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DIVERSIDADE DE FUNGOS MICORRIZICOS ARBUSCULARES
(FMA) EM SOLO CULTIVADO COM FEIJÃO CAUPI [VIGNA
UNGUICULATA (L.) WALP.] E FIBRA DE COCO
JULIANA SOUZA DE PONTES
RECIFE
FEVEREIRO/2013
UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO
CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
DEPARTAMENTO DE MICOLOGIA
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM BIOLOGIA DE FUNGOS
DIVERSIDADE DE FUNGOS MICORRIZICOS ARBUSCULARES
(FMA) EM SOLO CULTIVADO COM FEIJÃO CAUPI [VIGNA
UNGUICULATA (L.) WALP.] E FIBRA DE COCO
Dissertação apresentada ao Programa de PósGraduação em Biologia de Fungos do
Departamento de Micologia do Centro de
Ciências Biológicas da Universidade Federal
de Pernambuco, como parte dos requisitos
para obtenção do título de Mestre em Biologia
de Fungos.
Área de Concentração:Micologia Aplicada
Nome: Juliana Souza de Pontes
Orientadora: Leonor Costa Maia
Co-orientador a: Adriana M. Yano-Melo
RECIFE
FEVEREIRO/2013
Catalogação na fonte
Elaine Barroso
CRB 1728
Pontes, Juliana Souza de
Diversidade de fungos micorrízicos arbusculares (FMA) em solo
cultivado com feijão-caupi [Vigna unguiculata (L.) Walpa.] e fibra de coco/
Juliana Souza de Pontes– Recife: O Autor, 2013.
77 folhas : il., fig., tab.
Orientadora: Leonor Costa Maia
Coorientadora: Adriana M. Yano-Melo
Dissertação (mestrado) – Universidade Federal de Pernambuco,
Centro de Ciências Biológicas, Biologia de Fungos, 2013.
Inclui bibliografia
1. Micorriza 2. Feijão-caupi 3. Solo I. Maia, Leonor Costa (orientadora)
II. Yano-Melo, Adriana M. (coorientadora) III. Título
632.4
CDD (22.ed.)
UFPE/CCB- 2013- 322
DIVERSIDADE DE FUNGOS MICORRIZICOS ARBUSCULARES
(FMA) EM SOLO CULTIVADO COM FEIJÃO CAUPI [VIGNA
UNGUICULATA (L.) WALP.] E FIBRA DE COCO
JULIANA SOUZA DE PONTES
Data da defesa: 27/02/2013
COMISSÃO EXAMINADORA
MEMBROS TITULARES
_______________________________
Dra. Leonor Costa Maia (Orientadora)
Universidade Federal de Pernambuco
______________________________________________
Dra. Sandra Farto Botelho Trufem – Examinador Externo
Instituto de Botânica, São Paulo
______________________________________
Dr. Bruno Tomio Goto – Examinador Externo
Universidade Federal do Rio Grande do Norte
O temor do SENHOR é o princípio da sabedoria,
e o conhecimento do Santo a prudência.
Provérbios 9:10
Aos meus pais Juracy e Antonio,
ao meu irmão Wellington e ao meu noivo Juari.
Dedico
Agradecimentos
Ao meu Deus, por ser pai e amigo fiel e estar comigo sempre, principalmente nos
momentos mais difíceis da minha jornada e ter me dado força para vencer mais esta etapa
da minha vida, quando poucas pessoas acreditavam em mim.
Aos meus pais, Antonio Bernardo de Pontes e Maria Juracy de Souza, por todo
amor demonstrado durante a vida e pela compreensão e força para que eu pudesse
concretizar mais um sonho. Á minha mãe em especial, por ter sido um exemplo de vida
para mim, por ter vencido todos os obstáculos da vida para me dar uma boa educação,
mesmo sem condições e se estou aqui hoje é graças a ela.
Ao meu tio Carlos Antonio, por todo apoio e amizade na minha caminhada, ele é
como um pai.
Ao meu querido irmão Wellington pela amizade e carinho e pelas brincadeiras no
decorrer do trabalho.
Ao meu noivo, Juari de Santana, pelos momentos de distração proporcionados, pelo
grande amor e, principalmente, pela compreensão que teve por mim, nos momentos de
estudo e estresse, sempre ao meu lado me apoiando e se alegrando com minhas conquistas.
À Universidade Federal de Pernambuco, pela contribuição à minha formação ao
nível de pós-graduação.
Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq), pelo
apoio financeiro no decorrer do trabalho e pela bolsa de estudos.
À professora e orientadora Dra. Leonor Costa Maia, pela orientação, confiança e
apoio na execução deste trabalho.
À professora Dra. Adriana Mayumi Yano-Melo, pela co-orientação, contribuição
no trabalho e apoio durante as viagens à Petrolina para as coletas.
Ao professor Gladstone Alves da Silva, pela a orientação durante a iniciação e ter
me recebido no Laboratório de Micorrízas.
As professoras Uided Maaze e Elaine Malosso, por todo apoio e ensino.
Aos amigos Catarina Melo e Nicácio Freitas, pela constante disponibilidade,
paciência e ensinamentos dentro do laboratório.
Aos professores Fritz Oehl e Bruno Goto, pelo treinamento e suporte na
identificação das espécies de FMA.
Aos colegas de Petrolina que me ajudaram nas coletas e demais atividades: Jorge
Leal, Amando Vieira, Percivaldo Resende, Tânia Ferro, Daniel Vieira, Karen Mirella,
Aline Passos, Tomás Azevedo, Michelline Silverio, João Ricardo e de Recife Vera Lúcia e
Lucas Souza.
Aos amigos e verdadeiros irmãos da minha turma da graduação e companheiros de
pós-graduação Frederico Marinho, Iolanda Ramalho, Juliana Pereira, Laís Lima, Reginaldo
Neto, Vera Lúcia, e Thaís Thiane, pelos momentos felizes que vivemos juntos, pelo
convívio e amor demonstrado, e ajuda durante a elaboração das atividades no laboratório.
Ao suporte e amizade de Larissa Vieira e Roberta Feitosa que me ajudaram na
realização dos trabalhos.
Aos amigos Inácio Pascoal, Vilma Santos, Indra Escobar, Camilla Maciel e
Danielle Karla, pela contribuição nos trabalhos realizados no laboratório.
A todos os colegas e amigos do Laboratório de Micorrízas: Ângelo Souto, Araeska
Carenna, Anuska Almeida, Renata Souza, Danielle Magna, Edvaneide Leandro, Isabela
Gonçalves, Bruno Velez, Joana Suassuna, Adelmo Vieira, Rejane Silva, Ingrid Lino,
Natália Souza, Heloísa Silva, Mayra Oliveira, Moacir Alcantara, Débora Santos, Daniela
Tenorio e João Jorge.
Às amigas Marilene Cecília e Josiane Freitas, pelo carinho e apoio espiritual
demonstrado. E pelas orações do meu presbítero Rinaldo Silva e meu amigo Carlos
Henrique.
A todos aqueles que ajudaram, direta ou indiretamente, na realização deste
trabalho.
RESUMO GERAL
O feijão caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp.] é uma cultura de grande importância para o
Brasil, terceiro maior produtor mundial, sendo amplamente cultivado na região Nordeste
devido às características adaptativas a condições adversas, constituindo a base da
alimentação humana e animal. O conhecimento sobre a ocorrência de espécies de fungos
micorrízicos arbusculares (FMA) em áreas naturais e cultivadas é importante para
preservação e compreensão da funcionalidade desses fungos nos solos, visando o aumento
da produtividade e a sustentabilidade dos ecossistemas terrestres. Para otimizar a produção
e minimizar os impactos gerados pela agricultura, fontes de matéria orgânica, como fibra
de coco e esterco bovino vêm sendo utilizados, sendo importante conhecer os efeitos
desses insumos sobre a comunidade de FMA. Os objetivos deste trabalho foram: ampliar o
conhecimento sobre os FMA na Caatinga e em cultivo de caupi, determinando se a adição
de substratos ao solo influencia a diversidade e a infectividade desses fungos. Amostras de
solo rizosférico (Argissolo Amarelo) foram coletadas no Campus de Ciências Agrárias da
Univasf em Petrolina/PE, provenientes de: Caatinga natural onde predomina Mimosa
tenuiflora (área de referência); área antes de cultivo (pousio), e depois cultivada com feijão
caupi recebendo doses crescentes (0, 12, 24, 48 t ha-1) de fibra de coco, e adubadas com 10
t ha-1 de esterco, totalizando seis tratamentos. Foram realizadas três coletas: a primeira (I)
de reconhecimento (tempo zero), antes do plantio e na área de referência, a segunda e a
terceira (II e III) no final do 1º e do 2º ciclos de cultivo de feijão caupi (80 dias, até o
período de frutificação) e na área de referência. O delineamento na área de plantio foi em
blocos ao acaso com quatro tratamentos (0, 12, 24, 48 t ha-1 de fibra de coco) e cinco
repetições. Em cada área/tratamento foram coletadas cinco amostras compostas
constituídas por seis subamostras. Para avaliar a comunidade de FMA foram observados:
riqueza e diversidade de espécies, frequência de ocorrência, equitabilidade, número de
glomerosporos e de propágulos infectivos de FMA, colonização micorrízica e proteínas do
solo relacionadas à glomalina (PSRG). Foram registrados 61 táxons de FMA, distribuídos
em 18 gêneros, com predominância de Glomus e Acaulospora. A área de Caatinga
apresentou maior riqueza de espécies (42), mas os índices de diversidade foram similares
entre as áreas estudadas. A colonização micorrízica e a quantidade de PSRG foram
menores nas áreas cultivadas com feijão caupi quando comparadas à área de Caatinga.
