Análise morfológica e estrutural dos cromossomos equino extraído

51º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 51º Congresso Brasileiro de Genética • 7 a 10 de setembro de 2005
Hotel Monte Real • Águas de Lindóia • São Paulo • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 85-89109-05-4
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Palavras-chave: Citogenética, Eqüinos, Fibroblastos, Cultivo Primário
Lima Neto, JF; Fernandes, CB; Stella, ED; Landim-Alvarenga, FC
Departamento de Reprodução Animal e Radiologia Veterinária – FMVZ/UNESP, Botucatu-SP.
Análise morfológica e estrutural dos
cromossomos equino extraído a partir
do cultivo primário de fibroblastos
A cariotipagem ou estudo dos cromossomos do indivíduo, onde a área mais antiga é a citogenética, atua
diagnosticando alterações numéricas ou estruturais que podem ocorrer nos cromossomos dos animais.
Os cromossomos são estruturas lineares que contêm os genes do indivíduo e localizam-se no núcleo
das células. Em equinos domésticos, são encontrados 64 cromossomos nas células somáticas (células de
todos os tecidos do corpo, excluindo ovócitos e espermatozóides). Assim uma fêmea normal possui o
cariótipo 64 XX e um macho normal 64 XY, onde X e Y são os cromossomos sexuais. Foram utilizados
neste experimento 6 fêmeas eqüina, onde foram realizados cultivo primário de fibroblastos, a partir
de explants de pele destes animais, utilizando de meio de cultivo o DMEM (Gibco 11995-065) com
10% SFB. Duas passagens foram realizadas antes da congelação. As extrações dos cromossomos foram
realizadas antes e após congelação, com a formação de uma monocamada com 70% de confluência.
As lâminas foram coradas com Gimsa 10% por 10 minutos, após as lâminas foram lavadas com água
destilada e secadas ao ar, e analisadas em objetiva de imersão, como uma coloração convencional dos
cromossomos, permitindo assim uma identificação mais grosseira do cariótipo, não levando a uma
caracterização mais precisa do mesmo, com isto, outras técnicas de identificação foram utilizadas,
como o bandeamento G como uma técnica para diferenciação longitudinal dos cromossomos, o
bandeamento C como uma técnica para o estudo da heterocromatina constitutiva e o Hoeschst 33342
na detecção de regiões AT. Foram analisadas 15 metáfases de cada animal, onde o cariótipo padrão dos
animais estudados apresentou número diplóide 2n = 64 cromossomos. Os cromossomos autossômicos
se apresentaram na forma submetacêntrico e acrocêntrico. Com relação aos cromossomos sexuais, o
cromossomo X se apresentou na forma submetacêntrico. Foram detectados alterações estruturais do
tipo quebra cromossômica. Podemos concluir que a utilização da citogenética no análise morfológico e
estrutural dos cromossomos extraídos a partir do cultivo primário de fibroblastos eqüinos, foi eficaz como
umas das formas de análise genético destas células, podendo assim, nas condições de nosso laboratório,
desenvolver um banco de células eqüina que possibilite a utilização em pesquisas futuras.
Apoio financeiro: FAPESP e CNPq.
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