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Núcleo Núcleo - O ciclo de vida da célula Núcleo interfásico 1 - envoltório nuclear 2 - cromatina 3 - nucleoplasma 4 - nucléolo Núcleo em divisão Fases da Divisão: • Prófase • Metáfase • Anáfase • Telófase Núcleo interfásico 1 - Envoltório nuclear - EN Cisterna perinuclear http://micro.magnet.fsu.edu/cells/endoplasmicreticulum/endoplasmicreticulum.html 1 - Envoltório nuclear - EN Membrana externa: continuidade com RER 1 - Envoltório nuclear - EN Membrana interna: - face nucleoplasmática: lâmina nuclear (LN): rede de filamentos intermediários de proteínas laminas A, B, C - conferem forma e suporte estrutural ao envoltório nuclear ** destruição da LN leva à perda do EN e liberação do DNA. http://micro.magnet.fsu.edu/cells/nucleus/nuclearpores.html Laminas e formação do envoltório nuclear após divisão celular Núcleo interfásico 1 - envoltório nuclear 2 - cromatina 3 - nucleoplasma 4 - nucléolo 1 - Envoltório nuclear - EN Complexo do poro nuclear: mais de 50 tipos de proteínas em arranjo octogonal - NUCLEOPORINAS http://micro.magnet.fsu.edu/cells/endoplasmicreticulum/endoplasmicreticulum.html Quanto mais ativa a transcrição do núcleo, maior será o número de complexos do poro nuclear no envelope www.paterson.man.ac.uk/images/scb1.gif Exportação - proteínas, RNA - é mediada por receptores específicos. - Os RNAs são transportados juntos com proteínas , as quais possuem o sinal para exportação) Importação 9nm - proteínas polimerases (DNA, RNA), possuem um sinal de localização nuclear (SLN) - SLN reconhecido pela importina (proteína adaptadora) no citoplasma importina liga-se ao complexo do poro translocação para o núcleo Complexo do poro nuclear Núcleo interfásico 1 - envoltório nuclear 2 - cromatina 3 - nucleoplasma 4 - nucléolo 2 - Cromatina - Corresponde a toda porção do núcleo (exceto nucléolo) DNA + proteínas específicas (histonas e não-histonas) • Cromossomos: cromatina altamente compactada Grau de condensação: relação com o estado funcional Histonas: principais componentes protéicos da cromatina. Se ligam ao DNA pela interação de seus radicais amino com os radicais fosfato do DNA Nucleossomos unidade estrutural básica da cromatina: 200 pares de bases de DNA associados a um octâmero de histonas e à histona H1 -- H1 prende os 200 pares - “clip” 2 – Cromatina Proteínas não-histonas: Complexos de remodelamento da cromatina (usam energia de APT para mudar a estrutura dos nucleossomos) 1 - proteínas que participam da estrutura dos cromossomos; 2 - proteínas do processo de replicação e reparo do DNA; 3 - proteínas que ativam ou reprimem genes 2 – Cromatina 2 - Cromatina - nucleofilamentos (10 nm): 1° nível de compactação - solenóide (30 nm): 2° nível de compactação 2 - Cromatina Estados funcionais da cromatina - eucromatina: + clara, - condensada, ativo - heterocromatina: escura, + condensado, inativo - Células com metabolismo intenso refletem: . núcleos volumosos, . DNA com bases nitrogenadas disponíveis para serem lidas e codificar proteínas 2 - Cromatina Estados Funcionais do Núcleo Interfásico Núcleo Denso Núcleo Vesiculoso 2 - Cromatina Estados funcionais da cromatina - constitutiva: sequências gênicas altamente repetitivas que nunca são transcritas (telômero, centrômero,) 2 – Cromatina Corpúsculo de Barr Raspado de mucosa oral Sangue - facultativa: condensada em algumas células e descondensada em outras (cromossomo X nas femêas - apenas 1 é ativo) Procariotos Nucleóide Procariotos Dame, Mol Microbiol. 2005 Proteínas associadas ao nucleóide Procariotos Dame, Mol Microbiol. 2005 Núcleo interfásico 1 - envoltório nuclear 2 - cromatina 3 - nucleoplasma 4 - nucléolo 3 - Nucleoplasma Constituição: Solução aquosa de: • proteínas (DNA/RNA polimerases, topoisomerases, helicases) • RNAs, nucleotídeos; • íons Matriz nuclear: • estrutura fibrilar do núcleo, equivalente ao citoesqueleto; • ancora cromatina, enzimas, proteínas; 3 - Nucleoplasma Matriz nuclear: • estrutura fibrilar do núcleo, equivalente ao citoesqueleto; • ancora cromatina, enzimas, proteínas; 4 - Nucléolo • • • esférico, sem membrana, normalmente único síntese de rRNAs e demais subunidades do ribossoma (DNA com genes codificadores dos rRNAs) tamanho relacionado com o número de ribossomos que a célula está produzindo (síntese proteica) 4 - Nucléolo - centro fibrilar: + claro, + central. Contêm os genes ribossomais - componente fibrilar denso: envolve o centro fibrilar. Contêm os genes ribossomais que estão sofrendo transcrição e rRNA. -componente granular: com grânulos (rRNA + proteínas). Sítio de montagem ribosomal. Aula prática Núcleo vesiculoso em célula de alta atividade metabólica: cromatina frouxa, nucléolo e envoltório nuclear com poros Aula prática Nucléolo - região granular e fibrilar Aula prática Núcleo denso em célula de baixa atividade metabólica Aula prática Filamento de cromatina interfásica A e B – filamento de 10 nm C – filamento de 25 nm Aula prática Cromossoma metafásico sem histonas - MET Esqueleto de proteínas não-histônicas e alças de DNA Aula prática Metáfase - MET