Houve aumento da esporulação após a conversão da área de pousio em plantio. Os
propágulos infectivos de FMA, em geral, foram afetados negativamente pela atividade
agrícola, porém houve tendência para a recuperação com estabelecimento do cultivo. A
diferença nas comunidades de FMA entre a área natural e a cultivada indica que algumas
espécies são mais sensíveis às perturbações que ocorrem no solo devido às práticas
agrícolas. O cultivo de feijão caupi e a utilização de substratos orgânicos favorecem a
riqueza e a diversidade de FMA quando comparadas a áreas de pousio.
Palavras-chave: micorriza arbuscular, monocultivo, matéria orgânica, Caatinga.
ABSTRACT
Cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.] is an important crop in Brazil, the third largest
producer in the world and is widely cultivated in the Northeast due to adaptive traits to
adverse conditions, forming the basis of the food and feed. The knowledge about the
occurrence of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) in natural and cultivated areas is
important for preservation and understanding of the functionality of these fungi to increase
soil productivity and sustainability of the terrestrial ecosystems. To optimize production
and minimize the impacts generated by agriculture, organic materials such as coconut fiber
and manure have been used, and it is important to know the effect of these substrates on
the community of AMF. The objectives of this study were to: increase knowledge about
the FMA in Caatinga areas and cowpea plantations, determining whether the addition of
substrates to the soil influences the diversity and infectivity of these fungi. Rhizosphere
soil (Ultisol) samples were collected at the Campus de Ciências Agrárias – Univasf,
Petrolina/PE, from native Caatinga, where Mimosa tenuiflora predominates (reference
area), area before cultivation (fallow), and later cultivated with cowpea, receiving doses of
0, 12 , 24, 48 t ha-1 of coconut fiber, all fertilized with 10 t ha-1 of cow manure, totaling six
treatments. Three collections were performed: the first (I) of recognition (at time zero)
before planting and in the reference area, the second and the third (II and III) at the end of
the 1st and 2nd cycles of cowpea (80 days, at fruiting period) and in the reference area. The
design in the cultivated field was a randomized block design with four treatments (0, 12,
24, 48 t ha-1 coconut fiber) and five replicates. In each area/treatment five mixed samples
were collected, each one formed by six subsamples. To assess the community of AMF:
richness and diversity of species, frequency of occurrence, equitability, number of
glomerospores and propagules of AMF, mycorrhizal colonization and soil-related protein
glomalin (PSRG) were evaluated. Sixty one 61 taxa of AMF were identified, in 18 genera,
with a predominance of Glomus and Acaulospora. The reference area showed the highest
species richness (42), while the diversity indexes were similar among the studied areas.
Mycorrhizal colonization and content of PSRG decreased with agricultural practices. There
was an increase of the sporulation after conversion of the fallow area for planting. In
general, the AMF infective propagules were negatively affected by agricultural activity,
although there was a trend to recovery with establishment of cultivation. The difference in
AMF communities between natural and cultivated areas indicates that these fungi are
affected by soil disturbance caused by agricultural practices. The cowpea crop allied to the
utilization of organic substrates favored the richness and diversity of AMF compared to the
fallow area.
Keywords: arbuscular mycorrhiza, monoculture, organic matter, Caatinga.
Lista de figuras
Capítulo 2
Pág.
Figura 1. Corte longitudinal do coco com a descrição de suas partes........................ 21
Figura 2. Estruturas de FMA formadas durante a simbiose: a) arbúsculo; b)
micélio interno (MI), vesículas (V), micélio externo (ME) e arbúsculos (A)............ 24
Capítulo 3
Figura 1. Dendrograma baseado em Sørensen representando o índice de
similaridade de espécies de fungos micorrízicos arbusculares, entre as áreas
estudadas Caatinga, pousio e cultivadas com feijão caupi e fibra de coco nas
concentrações 0 t ha-1(F+0), 12 t ha-1(F+12), 24 t ha-1 (F+24) e 48 t ha-1(F+48)
todas adubadas com esterco bovino (exceto a Caatinga e o pousio), em Petrolina,
PE............................................................................................................................... 45
Figura 2. Resultado do NMS baseado na composição das espécies de fungos
micorrízicos arbusculares correlacionada com as propriedades físicas e químicas
de amostras de solo de áreas de Caatinga, pousio e cultivadas com feijão caupi e
fibra de coco nas concentrações 0 t ha-1(1), 12 t ha-1(2), 24 t ha-1(3) e 48 t ha1(4) todas com esterco (exceto a Caatinga e o pousio), em Petrolina,
PE............................................................................................................................... 46
Figura 3. Espécies de fungos micorrízicos arbusculares consideradas novas para a
ciência: a) Acaulospora sp.1, b) Acaulospora sp.5, c) Glomus sp.1, d) Glomus
sp.6, e) Pacispora sp.1 e f) Paraglomus sp.1............................................................. 50
Capítulo 4
Figura 1. (A) área em pousio, (B) aspecto da área após a retirada da vegetação,
(C) e (D) primeiro e segundo ciclos de feijão caupi, (E) e (F) aspecto da Caatinga
em regeneração, em Petrolina, PE.............................................................................. 56
Figura 2. Densidade de esporos de fungos micorrízicos arbusculares em áreas de
Caatinga (CA) e área antes do cultivo (I coleta), áreas cultivadas com feijão caupi
e fibra de coco nas concentrações 0 t ha-1(F+0), 12 t ha-1(F+12), 24 t ha-1(F+24)
e 48 t ha-1(F+48) e 10 t ha-1 de esterco (II e III coleta), em Petrolina,
PE............................................................................................................................... 60
Figura 3. Colonização micorrízica em raízes de plantas da área de Caatinga (CA)
e antes do plantio (gramíneas espontâneas) (I coleta), áreas cultivadas com feijão
caupi e fibra de coco nas concentrações 0 t ha-1(F+0), 12 t ha-1(F+12), 24 t ha1(F+24) e 48 t ha-1(F+48) e 10 t ha-1 de esterco (II e III coleta), em Petrolina,
PE............................................................................................................................... 61
Figura 4. Proteínas do solo relacionadas à glomalina fração facilmente extraível
(A) e total (B) em solos de área de Caatinga (CA) e área antes do cultivo (I
coleta), áreas cultivadas com feijão caupi e fibra de coco nas concentrações 0 t ha1
(F+0), 12 t ha-1(F+12), 24 t ha-1(F+24) e 48 t ha-1(F+48) e 10 t ha-1 de esterco (II
e III coleta), em Petrolina, PE.................................................................................... 62
Lista de tabelas
Capítulo 2
Pág.
Tabela 1. Composição da fibra e do pó de coco......................................................... 22
Tabela 2. Densidade de esporos, riqueza e diversidade de espécies de fungos
micorrízicos arbusculares em diferentes sistemas de cultivo..................................... 28
Capítulo 3
Tabela 1. Caracterização química e física do solo em área de Caatinga, área em
pousio e áreas cultivadas com feijão caupi e concentrações de fibra de coco como
cobertura do solo e adubadas com 10 t ha-1 de esterco bovino (exceto a Caatinga e
pousio), em Petrolina, PE........................................................................................... 40
Tabela 2. Espécies de FMA com a frequência de ocorrência (FO) e frequência
relativa (FR), registradas em campo (C) em área de Caatinga, área em pousio e
áreas cultivadas com feijão caupi e concentrações de fibra de coco como cobertura
do solo e adubadas com 10 t ha-1 de esterco bovino (exceto a Caatinga e pousio),
em Petrolina, PE......................................................................................................... 42
Tabela 3. FMA: Número de espécies (N), esporos (E), índices de diversidade de
Shannon (H’) e de Margalef (d), equitabilidade de Pielou (J’) em áreas de
Caatinga (referência), pousio e áreas cultivadas com feijão caupi e concentrações
de 0, 12, 24 e 48 t ha-1 de fibra de coco como cobertura do solo e adubadas com
10 t ha-1 de esterco bovino (exceto a Caatinga e o pousio), em Petrolina, PE.......... 45
Tabela 4. Valores de Significância com base no teste estatístico MRPP por
comparação da composição de espécies de FMA entre as áreas, Caatinga, pousio,
áreas cultivadas com feijão caupi e concentrações de fibra de coco 0 t ha-1(F+0),
12 t ha-1(F+12), 24 t ha-1(F+24) e 48 t ha-1(F+48) todas com esterco bovino
(exceto a Caatinga e o pousio), em Petrolina, PE ..................................................... 46
Tabela 5. Coeficientes de correlação (r) entre as variáveis do solo e escores dos
Eixos 1 e 2 da ordenação ........................................................................................... 47
Tabela 6. Espécies de fungos micorrízicos arbusculares indicadoras das áreas de
estudo, valor de indicação (ID) e nível de significância p......................................... 48
Capítulo 4
Tabela 1. Caracterização química e física do solo em área de Caatinga, área em
pousio e áreas cultivadas com feijão caupi e concentrações de fibra de coco como
cobertura do solo e adubadas com 10 t ha-1 de esterco bovino (exceto a Caatinga e
pousio), em Petrolina, PE............................................................................................... 59
Tabela 2. Número mais provável (NMP) de propágulos infectivos de fungos
micorrízicos arbusculares (FMA) em solos de área de Caatinga, em pousio, áreas
cultivadas com feijão caupi e concentrações de fibra de coco e esterco bovino, em
Petrolina, PE............................................................................................................... 61
Tabela 3. Coeficiente de correlação de Pearson entre as variáveis biológicas e os
atributos do solo.............................................................................................................. 63
SUMÁRIO
Pág.
