BIOLOGIA CELULAR E MOLECULAR Mestrado Integrado em Engenharia Biomédica 2009/2010 4. Informação e hereditariedade Organização dos genomas Replicação e reparação do DNA Fluxo de informação genética: do DNA à proteína Regulação da expressão genética e diferenciação celular Clonagem, sequenciação e análise de DNA – aplicações das tecnologias de DNA recombinante Composição e Estrutura do Material Genético Bibliografia: The Cell – A Molecular Approach (Fourth Edition) Geoffrey M. Cooper & Robert E. Hausman. ASM Press & Sinauer Associates, Inc. 2007. Ana Luísa Carvalho ([email protected]) O material genético é constituído por DNA Pneumococcus – estirpes virulentas têm capsula de polissacarídeos Avery, MacLeod & McCarty, 1944 H Terminal 5’ A Ligação fosfodiéster G 5’ ↓ 3’ T C A Terminal 3’ Chargaff, 1940-1950 •A composição em bases do DNA geralmente varia de espécie para espécie •DNA isolado de tecidos diferentes de um organismo tem a mesma composição em bases •A composição do DNA em bases é constante ao longo da vida de um indivíduo •Em todas as moléculas de DNA: A=T C=G A+C=G+T Rosalind Franklin & Maurice Wilkins, 1950 James Watson & Francis Crick, 1953 Purinas: A ou G Pirimidina: C ou T 2 nm Terminal 3’ Terminal 5’ A Cadeias de DNA •Antiparalelas •Complementares T Ligação fosfodiéster G 5’ ↓ 3’ C 3’ ↓ 5’ A T C G Ligação fosfodiéster A T Terminal 5’ Terminal 3’ Baixa humidade Nucleótidos purina/pirimidina alternados Desnaturação de DNA ⇒ ↑ A260 nm Absorção a 260 nm Diâmetro médio do núcleo uma célula eucariota: 10 µm Comprimento médio de um cromossoma: 105 µm 146 pb ~200 pb Compactação 7× Nucleossoma: Octómero de H2A, H2B, H3 e H4 Compactação 100× Compactação ~10000×