CARACTERIZAÇÃO MORFOLÓGICA DA CAMADA - Feis

CARACTERIZAÇÃO MORFOLÓGICA DA CAMADA
SINCICIAL DO VITELO (CSV) EM Brycon amazonicus.
Lima, F. P.1; Branco, G. S. 1; Siqueira-Silva, D. H. 1; Costa, R. S. 1; VeríssimoSilveira, R 1.,Ninhaus-Silveira, A. 1
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LINEO – Laboratório de Ictiologia Neotropical, Dep. Biologia e Zootecnia, FE/Unesp-Ilha Solteira.
Introdução
A espécie, Brycon amazonicus, vem se destacando na piscicultura nacional, e é
popularmente conhecido como matrinxã, este peixe habita a bacia amazônica onde é
importante na pesca comercial. Este tem sido considerado um promissor candidato para a
aquicultura devido ao seu elevado valor de mercado (ROMAGOSA et al., 2000), qualidade da
sua carne, boa adaptação ao cativeiro, crescimento rápido, e hábito alimentar onívoro
(WERDER & SAINT-PAUL, 1978; REIMER, 1982; ECKMANN, 1984; SAINT-PAUL, 1986.).
A criopreservação de células reprodutivas e embriões fazem parte de uma ciência que
possui um considerável conteúdo teórico. Desde a descoberta dos efeitos crioprotetores do
glicerol (POLGE et al, 1949), muitas experiências sobre a congelação e descongelação de uma
grande variedade de células e tecidos têm sido acumuladas (WATSON & HOLT, 2001).
Em estudos de criopreservação de embriões, o periblasto ou camada sincicial do vitelo
tem sido considerado como uma das principais barreiras para a permeabilidade da água e de
crioprotetores (ZANG & RAWSON, 1998; HAGEDORN et al, 1997) e para o sucesso do
desenvolvimento de técnicas de criogenia para embriões de peixes (NINHAUS-SILVEIRA et al.
2006)
A camada sincicial do vitelo (CSV) é um sincício citoplasmático, localizado entre a
blastoderme e o vitelo, que ao final do estágio de gástrula envolverá completamente a vesícula
vitelínica. Sendo responsável por disponibilizar o vitelo para as células do embrião, regulando a
entrada e saída de substâncias do saco vitelino (TRINKAUS, 1951; DEVILLERS, 1961;
TRINKAUS, 1993 ; NINHAUS-SILVEIRA, 2004).
Considerando a importância do conhecimento das características da CSV para o
desenvolvimento de técnicas de criopreservação de embriões de peixes e que para a espécie
em questão não existe nenhum estudo pormenorizado sobre o assunto, este trabalho visou à
análise das características estruturais da CSV.
Material e Métodos
Para obtenção dos embriões, foram utilizados exemplares adultos e maduros de
Brycon amazonicus, reprodutores pertencentes ao plantel existente no Centro de Pesquisa e
Gestão de Recursos Pesqueiros Continentais – CEPTA/ICMBIO, em Pirassununga - SP. As
fêmeas foram induzidas hormonalmente a ovocitação com solução bruta de hipófise de carpa,
receberam duas aplicações nas dosagens de 0,5 mg e 5 mg/Kg de peso vivo, respectivamente,
com intervalos de 10 horas. Após aproximadamente 10 horas da ultima dosagem indutora, foi
efetuada a extrusão dos ovócitos e a retirada do sêmen através de massagens abdominais.
Para a fertilização foi utilizado o método “a seco” e os ovos incubados em incubadora vertical à
temperatura de 26º C.
Para analise da (CSV), foram coletadas amostras de embriões em diferentes períodos
da embriogênese. As primeiras coletas foram realizadas em intervalos de 15 minutos até as
primeiras 2 horas iniciais do desenvolvimento embrionário, após em intervalos de uma hora até
momento da eclosão das larvas. Os embriões foram fixados em solução de Karnovsky
modificada, por um período de 24 horas, e em seguida, foram colocadas em álcool 70%. O
material foi posteriormente incluído em historesina (Histotec) e submetido à microtomia. Após a
montagem das lâminas histológicas o material foi analisado no Laboratório de Ictiologia
Neotropical (LINEO), do Departamento de Biologia e Zootecnia da FE/ UNESP de Ilha Solteira.
Resultados
A camada sincicial do vitelo (CSV) em Brycon amazonicus começou a ser formada ao
final do estágio de clivagem (mórula) e início do estágio de blástula.
A princípio, a CSV é uma camada citoplasmática (CC) que envolve toda a vesícula
vitelina. A partir da fase de mórula as células com clivagem incompleta que estão em contato
com a CC liberam para o seu interior seus núcleos e organelas. Com o prosseguimento do
processo de embriogênese estes vão se replicando e formando uma camada sincicial a CSV.
No estágio de gástrula com o estabelecimento dos movimentos morfogenéticos, principalmente
o de epibolia, está vai se expandido, junto com o crescimento da blastoderme, até percorrer o
perímetro do vitelo fechando o blastóporo e formando o tampão vitelínico.
A camada sincicial do vitelo no matrinxã foi observada na fase de blástula formando às
margens do blastoderme uma configuração de um anel ao seu redor e que seus núcleos
ficavam mais nítidos ao longo do desenvolvimento da gástrula.
A análise feita sob microscopia de luz não permite evidenciar a existência de
membranas que a separam da blastoderme e do vitelo, mas são observados glóbulos de vitelo
fragmentados no seu citoplasma. Não foi possível observar a passagem dos glóbulos para os
blastômeros, mas o vitelo é observado dentro das células embrionárias.
Discussão
As características da camada sincicial do vitelo da espécie em estudo apresentou
características semelhantes às descritas para Prochilodus lineatus (NINHAUS-SILVEIRA,
2006) e Brycon orbignyanus (GANECO et al, 2003). KIMMEL et al. (1995) afirmou que a
camada sincicial é um órgão único de teleósteos, compondo uma estrutura extra-embrionária,
portanto, não relacionados com a formação do corpo do embrião. Essa camada de células,
também chamado periblasto, se diferencia das outras células da blastoderme por apresentar
uma maior afinidade basofílica (BALINSKY, 1970 citado por GANECO et al, 2003).
O fato de o núcleo tornar-se mais nítido com o desenvolvimento foi atribuído ao
metabolismo celular ser menos intenso do que no estágio de clivagem no qual as divisões
celulares são muito intensas e rápidas.
As características morfológicas observadas para a CSV de B. amazonicus, corroboram
as observações de TRINKAUS, 1993 e NINHAUS-SILVEIRA et al., 2007 que consideram que
esta camada é a responsável pelo controle e disponibilização de nutrientes do vitelo para as
células do embrião.
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