1. INTRODUÇÃO .................................................................................................... 15
2. FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA......................................................................... 17
2.1. Bioma Caatinga................................................................................................... 17
2.2. Feijão Caupi........................................................................................................ 18
2.3. Utilização de Substratos Orgânicos na Agricultura............................................ 19
2.4. Fungos Micorrízicos Arbusculares...................................................................... 23
2.5. Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares............................................ 25
2.6. Fungos Micorrízicos Arbusculares em Agrossistemas....................................... 28
2.7. Feijão Caupi e Fungos Micorrízicos Arbusculares............................................. 30
2.8. Adubos Orgânicos e Fungos Micorrízicos Arbusculares.................................... 31
3. DIVERSIDADE DE FUNGOS MICORRÍZICOS ARBUSCULARES (FMA)
EM SOLOS CULTIVADOS COM FEIJÃO-CAUPI [VIGNA UNGUICULATA
(L.) WALP.] UTILIZANDO FIBRA DE COCO COMO COBERTURA MORTA,
PRÁTICAS AGRÍCOLAS SUSTENTÁVEIS EM CONDIÇÕES SEMIÁRIDAS..................................................................................................................... 33
Resumo....................................................................................................................... 33
Introdução................................................................................................................... 34
Material e métodos..................................................................................................... 36
Resultados.................................................................................................................. 41
Discussão.................................................................................................................... 48
Conclusões ................................................................................................................ 51
4. DINÂMICA DE PROPÁGULOS DE FUNGOS MICORRÍZICOS
ARBUSCULARES (FMA) EM CULTIVO DE FEIJÃO CAUPI [VIGNA
UNGUICULATA (L.) WALP.] COM FIBRA DE COCO........................................ 53
Resumo....................................................................................................................... 53
Introdução................................................................................................................... 54
Material e métodos..................................................................................................... 55
Resultados.................................................................................................................. 60
Discussão.................................................................................................................... 63
Conclusões ................................................................................................................ 66
5. CONSIDERAÇÕES GERAIS............................................................................... 67
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ...................................................................... 68
15
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
1. INTRODUÇÃO
O bioma Caatinga ocupa uma área de aproximadamente 800.000 Km2 abrangendo
os estados da Bahia, Sergipe, Alagoas, Pernambuco, Paraíba, Rio Grande do Norte, Ceará,
Piauí e o norte de Minas Gerais, o que representa 11 % do território nacional e 70 % da
região Nordeste (MMA, 2002). Esse bioma, exclusivamente brasileiro, apresenta clima
semiárido e vegetação arbórea arbustiva, com elevado grau de endemismo (Prado, 2003).
A Caatinga vem sendo devastada para implantação de culturas agrícolas, além de
ser utilizada para práticas pecuárias, o que acarreta processos de desertificação (Sampaio et
al., 2005), ocasionado perda da biodiversidade e impactos diretos no solo, como a erosão.
Por outro lado, há necessidade de aumento da produção agrícola de forma sustentável, para
que os impactos ao ambiente sejam minimizados. Em Pernambuco, um dos pólos mais
promissores na produção agrícola encontra-se na região de Petrolina, onde a fruticultura
irrigada tem grande potencial de exportação (Oliveira e Farias Filho, 2012).
Entre as culturas de interesse econômico destaca-se o feijão caupi [Vigna
unguiculata (L.) Walp.], também conhecido como feijão de corda ou feijão macassar.
Devido ao valor proteico, o caupi é utilizado na alimentação humana na forma de grãos
secos ou verdes e como vagens, mas seus ramos e folhas também são utilizados na
alimentação animal (Silva e Freire Filho, 1999). A leguminosa é amplamente cultivada na
região Nordeste devido às características adaptativas a condições adversas, como suportar
altas temperaturas, salinidade e baixa disponibilidade de água (Sousa, 2006).
A agricultura comercial e a pastagem interferem na dinâmica do solo afetando os
micro-organismos, entre os quais se destacam os fungos micorrízicos arbusculares (FMA)
que formam associação simbiótica com a maioria das plantas terrestres, aumentando a área
de absorção das raízes e proporcionando melhorias no crescimento, além de promover
maior tolerância a estresses bióticos e abióticos. O benefício da micorrização é conhecido
para diversas culturas de importância econômica, entre as quais: uva (Matsuoka et al.,
2002; Krishna et al., 2005), acerola (Costa et al., 2001), milho (Carrenho et al., 2001) e
feijão (Cruz e Martins, 1997).
Para aumento da produtividade das culturas, substratos alternativos vêm sendo
utilizados com objetivo de minimizar o uso de fertilizantes químicos, melhorar a drenagem
do solo, e aumentar a qualidade dos produtos (Fontes et al., 2004). Como exemplo, a fibra
e o pó do coco (Cocos nucifera L.) são substratos ricos em nutrientes têm capacidade de
reter umidade do solo, entre outros benefícios (Rosa et al., 2001), o esterco animal que
16
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
aumenta a aeração, a permeabilidade e diminuição da compactação do solo, além do
aumentar o conteúdo de matéria orgânica, favorecendo a atividade microbiológica e
aumentando a disponibilidade de nutrientes do solo para os vegetais (Garrido et al., 2008).
Estudos com a inoculação de FMA e culturas com substratos orgânicos têm
demonstrado que os maiores valores de colonização micorrízica, e de benefício para os
hospedeiros, são encontrados em níveis abaixo de 30 % da fibra de coco, sugerindo que
altos níveis podem ser prejudiciais para o vegetal e para a comunidade de FMA (Monteiro
et al., 2009; Silva Júnior et al., 2006 e 2010). A inoculação com FMA em feijão caupi tem
demonstrado aumento na tolerância à salinidade (Tavares et al., 2009), incremento na
matéria seca da parte aérea (Silva et al., 2009) e alto nível de colonização radicular
(Fernandes et al., 2008).
A diversidade de FMA ainda é pouco conhecida; existem cerca de 230 espécies
descritas (Oehl et al., 2011) é possível que esse número seja muito maior, pois segundo
Souza et al. (2008), relacionando a riqueza de plantas e de FMA, é possível supor que a
diversidade do filo possa variar entre 37.000 a 78.000 espécies, assim, ainda há muito a
descobrir a respeito dos FMA. No Brasil foram registradas aproximadamente 120 espécies
(Souza et al., 2010), o que corresponde a mais de 54 % do total, e para a Caatinga, foram
identificadas 79 espécies, a maior parte em agrossistemas (Maia et al., 2010, Goto et al.,
2010).
Considerando os processos de degradação da Caatinga para implementação de
culturas de interesse econômico e diante das lacunas em estudos sobre a diversidade de
FMA e sua interação com substratos orgânicos, foram testadas as hipóteses de que a
mudança da área de Caatinga em plantio é prejudicial aos FMA e que área cultivada com
feijão caupi com esterco bovino e baixa concentração de fibra de coco apresenta maior
diversidade e atividade de FMA. Com isso objetiva-se ampliar o conhecimento sobre os
FMA em solos cultivados com feijão caupi no semiárido, proporcionando subsídios para
aplicação biotecnológica desses organismos na produção agroflorestal e recuperação de
áreas degradadas, entre outros benefícios.
17
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
2. FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA
2.1. Bioma Caatinga
Bioma exclusivamente brasileiro, a Caatinga ocupa área de 800 mil km2,
correspondendo a 11 % do território nacional e 70 % da Região Nordeste, se estendendo do
Piauí ao norte de Minas Gerais (Drummond et al., 2000). Apesar de tão amplo, esse é
provavelmente o bioma mais desvalorizado e pouco conhecido no Brasil (Silva et al.,
2004). O nome “caatinga” é de origem tupi-guarani e significa “floresta branca”, o que
caracteriza o aspecto da vegetação na estação seca, quando as folhas caem e apenas os
troncos brancos e brilhosos das árvores e arbustos permanecem (Prado, 2003).
As características da Caatinga incluem clima quente semiárido, com altas
temperaturas durante todo o ano variando entre 26 a 28ºC, com algumas áreas alcançando
os 40ºC muito facilmente, precipitação mal distribuída concentrada em meses
consecutivos, variando de 500 a 700 mm ao longo do ano (Prado, 2003) e baixa umidade
relativa em torno de 50 % (Menezes et al., 2012).
Os solos da Caatinga são os mais variáveis do país, devido a efeitos advindos da
erosão geológica e descobrimento das camadas até o aparecimento das rochas, formando
áreas recobertas por pedras e pedregulhos. Esses solos podem ser classificados em rasos
(como os Neossolos litólicos), intermediários, com 1m de profundidade (como o Neossolo
Regolítico, os Luvissolos e os Planossolos) e bem profundos (como o Neossolo
Quartzarênico). Esses solos também diferem quanto à textura, segundo o material de
origem, sendo arenosos como o Neossolo Quartzarênico e argilosos como Vertissolos e
Argissolos (Sampaio, 2010).
Em relação aos nutrientes, em geral os solos do semiárido são pouco férteis, com
deficiência em fósforo e nitrogênio, porém os valores diferem com relação ao tipo de solo
até mesmo dentro da mesma ordem. Alguns são férteis e outros podem até ter nutrientes,
mas na forma de reserva não disponíveis para as plantas, sendo necessária adubação para
introdução desses nutrientes (Araújo et al., 2008 b).
A Caatinga é caracterizada por alto grau de endemismo florístico e particularidades
dos diferentes tipos de vegetação. Prado (2003) mencionou 14 gêneros e 183 espécies
endêmicas do total de 437 espécies encontradas na Caatinga, o que representa um nível de
endemismo de cerca de 40%. A vegetação da Caatinga tem como principais características:
alta densidade de indivíduos com 1.000 a 5.000 ha-1, árvores de pequeno a médio porte,
18
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
com altura dominante variando entre 3m e 6m, e resposta rápida às chuvas com
aparecimento das folhas em poucos dias.
