Enzimas de Restrição
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Carlos Sinogas 2016/17 Engenharia Genética EnzimasdeRestrição Carlos Sinogas Carlos Sinogas 2016/17 Engenharia Genética 2016/17 - Extracçãodo organismodador - Compatibilizaçãodeextremidades - Ligaçãoa vector - Transformaçãode Carlos Sinogas Engenharia Genética - DNA hospedeiro - Identificaçãode transformantes - Selecção - Preservação - Utilização 2016/17 virais - Restringem(cortam)osácidosnucleicos infeciosos G|AATTC Carlos Sinogas Engenharia Genética - Proteçãodasbactériascontrainfeções - ProtegemorespetivoDNApor modificação(metilação)nassequências dereconhecimento CC*AGG 2016/17 - - Carlos Sinogas Engenharia Genética - - TipoI - Complexas,multiméricas,combinação derestrição e modificação.CortamDNAde formarandom apartir da sequência dereconhecimento TipoII - AsENZIMASDERESTRIÇÃO TipoIII - Grandes,combinações derestrição emodificação.Cortamfora dasequência dereconhecimento.Raramentetêmdigestões completas. TipoIV - Grandes,combinações derestrição emodificação.Sequências de reconhecimentocontíguas oudescontínuas.Cortamfora da sequência dereconhecimento 2016/17 - Proteínaspequenas (muitodiversificadas) - Reconhecemsequências palindrómicas Contíguas(GAATTC) - Nãocontínuas(GCCNNNNNGGC) - Cortamemposiçõesdefinidas - Frequentementedentro,oumuitopróximo, dasequênciadereconhecimento - Nãotêmactividadedemodificação - Carlos Sinogas Engenharia Genética - Principaiscaraterísticasgenéricas 2016/17 Designação GÉNERO+espécie +(estirpe)+ordem dadescoberta - Hpa I/Hpa II - Carlos Sinogas Engenharia Genética - - Haemophilus parainfluenza EcoRI/Eco RII - Escherichia coli R 2016/17 Carlos Sinogas Engenharia Genética 5’ 3’ 5’G¯AATTC3’ G:AATTC G|AATTC GvAATTC EcoRI Sequênciaspalindrómicas 2016/17 5’G¯AATTC3’ - Carlos Sinogas Engenharia Genética - Reconhecimentode númeropar debases (4ou 6) - 4bases:fragmentosestatísticosde256nts - 6bases:fragmentosestatísticosde4096nts - Extremidadescoesivas - Sequênciaparticular - Purezaenzimática - Elevadaatividadeespecífica Carlos Sinogas 2016/17 Engenharia Genética Carlos Sinogas 2016/17 Engenharia Genética Isosquizómeros 2016/17 (mesmasequência,extremidadesnãocompatíveis) - Xma I(C|CCGGG)/Sma I(CCC|GGG) - Hpa II(C|CGG)/Msp I(C|CGG ;C|C*GG) - Carlos Sinogas Engenharia Genética - Isocaudómeros (diferentesequência,extremidadescompatíveis) - Bam HI(G|GATCC)/Sau 3AI(|GATC) Carlos Sinogas 2016/17 Engenharia Genética Carlos Sinogas 2016/17 Engenharia Genética Carlos Sinogas 2016/17 Engenharia Genética Carlos Sinogas 2016/17 Engenharia Genética Carlos Sinogas 2016/17 Engenharia Genética Carlos Sinogas 2016/17 Engenharia Genética Carlos Sinogas 2016/17 Engenharia Genética Carlos Sinogas 2016/17 Engenharia Genética Carlos Sinogas 2016/17 Engenharia Genética
