produtoras de amilase, somente 21 estirpes isoladas do solo de floresta e 23 estirpes do solo de cerrado
produziram alfa-CDs e gama-CDs em meio Horikoshi contendo amido e os corantes diferenciais alaranjado de metila
(a-CDs) e verde de bromocrisol (gama-CDs). Além disso, as estirpes produtoras de CDs aqui isoladas e outras estirpes
pertencentes ao gênero Paenibacillus foram caracterizadas geneticamente através de BOX-PCR. Após a eletroforese
em gel de agarose dos fragmentos obtidos por PCR, foi detectada uma grande diversidade entre as estirpes. Foram
observados quatro grupos no dendrograma construído com base nos perfis genotípicos, onde as estirpes isoladas do solo
de cerrado se agruparam e ficaram separadas das estirpes do solo de floresta. A partir do perfil gerado no dendrograma e
da avaliação da produção de alfa-CDs e gama-CDs em placa foram selecionadas seis estirpes com um possível potencial
de produção de ciclodextrinas. As estirpes escolhidas foram caracterizadas fenotipicamente através do teste de Gram
para observação da morfologia celular e dos esporos. Foi realizado o teste bioquímico miniaturizado API 50CHB
assim como testes bioquímicos adicionais de degradação da caseína, redução de nitrato, crescimento em anaerobiose,
fermentação acetoínica (VP), crescimento em pH 5.7, e 5% e 10% de NaCl. Os resultados obtidos até o momento
revelaram que a estirpe F20 possui características bioquímicas semelhantes à espécie Paenibacillus polymyxa e que a
estirpe F8 se assemelhou à espécie Bacillus cereus. As seis estirpes selecionadas serão ainda caracterizadas genotipicamente
para complementar os resultados fenotípicos.