Há muitas espécies vegetais na Caatinga que apresentam adaptação à deficiência
hídrica, como caducifolia, suculência, acúleos e espinhos e algumas características
xerofíticas (Minc et al., 2008). As famílias mais comumente encontradas são: Fabaceae,
Bromeliaceae,
Cactaceae,
Euphorbiaceae,
Malvaceae,
Bombacaceae,
Caricaceae,
Apocynaceae e Anacardiaceae (Prado, 2003).
Ações antrópicas na Caatinga como a substituição da vegetação natural por culturas
agrícolas e práticas pecuárias têm prejudicado os solos que se encontram em processo de
desertificação, com perda de biodiversidade e erosão (Sampaio et al., 2005). A perda de
paisagens tem consequências graves para a manutenção da biodiversidade, levando à
extinção de espécies endêmicas (Chapin et al., 2000) antes mesmo de tornarem-se
conhecidas (MMA, 1998). Apesar das ameaças à sua integridade, menos de 2 % da
Caatinga estão protegidas em unidades de conservação (Garda et al., 1996).
2.2. Feijão Caupi
2.2.1. Origem e Histórico
O feijão caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp.] é originário da África, onde é
amplamente cultivado, porém há controvérsias se teria surgido no Oeste Africano, na
Nigéria, há cinco ou seis mil anos, onde estaria associado ao cultivo de milheto e sorgo
(Davis et al., 1991), ou na região de Transvaal, na África do Sul, região de especiação de
V. unguiculata (Padulosi e Ng, 1997).
2.2.2. Características e Classificação Botânica do Feijão Caupi
O feijão caupi é uma Dicotyledonea da ordem Fabales, família Fabaceae,
subfamília Faboideae, tribo Phaseoleae, subtribo Phaseolinea, gênero Vigna, seção Catiang
(Padulosi e Ng, 1997). Também conhecido como feijão macassar, feijão de corda, feijão
fradinho, feijão verde, feijão de praia, feijão de estrada, feijão miúdo, feijão catador, entre
outros nomes que variam de acordo com a região e Estado onde é cultivado. O caupi é
uma planta herbácea, anual, geralmente adaptada a zonas temperadas e tropicais (Freire
Filho et al., 1999).
A leguminosa é amplamente cultivada na região Nordeste devido às características
adaptativas a condições adversas, como suportar altas temperaturas, com desenvolvimento
ocorrendo entre 18º e 34ºC, produzindo bem, mesmo com baixa disponibilidade de água
19
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
(precipitações anuais de 300 mm), e também tolerante a estresse salino (Sousa, 2006).
Pode se desenvolver em grande variedade de solos, mas os melhores são os arenosos, com
pH entre 5,5 a 6,5. (Agência Prodetec, 2009).
As sementes de feijão caupi são muito nutritivas, apresentando 63,6 % de
caboidrato, 24,8 % de proteína, 6,3 % de fibras e apenas 1,9 % de gordura, além de
vitaminas como tiamina, riboflavina e niacina (Davis et al., 1991). Devido ao valor
proteico o feijão caupi é utilizado na alimentação humana sob a forma de grãos secos ou
verdes e como vagens, mas seus ramos e folhas também são utilizados na alimentação
animal sob a forma de grãos e forragem (Silva e Freire Filho,1999).
2.2.3. Produção Mundial e Local do Feijão Caupi
A produção mundial de feijão caupi, no ano de 2007, alcançou a 36 países,
destacando-se entre os maiores produtores a Nigéria, o Níger e o Brasil, respectivamente,
que representam 84,1 % da área plantada e 70,9 % da produção mundial (FAO, 2009 apud
Silva, 2011).
A produtividade de caupi no Brasil corresponde a 58 % de toda a produção de
feijões no país, dos quais 84 % são produzidos na região Nordeste. A área plantada com
caupi no Brasil está em torno de 30 % da área total de feijão e na Região Nordeste
corresponde a 60 %. Esses dados mostram a importância do caupi para a economia do país
e principalmente da Região Nordeste, onde se torna a base alimentar da população. A área
cultivada com esse feijão está em torno de 1.600.000 ha, com os estados do Ceará e Piauí
apresentando às maiores áreas cultivadas e as maiores produções do Brasil (Freire Filho et
al., 1999).
2.3. Utilização de Substratos Orgânicos na Agricultura
O termo substrato é aplicado a todo material sólido, natural ou sintético, bem como
resíduos minerais ou orgânicos, distintos do solo, quando adicionado de forma pura ou em
mistura e que permite o desenvolvimento do sistema radicular do vegetal, desempenhando
o papel de suporte para a planta (Abad e Noguera, 1998). Os substratos exercem as funções
do solo fornecendo à planta sustentação, nutrientes, água e oxigênio e podem ser de
diversas origens: animal (esterco, húmus, composto, etc.), vegetal (tortas, bagaços, xaxim,
serragem, etc.), mineral (vermiculita, perlita, areia, etc.) e artificial (espuma fenólica,
isopor, etc.) (Rosa et al., 2002).
20
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Substratos orgânicos vêm sendo cada vez mais utilizados visando aumentar a
produtividade agrícola e minimizar os impactos ambientais provocados pelos resíduos
sólidos, e com objetivo de minimizar o uso de fertilizantes químicos, pois os mesmos são
biofertilizantes (Fontes et al., 2004). Diferentes tipos de resíduos agroindustriais vêm
sendo utilizados como substrato, como a casca de arroz, bagaço de cana, torta de mamona,
torta de algodão, entre outros (Souza, 2000; Sainju et al., 2001). Aumento da utilização de
substratos à base de casca de coco em cultivos agrícolas tem sido observado, substituindo
outros materiais, tais como: lã de rocha, turfas de Sphagnum e areia (Rosa et al., 2002).
A adição da matéria orgânica proveniente dos substratos tem algumas vantagens
como: liberar e facilitar a absorção de nutrientes para as plantas, aumentar a capacidade do
solo em armazenar nutrientes, melhorar a estrutura do solo e diminuir os gastos com adubo
mineral, além de diminuir a acidez do solo e a toxicidade do alumínio (Melo e Fernandes,
2000).
O esterco animal é o adubo orgânico mais amplamente utilizado nos sistemas
agrícolas; esse substrato é rico em macro e micro nutrientes, constituindo uma alternativa
de baixo custo, uma vez que pode diminuir o uso de fertilizantes químicos e os custos da
produção, quando associado a outros adubos naturais. A adubação com esterco traz muitos
benefícios ao solo, como o aumento da aeração e da permeabilidade e a diminuição da
compactação. Outra vantagem é o aumento do conteúdo de matéria orgânica, favorecendo
a atividade microbiológica e aumentando a disponibilidade de nutrientes do solo para os
vegetais (Garrido et al., 2008).
O esterco animal pode ser utilizado na forma liquida ou sólida, fresco ou prédigerido, como composto ou vermicomposto. Como exemplo de estercos utilizados temos
o: bovino, equino, suíno, caprino e o de aves (Weinärtner et al., 2006). O esterco mais
amplamente usado na agricultura é o bovino, não só no Brasil mais em diversos países
como Japão (Sha et al., 2012), Inglaterra (Salazar et al., 2005) , Índia (Blaise et al., 2005) e
México (Alarcón e Ferrera-Cerrato, 2000).
Diversos trabalhos têm mostrado a eficiência do esterco bovino na melhoria das
características do solo (Melo et al., 2009), principalmente em relação à fertilidade (N, P e
K) (Sampaio et al., 2007), contribuindo com a diminuição do alumínio tóxico e elevação
do pH (Caetano e Carvalho, 2006), proporcionando aumento da matéria seca e
produtividade das culturas (Araújo et al., 2008 a), além de beneficiar a colonização das
plantas por micro-organismos promotores do crescimento, como os FMA (Krey et al.,
2011).
21
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Outro substrato que pode ser utilizado na agricultura é o pó e a fibra do coco
(Cocos nucifera L.). O coqueiro é uma oleaginosa da família Arecaceae cujos frutos
podem ser consumidos de duas formas básicas: processado quando maduro (coco seco),
utilizado como óleo em mais de 80 produtos, ou in natura, sendo o coco utilizado imaturo
(coco verde) para aproveitamento da água, rica em sais minerais. Em ambos os casos o
resíduo orgânico gerado é muito grande, sendo representado pelas cascas que formam um
significativo volume. Em geral, do peso total de um coco maduro, 65 % correspondem à
noz e seu conteúdo (albúmen sólido e água), enquanto os 35 % restantes correspondem à
parte fibrosa (casca) (Figura 1), com uma parte formada por fibras e a outra parte por pó,
que une as fibras (Rosa et al., 2002).
Figura 1: Corte longitudinal do coco com a descrição de suas partes. Adaptado de vam Dam et al. (2004).
O cultivo de coco no Brasil vem crescendo devido ao elevado consumo da água nos
últimos anos; em 2000 já existiam cerca de 80 indústrias de pequeno porte e três de grande
porte concorrendo diretamente com as indústrias de refrigerante (Carrijo et al., 2002).
Atualmente o Brasil é o quarto maior produtor mundial, com 2,9 milhões de toneladas e
270 mil ha de área plantada no ano de 2011 (FAO, 2013). Esse crescimento vem gerando
grande quantidade de resíduo industrial com cerca de 6,7 milhões de toneladas de casca de
coco ao ano (www.projetococoverde.com.br).
Os resíduos do coco vêm sendo depositados em lixões, aterros sanitários e até
mesmo às margens de estradas, e devido ao grande volume esses locais estão ficando
pequenos para acomodar tanto material descartado. Como a composição da casca do coco é
principalmente lignina (Tabela 1) que é de difícil decomposição (levando mais de oito anos
22
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
para se decompor), muitos problemas sociais e ambientais têm sido gerados, incluindo a
atração de vetores e causadores de doenças como roedores, insetos e micro-organismos
(Carrijo et al., 2002). Além disso, o processo de degradação realizado pelos microorganismos ainda ocasiona emissão de gás metano no ambiente, contaminando o solo e a
água (Passos, 2005).
Tabela 1. Composição da fibra e do pó de coco.
Lignina (%)
Celulose (%)
45,4
43,4
20-48
35-60
32,8
68,9
41-45
36-43
32,8
44,2
Fonte: Ferraz, 2011
Hemicelulose (%)
0,25
15-28
16,8
0,15-0,25
12,1
Referências
Rajan et al. (2005)
Agopyan et al. (2005)
Asasutjarit et al. (2007)
Corradini et al. (2009)
Abdul Khalil et al. (2006)
Como alternativas para minimizar a presença desses resíduos no ambiente, projetos
para utilização desses detritos vêm sendo desenvolvidos, e um deles é relacionado à
produção de fibroconcreto e fibrocimento para serem utilizados na indústria civil, por
serem altamente resistentes e podendo também ser utilizados como isolantes térmicos e
acústicos (Ferraz, 2011). Resíduos de coco podem ser utilizados também na indústria têxtil
e automobilística para a produção de bancos, encostos, almofadas e colchões (Andrade et
al., 2004) e na indústria química, para a produção de enzimas como a celulase (Oliveira,
2010). Na área ambiental os resíduos vêm sendo utilizados na produção de carvão vegetal
(Andrade et al., 2004), na cobertura de superfícies com retenção de umidade diminuindo os
processos de erosão do solo, e na produção de mudas e germinação de sementes (A
lavoura, 2012).
Mesmo com os diversos usos para a casca do coco esses processos ainda não são
difundidos em larga escala, sendo necessário o aumento de sua utilização. Uma área
promissora é o emprego agrícola, porém algumas barreiras têm sido impostas pela lenta
degradação e assimilação dos detritos ao solo, decorrente da composição. A taxa de
decomposição lenta fornece outros benefícios, como melhores condições físicas e
biológicas ao solo, proporcionando aumento da porosidade e aeração do solo, maior
retenção de umidade e desenvolvendo um nível ideal de pH (5,4-6,8). Os resíduos do coco
também são ricos em potássio e nitrogênio, favorecendo a atividade fisiológica das raízes
(Rosa et al., 2001; Coquim, 2013). As fibras da casca do coco podem ser incorporadas ao
solo fornecendo nutrientes necessários ao desenvolvimento das plantas (Carrijo et al.,
23
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
2002), ou utilizadas como cobertura proporcionando melhor temperatura ao solo, retenção
de umidade entre outros benefícios (Miranda et al., 2004).
A casca do coco verde não apresenta as mesmas características; embora com
elevada retenção de água, tem altas concentrações de sódio, portanto, elevada
condutividade elétrica e muitos taninos solúveis em água, que podem ser tóxicos para as
plantas (Rosa et al., 2001). Para sua utilização na agricultura são necessários
processamentos mecânicos para acelerar o processo de degradação, e permitir a
contribuição dos benefícios citados. Os processamentos mecânicos realizados são:
tritutação, prensagem e seleção. Na primeira etapa a casca de coco é cortada e triturada por
um rolo de facas fixas; na segunda, acontece a liberação da umidade e dos sais contidos na
casca; na terceira etapa ocorre a separação da fibra (30 %) e do pó (70 %) do coco (Rosa,
2013).
Diversos trabalhos têm mostrado a eficiência da fibra e do pó de coco na produção
de mudas de várias plantas, entre as quais: tomateiro, diminuindo os custos da produção
(Silveira et al., 2002), berinjela, com melhores resultados de crescimento (Moreira et al.,
2010), melancia, apresentando mais vigor com a utilização do substrato (Ramos et al.,
2012), o que evidencia o potencial do uso desses substratos também para aumento da
produção agrícola.
2.4. Fungos Micorrízicos Arbusculares
Os micro-organismos do solo, entre os quais se destacam os Fungos Micorrízicos
Arbusculares (FMA), podem ser influenciados, entre outros fatores pelas práticas agrícolas
e pela composição vegetal. Os FMA pertencem ao filo Glomeromycota (Schüβler et al.,
2001) e formam associação simbiótica obrigatória com representantes de cerca de 90 %
das plantas terrestres, de briófitas e pteridófitas, até Gimnospermas e Angiospermas (Smith
e Read, 2008).
Os FMA são assim chamados devido à principal característica, que é a formação de
uma estrutura denominada arbúsculo, formada por várias divisões dicotômicas das hifas. O
arbúsculo é o centro de troca entre o fungo e a planta e se forma intracelularmente em
células do córtex das raízes. Em algumas espécies de FMA ainda são formadas nas raízes
estruturas arredondadas ou ovais de paredes finas, denominadas vesículas, com função de
armazenamento, contendo grande quantidade de lipídios e glicogênio. Fora da raiz, as hifas
se ramificam formando o micélio externo, responsável pela absorção dos minerais; nesse
24
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
micélio, em alguns gêneros de FMA, podem formar outras estruturas de armazenamento,
denominadas células auxiliares (Figura 1). Os esporos dos FMA, denominados
glomerosporos, são as principais estruturas reprodutivas; desempenham papel de
resistência e de propagação e são formados primordialmente no micélio externo, podendo
também ocorrer no interior das raízes das plantas hospedeiras (Smith e Read, 2008;
Silveira, 1992).
a
b
Figura 2. Estruturas de FMA formadas durante a simbiose: a) Arbúsculo; b) micélio interno (MI), vesículas
(V), micélio externo (ME) e arbúsculos (A) (Peterson et al., 2004).
Estudos sugerem que os fungos pertencentes ao Filo Glomeromycota e sua natureza
simbiótica antecedem a formação de raízes, pois teriam surgido há mais de 400 milhões de
anos, no período Devoniano, constituíndo ferramenta importante para a colonização do
ambiente terrrestre pelas plantas vasculares (Dotzler et al., 2006, 2009). Devido a essa coevolução com as plantas terrestres os FMA não têm especificidade de hospedeiro,
podendo, de forma geral, se associar com qualquer planta micotrófica, no entanto, algumas
espécies de plantas e fungos podem ter preferência pelo parceiro, o que proporciona maior
benefício à associação (Maia et al., 2006).
Na associação micorrízica as plantas fornecem carboidratos obtidos durante a
fotossíntese e em troca os FMA transferem para os hospedeiros nutrientes minerais,
principalmente os de baixa mobilidade, como fósforo e formas indisponíveis de nitrogênio,
absorvidos pelas hifas no solo (Silveira 1992; Siqueira et al., 2010). Como resultado, as
plantas apresentam resistência a fatores abióticos como o estresse hídrico, podendo se
recuperar mais rapidamente de sintomas como a murcha (Silveira, 1992), e o estresse
salino (Yano-Melo et al., 2003), e aumentam a tolerância a metais pesados, como
manganês e alumínio (Cardoso, 1985). Os FMA propiciam também maior tolerância a
fatores bióticos, como fitopatógenos e nematóides, por induzir a produção de compostos
25
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
tóxicos, competir por espaço físico e oferecer melhores condições de nutrição, assim, a
planta tem menor incidência de doenças e menores danos (Siqueira et al., 2010; Silveira,
1992).
Nos ecossistemas os FMA desempenham importantes funções, podendo funcionar
como biofertilizantes, biocontroladores e biorreguladores (Siqueira e Klauberg-Filho,
2000) e são eficientes na recuperação de áreas degradadas e na ciclagem de nutrientes
(Hodje et al., 2001), influenciando a composição florística e a estabilidade de ecossistemas
naturais (van der Heidjen et al., 1998). Os FMA também produzem uma glicoproteína,
denominada glomalina, que está diretamente relacionada com a estruturação, e
consequentemente, com a qualidade do solo, e é importante na sustentabilidade e
funcionamento dos ecossistemas terrestres (Wright e Upadhyaya, 1998). O benefício da
micorrização é conhecido para diversas culturas de importância econômica, entre as quais:
uva (Matsuoka et al., 2002; Krishna et al., 2005), acerola (Costa et al., 2001), milho
(Carrenho et al., 2001) e feijão (Cruz e Martins, 1997).
Os FMA representam de 5 a 50 % da biomassa total de micro-organismos do solo, e
a zona onde ocorre a influência deste fungo na rizosfera é conhecida como micorrizosfera,
onde existe uma população própria de micro-organismos, como bactérias que ajudam na
micorrização facilitando a colonização da planta pelo fungo (Siqueira et al., 2010).
2.5. Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares
Os FMA pertencem ao Filo Glomeromycota e estão distribuídos em três classes:
Archaeosporomycetes,
Glomeromycetes
e
Paraglomeromycetes,
cinco
ordens
(Archaeosporales, Diversisporales, Gigasporales, Glomerales e Paraglomerales), 15
famílias e 31 gêneros, dos quais são conhecidas aproximadamente 230 espécies (Oehl et
al., 2011; Goto et al., 2012).
A diversidade desse filo ainda é pouco conhecida considerando a de plantas, que
pode chegar a 400.000 táxons, dos quais aproximadamente 67% se associam aos FMA
(Souza et al., 2008). Estudo baseado na diversidade de caracteres dos esporos dos FMA
estima que apenas para o gênero Glomus possam existir cerca de 2.000 espécies (Morton et
al., 1995). Segundo Souza et al. (2008), mencionado que se riqueza de plantas e de FMA
se mantiver em outros ecossistemas como no estudo observado, é possível supor que a
diversidade do filo possa variar de 37.000 a 78.000 espécies.
26
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
No Brasil foram identificadas aproximadamente 120 espécies de FMA que
correspondem a pouco mais de 50 % do total de espécies registradas.A maioria desses
estudos foi realizada em agrossistemas, com registro de 94 espécies em culturas perenes e
anuais (Souza et al., 2010). Em geral, por estudo, são identificadas de 9-25 espécies em
áreas agrícolas (Carrenho et al., 2010). Para o bioma Caatinga foram registradas 79
espécies de FMA, a maior parte em agrossistemas; recentemente, quatro novas espécies
foram registradas nesse bioma: Dentiscutata colliculosa B.T. Goto & Oehl., Orbispora
pernambucana (Oehl, D.K. Silva, N. Freitas & L.C. Maia) Oehl,G.A. Silva & D.K. Silva,
(Goto et al., 2010) e Paradentiscutata bahiana (Oehl, Magna, B.T. Goto & G.A. Silva),
Intraornatospora intraornata (B.T. Goto & Oehl) B.T. Goto, Oehl & G.A. Silva (Goto et
al., 2012).
A quantificação da diversidade de FMA pode ser realizada a partir de vários
métodos e índices. Os métodos mais conhecidos são baseados na morfologia dos
glomerosporos, que pode ser complementada com análise molecular. No estudo
morfológico são observadas as características do esporo tais como: tamanho,
ornamentação, tipo e quantidade de paredes, placa germinativa entre outras (Oehl et al.,
2008). A biologia molecular possibilita a identificação de FMA por meio de esporos,
micélio e estruturas presentes nas raízes (Hemel et al., 2007), mas as técnicas ainda
precisam ser aprimoradas para permitir a identificação mais ampla das espécies.
Estudos de diversidade molecular utilizando solo, esporos e raízes têm demonstrado
maior diversidade com base no uso de esporos do que nos demais parâmetros, (Johnson et
al., 2003; Hemel et al., 2007). Em geral não é encontrada muita sobreposição entre
espécies identificadas por esporos e nas raízes, possivelmente porque as raízes abrigam
apenas uma fração das espécies de FMA existentes no solo, onde algumas espécies de
FMA também não são identificadas por não estarem produzindo esporos (Clapp et al.,
1995; Johnson et al., 2003).
Análises moleculares visando apenas à identificação de FMA nas raízes podem não
registrar algumas espécies presentes no solo, como membros da família Paraglomeraceae e
Archaeosporaceae (Hemel et al., 2007; Sanchez-Castro et al., 2012). De todo modo,
estudos morfológicos adicionais são recomendados para amostragem de espécies de FMA
em uma área.
A identificação morfológica pode ser realizada por exame de esporos vindos
diretamente do campo ou de culturas armadilhas, considerando que esses fungos são
simbiontes obrigatórios (Córdoba et al., 2002).
27
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Alguns trabalhos utilizando o índice de diversidade de Shannon (H’) para estudo de
FMA em áreas agrícolas vêm sendo realizados no Brasil e no mundo, sendo observados
resultados interessantes em relação às práticas agrícolas e à diversidade de FMA (Tabela
1). Em geral, as monoculturas diminuem a diversidade de FMA em relação às áreas
naturais, e a utilização de práticas agrícolas menos agressivas, como a utilização de adubo
verde, contribuem para aumento da diversidade de FMA nas áreas estudadas (Carrenho et
al., 2010).
Embora vários estudos sobre a diversidade e ocorrência de espécies de FMA em
agrossistemas tenham sido realizados, há muito a conhecer, considerando diversos fatores
bióticos e abióticos que influenciam a comunidade destes fungos. Nos agrossistemas
existem outros fatores que se somam a esses, interferindo diretamente na comunidade
microbiana e na produtividade das plantas como: preparo mecânico do solo, manejo das
culturas e tratos culturais (Carrenho et al., 2010).
28
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Tabela 2. Densidade de esporos, riqueza e diversidade de espécies de fungos micorrízicos arbusculares em
diferentes sistemas de cultivo.
Sistemas de
Densidade
Riqueza de
Diversidade de
Observações
Autores e
Cultivo
de esporos
espécies
Shannon H’
Local
em 1g de
solo
Pasto, rotação
2,5- 65 g-1
27
2,45 - 1,32
Maior riqueza e
Oehl et al,
e monoculura
diversidade no
2003
pasto e na rotação
Europa
Central
Milho e soja
em cultivo
convencional,
adubo verde e
adubo animal
15
2,01- 1,57
Maior diversidade
no cultivo de soja
com adubo verde
FrankeSnyder et
al., 2001
E.U.A
Chá natural e
cultivado
6,48 – 7,4g-1
51
1,80-0,13
Maior diversidade
na área natural
Singh et al.,
2008
Himalaya
Pasto, milho e
vinhedo
7 – 84 g-1
30
1,4 – 2,1
Maior diversidade
no vinhedo e pasto
e menor na
monocultura do
milho
Oehl et al.,
2005
Europa
Central
Floresta,
pasto,
agrofloresta e
cultivo
0,09-2,55
g-1
61
2,44- 1,84
A diversidade na
área cultivada foi
mais próxima da
floresta, em ambas
maior que no pasto
e na agrofloresta
Stürmer, e
Siqueira,
2011
Brasil
Dois tipos de
cultivo
orgânico, dois
com
fertilizantes
minerais e um
sem
fertilizantes
7.9 – 14 g-1
19 do campo e
32 após a
cultura
armadilha
2,16- 2,51
Maior diversidade
nas áreas com
tratamento orgânico
e menor nas áreas
com fertilizantes
Oehl et al.,
2004
Europa
Central
2.6. Fungos Micorrízicos Arbusculares em Agrossistemas
Estudos sobre a ocorrência de FMA em agrossistemas no Nordeste foram iniciados
por Almeida et al. (1987),
os quais analisaram esporos em áreas cultivadas com
leguminosa arbórea no Ceará. Posteriormente, Maia e Trufem (1990) realizaram trabalho
sobre ocorrência de FMA em sete municípios do estado de Pernambuco, em cultivos de
algodão arbóreo (Geossypium sp.), algodão herbáceo (Geossypium herbaceum L.), cará
(Dioscorea campestris L.),
(Phaseolus vulgaris L.),
feijão macassar (Vigna unguiculata L.), feijão mulatinho
mandioca (Manihot esculenta Crantz) e milho (Zea mays L.).
Nesse estudo foram identificadas 24 espécies de FMA, com maior ocorrência na rizosfera
29
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
de milho. Em cultivos de citros nos estados da Bahia e Sergipe, Weber e Oliveira (1994)
registraram a presença de 10 espécies de FMA, com predominância de Acaulospora. Em
cultivos de banana (Musa sp. Cv. Pacovan) em Petrolina, PE, foram referidas 15 espécies
de FMA (Melo et al., 1997), e em cultivos de goiabeira (Psidium guajava L.) também em
Petrolina, PE, Campos (2009) encontrou 27 táxons de FMA. Em cultivo de nim
(Azadirachta indica A. Juss), em Pernambuco, foram identificadas 49 espécies de FMA
com maior riqueza no litoral (30) e menor no sertão (8) (Monte Junior, 2011).
O número de espécies de FMA identificadas em áreas de cultivo é variável e o tipo
de cultivo também influência a ocorrência desses fungos. Em cultivos de café, no Paraná,
foram registradas cinco espécies na rizosfera de cafeeiro adubado com crotalária
(Crotalaria breviflora DC.) e sete na área de cafeeiro (Coffea arabica L.) sem adubo verde
(Colozzi-Filho e Cardoso, 2000). Focchi et al. (2004) encontraram 26 espécies de FMA em
cultivo orgânico e convencional de citros (Poncirus trifoliata L.), com maior riqueza na
área com adubo orgânico. Em cultivo de macieira (Malus domestica Brokh), em Santa
Catarina, Purin et al. (2006) encontraram 38 espécies de FMA, das quais 20 foram
registradas no pomar convencional e 30 no pomar orgânico. De modo geral há maior
riqueza de espécies em áreas com adubos orgânicos do que em cultivos recebendo aditivos
químicos, pois os mesmos influenciam negativamente a ocorrência de FMA.
Os gêneros predominantes em áreas cultivadas são Acaulospora e Glomus que
apresentam ampla distribuição em várias faixas de pH e tolerância a impactos agrícolas,
por apresentarem tamanho reduzido dos esporos (Focchi et al., 2004; Campos, 2009;
Monte Junior, 2011). Poucos representantes de Gigasporaceae são encontrados nesses
ambientes, possivelmente devido à sensibilidade das espécies ao manejo agrícola (Tchabi
et al., 2008; Singh et al., 2008; Campos, 2009).
As monoculturas, por apresentarem apenas um hospedeiro, podem constituir
ambientes de estresse para os FMA, selecionando espécies mais adaptadas a condições
especificas, aumentando a densidade de glomerosporos, e reduzindo a diversidade. A
rotação de culturas utilizando cultivos orgânicos e forrageiras aumenta a diversidade e
diminui a densidade de glomerosporos, favorecendo o cultivo subsequente (Espíndola et
al., 1998; Moreira e Siqueira, 2006; Carrenho et al., 2010). Tendo em vista que os FMA
são influenciados pela comunidade vegetal à qual estão associados, e que a esporulação é
favorecida na presença de gramíneas e leguminosas, trabalhos de diversidade nessas
culturas devem ser ampliados a fim de se conhecer melhor essa comunidade (van der
Heijden et al. 1998).
30
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
2.7. Feijão Caupi e Fungos Micorrízicos Arbusculares
Diversos estudos com feijão caupi e FMA, realizados desde a década de 1970, têm
comprovado que a cultura é dependente dos FMA. Esses trabalhos demonstraram que a
inoculação proporciona vários benefícios para as plantas de caupi tais como: melhor
exploração do solo pelas hifas externas à raíz, maior absorção de nutrientes, principalmente
fósforo, e maior crescimento devido à melhor nutrição, [Yost e Fox (1979), Bagyaraj e
Manjunath (1980) e Islam et al. (1980) apud (Gueye et al., (1987)].
Em sistemas de rotação de cultura com milho e feijão caupi e diferentes níveis de
irrigação com água salina, maior número de esporos foi encontrado quando era cultivado o
feijão, com predominância de espécies de Glomus; as plantas de caupi também
apresentaram altas taxas de colonização micorrízica (Bezerra et al., 2010).
Em experimento de casa de vegetação com feijão caupi em diferentes níveis de
irrigação salina, Tavares et al. (2009) observaram que as plantas inoculadas com FMA
apresentaram 48 % de colonização e foram mais tolerante à salinidade que as não
micorrizadas.
Estudo comparativo entre genótipos de feijão caupi demonstrou que a capacidade
de fixação de N e colonização micorrízica (43 a 57 %) variaram entre diferentes genótipos
de feijão caupi e os autores sugeriram que o mais eficiente com relação à fixação biológica
de nitrogênio e colonização micorrízica, deveriam ser recomendados para plantio em áreas
com baixa disponibilidade de N e P solúveis no solo (Fernandes et al., 2008).
Silva et al. (2009) comprovaram em experimento com solo proveniente de
diferentes sistemas de uso na região do Alto Solimões, na Amazônia, o elevado grau de
micotrofismo do caupi, com efeitos positivos da colonização micorrízica sobre a produção
de biomassa em relação ao controle não inoculado, sugerindo que uma ampla diversidade
de FMA é capaz de colonizar o feijão caupi.
Estudo para identificação de FMA por meio de cultura armadilha demonstrou que
plantas de sorgo Sorghum sudanense (Stapf) e caupi são mais eficientes do que Brachiaria
decumbens (Stapf) e Neonotonia wightii Am.(Lackey) como iscas para a recuperação de
espécies em amostras de campo (Leal et al., 2009), comprovando a capacidade micotrófica
do caupi.
31
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
2.8. Adubos Orgânicos e Fungos Micorrízicos Arbusculares
A introdução de adubos orgânicos de origem animal ou vegetal como substratos
agrícolas pode influenciar os micro-organismos do solo, entre os quais os FMA, e essa
influência pode ou não ser benéfica; dessa forma, é importante conhecer a interação desses
substratos na atividade e diversidade desses fungos.
A presença de esterco bovino pode ter efeitos positivos na atividade dos FMA:
aumentando a taxa de colonização micorrízica e número de glomerosporos (Muthukumar e
Udaiyan, 2002), melhorando a eficiência simbiótica (Tristão et al., 2006), contribuindo
para a produção de proteínas do solo relacionadas a glomalina (Dai et al., 2013), ou
favorecendo a população de FMA com maior riqueza e diversidade de espécies (Sousa et
al., 2012; Dai et al., 2013). A interação entre FMA e esterco bovino também aumenta os
benefícios para a cultura associada (Wang et al., 2012).
No entanto, esses benefícios são dependentes da dose de esterco utilizada, uma vez
que sua utilização em altas concentrações (30 %) pode reduzir a colonização micorrízica
(Trindade et al., 2000) ou causar diminuição do micélio externo (Dai et al., 2013). Por
outro lado, a adição do esterco pode não ter influência na atividade dos FMA, sendo os
resultados dependentes do tipo de esterco e da cultura associada (Sha et al., 2012).
Trabalhos utilizando substrato como fibra de coco e FMA têm sido realizados,
porém estão restritos a experimentos com inoculação de espécies, em casa de vegetação,
sem observar respostas em campo (Silva Junior et al., 2006, 2010; Monteiro et al., 2009).
Em experimento com melão (Cucumis melo L.) e substrato de pó de coco, Silva
Junior et al. (2006) observaram que os melhores resultados de colonização e crescimento
vegetal foram encontrados nas proporções abaixo de 20 % do substrato; valores elevados
do pó de coco restringiram o crescimento vegetal e a colonização micorrízica, com menor
incorporação de carbono pelos micro-organismos. Plantas cultivadas com substrato de pó
de coco puro ou em concentrações elevadas (100 % e 80 %) não conseguem se estabelecer
e desenvolver adequadamente. Em trabalho subsequente, Silva Junior et al. (2010)
observaram os efeitos de diferentes concentrações de substrato com pó de coco seco e
verde na colonização micorrízica arbuscular e no desenvolvimento de mudas de melão;
níveis medianos (30 % v:v) de pó de coco foram suficientes para uma boa produção de
melão e maior colonização micorrízica e, como nos outros trabalhos, em altas
concentrações (70 % v:v) de adubo o crescimento do melão foi limitado.
32
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Em cultivo de pimentão (Capsicum annuum L.) utilizando como substratos pó de
coco seco e verde, além de inoculação com FMA (Glomus clarum, Glomus intraradices e
Gigaspora margarita), Monteiro et al. (2009) verificaram influência do adubo na absorção
de nutrientes pelas plantas. Os maiores valores de crescimento vegetal e teores de zinco e
fósforo foram encontrados nas plantas inoculadas e nos tratamentos abaixo de 20 % de
fibra de coco. Foi observado ainda que o pó de coco verde limitou o desenvolvimento da
planta, principalmente em elevadas concentrações (100 %).
Estudos que visem observar a relação dos FMA com a cultura estudada e outros
fatores como substratos orgânicos para conhecer os impactos dessas práticas sobre a
atividade e diversidade de FMA são indispensáveis para o desenvolvimento de estratégias
de conservação ambiental e biotecnologia para agricultura sustentável.
33
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
3. DIVERSIDADE DE FUNGOS MICORRÍZICOS ARBUSCULARES (FMA) EM
SOLOS CULTIVADOS COM FEIJÃO-CAUPI [VIGNA UNGUICULATA (L.)
WALP.] UTILIZANDO FIBRA DE COCO COMO COBERTURA MORTA,
PRÁTICAS AGRÍCOLAS SUSTENTÁVEIS EM CONDIÇÕES SEMI-ÁRIDAS
Resumo
O feijão caupi é amplamente cultivado na região Nordeste do Brasil, constituindo a base da
alimentação humana e animal. O emprego de substratos orgânicos como a fibra de coco e
esterco bovino e micro-organismos promotores de crescimento como fungos micorrízicos
arbusculares (FMA) podem ser alternativas para maximizar a produção e minimizar os
impactos agrícolas. Os objetivos deste trabalho foram: ampliar o conhecimento sobre os
FMA na Caatinga e em cultivo de caupi, determinando se a adição de substratos ao solo
influencia a diversidade desses fungos. Amostras de solo foram coletas em seis áreas, em
Petrolina, PE: (1) área de Caatinga; (2) área de pousio, antes do cultivo; (3, 4, 5, 6) e
depois cultivadas com caupi recebendo doses (0, 12, 24, 48 t ha-1) de fibra de coco como
cobertura. Todos os cultivos receberam 10 t ha-1 de esterco bovino. Avaliaram-se: riqueza,
frequência e diversidade de espécies. Foram registrados 61 táxons de FMA com
predominância de Glomus e Acaulospora. A área de Caatinga apresentou maior riqueza de
espécies (42), e os índices de diversidade foram similares entre as áreas estudadas. O
cultivo e os substratos utilizados favoreceram a riqueza e a diversidade de FMA em
comparação com a área de pousio. A diferença nas comunidades de FMA entre a área
natural e a cultivada retrata a sensibilidade e/ou a adaptação de algumas espécies às
práticas agrícolas.
Palavras-chave: micorriza arbuscular, adubação orgânica, solo, agricultura.
___________
1
Artigo submetido para publicação no periódico Biology and Fertility of Soils
34
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
INTRODUÇÃO
Os fungos micorrízicos arbusculares (FMA) pertencem ao Filo Glomeromycota
(Schüβler et al., 2001), formam simbiose mutualista com representantes de 90 % das
famílias de plantas vasculares. Nessa associação o fungo aumenta a área de absorção das
plantas por meio das hifas que percorrem o solo, auxiliando no aporte de nutrientes
minerais e água, enquanto o vegetal fornece ao fungo carboidratos obtidos pela a
fotossíntese (Smith e Read, 2008).
Entre as funções específicas e importantes desempenhadas pelos FMA e que
contribuem para o desenvolvimento do hospedeiro estão aumento da tolerância a estresses
abióticos como salinidade, baixa disponibilidade de água, presença de metais pesados, e
também a estresses bióticos ocasionados por fitopatógenos; Assim, a planta micorrizada
apresenta menor incidência de doenças e sofre menos danos (Siqueira et al., 2010).
A diversidade de FMA ainda é pouco conhecida, sendo registradas cerca de 230
espécies, distribuídas em 15 famílias e 31 gêneros (Oehl et al., 2011; Goto et al., 2012).
Estudo baseado na morfologia dos esporos de Glomus estimou a existência de
aproximadamente 2.000 espécies, apenas para esse gênero (Morton et al., 1995). Outros
estudos relacionando a riqueza de plantas e de FMA estimam que a diversidade do Filo
possa variar de 37.000 a 78.000 espécies (Souza et al., 2008). Considerando a importância
desses fungos nos ecossistemas terrestres, os resultados das investigações sobre a
diversidade em áreas naturais e/ou cultivadas podem fornecer dados para orientar políticas
públicas de preservação e manutenção desses importantes recursos biológicos. Além disso,
os dados podem indicar possíveis isolados eficazes para o aumento da produtividade
agrícola.
Entre as culturas de importância para Brasil destaca-se a de feijão caupi [Vigna
unguiculata (L.) Walp.]. O país é o terceiro maior produtor mundial e essa leguminosa
vem sendo amplamente cultivada na região Nordeste devido às características adaptativas a
condições adversas, tolerância a altas temperaturas e salinidade e baixa disponibilidade de
água (Sousa, 2006). Nessa região a cultura é a base da alimentação humana, sendo o feijão
consumido na forma de grãos secos, verdes além de vagem, enquanto ramos e folhas são
utilizados na alimentação animal, como grãos e forragem (Silva e Freire Filho et al., 1999).
Estudos de inoculação com FMA em feijão caupi têm demonstrado maior biomassa e alta
colonização das plantas, mas não há informações sobre espécies de FMA que colonizam
naturalmente essa cultura (Fernandes et al., 2008; Tavares et al., 2009).
35
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Visando aumentar a produtividade agrícola, diversos adubos orgânicos e
condicionadores do solo vêm sendo testados. Entre esses, a fibra de coco é eficiente por
apresentar alta porosidade e retenção de umidade, ser 100 % natural, além de ter baixo
custo. No entanto altas concentrações de alguns substratos, principalmente verdes, podem
ser prejudiciais às plantas, devido à quantidade de taninos solúveis em água (Rosa et al.,
2001). O esterco animal é um tipo de adubo orgânico utilizado nos sistemas agrícolas rico
em macro e micro nutrientes, que associado com outros adubos naturais pode diminuir o
uso de fertilizantes químicos e os custos da produção. A adubação com esterco traz muitos
benefícios às características físicas, químicas e biológicas do solo, como o aumento da
aeração, permeabilidade, diminuição da compactação do solo. Outra importante vantagem
do uso de esterco é o aumento da matéria orgânica no solo, o que favorece maior atividade
microbiológica, aumentando a disponibilidade de nutrientes do solo para os vegetais
(Garrido et al., 2008).
Estudos da inoculação com FMA em culturas com substratos orgânicos têm
demonstrado para a fibra do coco que, maiores valores de colonização micorrízica, e
benefícios para as culturas são encontrados em níveis abaixo de 30 % da fibra do coco,
sugerindo que altos níveis podem ser prejudiciais para a comunidade de FMA e para o
vegetal (Monteiro et al., 2009; Silva Júnior et al., 2006 e 2010). Em mudas de cafeeiro, a
utilização do esterco bovino proporcionou maiores valores de colonização micorrízica e
eficiência simbiótica, além de aumento no acúmulo de fósforo e pigmentos
fotossintetizantes pelas plantas (Tristão et al., 2006). Em outro trabalho, o benefício da
inoculação só foi observado quando se utilizou níveis de esterco abaixo de 30 %, com a
colonização decrescendo com o aumento da dose do esterco (Trindade et al., 2000). De
forma geral, os substratos orgânicos beneficiam a associação micorrízica, porém pouco se
sabe sobre a sua influência na ocorrência e diversidade desses fungos.
Trabalhos que visem observar a relação dos FMA não apenas com o hospedeiro
cultivado, mas que incluam o manejo e tratos culturais são importantes para definição de
impactos produzidos na ocorrência e diversidade de FMA e na produtividade vegetal,
sendo indispensáveis para o desenvolvimento de estratégias de conservação ambiental e
biotecnologia para agricultura sustentável (Carrenho et al., 2010).
Nesse contexto, objetivou-se ampliar o conhecimento sobre a riqueza e a
diversidade de FMA em áreas naturais e com plantio de feijão caupi e utilização de adubo
orgânico na região semiárida, de modo a estabelecer se os impactos gerados pela
36
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
substituição da vegetação de Caatinga por cultivo são minimizados quando se emprega
leguminosa e substratos como fibra de coco verde e esterco bovino.
MATERIAL E MÉTODOS
Área de Estudo
O estudo foi realizado com amostras de solo coletadas em área experimental
instalada no Campus de Ciências Agrárias da Universidade Federal do Vale do São
Francisco, Petrolina, PE. O solo da região é classificado como Argissolo Amarelo.
Segundo a classificação de Koppen o clima da região é tropical semiárido do tipo BSwh’,
caracterizado pela escassez e irregularidade das precipitações com temperatura média
anual de 28 °C e precipitação pluviométrica de 548 mm ao ano. Para o estudo foram
consideradas as seguintes áreas: Caatinga em sucessão espontânea com predomínio da
leguminosa Mimosa tenuiflora (Willd) Poir, utilizada como referência; área em pousio por
aproximadamente 10 anos, localizada próxima à área de referência; área cultivada com
feijão caupi, estabelecida na área de pousio, um mês após a primeira coleta de solo. A área
cultivada foi dividida em quatro tratamentos (0, 12, 24 e 48 t ha-1 de fibra de coco, todas
adubadas 10 t ha-1 de esterco bovino). O solo foi revolvido por meio de aração e gradagem,
aplicando-se uma única dose de 10 t ha-1 de esterco bovino na linha de plantio um mês
antes do experimento. A área total do experimento abrangeu 320 m2, com parcelas
medindo 16 m2 (4 x 4m). Um tubo gotejador foi instalado por linha de plantio e irrigações
foram realizadas diariamente por 1 hora.
Delineamento experimental do cultivo de campo
O delineamento experimental foi em blocos ao acaso com quatro tratamentos (0,
12, 24 e 48 t ha-1 de bagaço de coco verde) em cinco repetições totalizando 20 parcelas de
16 m2 cada. A fibra do coco, parcialmente triturada, foi cedida pela Amacoco Nordeste e
utilizado como cobertura. A cultivar de feijão caupi utilizada foi a BRS Pujante, e as
sementes inoculadas com estirpe de Rizóbio (BR 3267) enviado pela Embrapa
Agrobiologia; o espaçamento foi de 30 cm entre plantas e 50 cm entre as linhas, com
duas plantas por cova. A coleta do solo foi realizada nas quatro fileiras centrais de cada
parcela.
Coletas
37
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
O solo foi coletado de forma aleatória na rizosfera das plantas na profundidade de
0-20 cm e utilizado para as análises relativas aos FMA e caracterização físico-química do
solo. As três coletas realizadas nesse estudo foram referentes aos meses de julho/2011,
outubro/2011 e março/2012. A primeira coleta foi realizada para o reconhecimento da área
no tempo zero (área de pousio antes do cultivo do feijão), para isso, cinco amostras de
solo, compostas de seis subamostras, foram coletadas nas áreas de pousio e fragmento de
Caatinga. As duas coletas subsequentes foram realizadas aos 80 dias de cultivo, fase de
frutificação do feijão caupi (outubro/2011 e março/2012), nas parcelas com 0, 12, 24 e 48 t
ha-1de fibra de coco verde, além da área de Caatinga (referência). No total, foram coletadas
360 subamostras de solo durante as três coletas, considerando cinco amostras compostas de
seis subamostras em cada tratamento/área, cada amostra composta continha 4 kg de solo
que foi acondicionado em sacos plásticos e encaminhados para análise no laboratório de
micorrízas da UFPE.
Características do solo
A temperatura do solo foi aferida no local da coleta com um termômetro de solo. O
pH foi avaliado em amostras de 10 g de solo em água (Embrapa, 1999) e a umidade
determinada após secagem de 2 g de solo em estufa (105 °C/24 h), (Debosz et al., 1999).
As demais análises do solo foram realizadas na Estação Experimental de Cana-de-açúcar
do Carpina, pertencente à Universidade Federal Rural de Pernambuco (Tabela 1).
Montagem de culturas armadilha, extração de glomerosporos e identificação de espécies de
FMA
Parte do solo coletado foi utilizada como inóculo para montagem de culturas
armadilha, com o objetivo de obter glomerosporos saudáveis e em quantidade suficiente
para as análises morfológicas. O solo coletado foi diluído na proporção 1:1 (v/v) com areia
esterilizada (em estufa 105 °C/24 h), colocado em potes plásticos com capacidade para 2
kg, e semeado com lab lab (Lablab purpureus L.), feijão caupi [Vigna unguiculata (L.)
Walp.], sorgo [Sorghum bicolor (L.) Moench.] e milheto (Pennisetum glaucum L.), como
hospedeiros no mesmo pote. As plantas foram mantidas em casa de vegetação por dois
ciclos de multiplicação (quatro meses cada) e foram regadas diariamente. Ao final de cada
ciclo, amostras do solo foram coletadas para extração e estudo morfológico dos
glomerosporos visando à identificação das espécies de FMA.
38
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Para avaliar as comunidades de FMA, os glomerosporos obtidos das amostras de
campo e das culturas armadilhas foram extraídos do solo por peneiramento úmido
(Gerdemann e Nicolson, 1963), seguido por centrifugação em água e sacarose (Jenkins,
1964). Tanto os glomerosporos extraídos de amostras do campo como das culturas
armadilha foram preparados em lâminas com PVLG (álcool-polivinílico em lactoglicerol)
e com reagente de Melzer + PVLG (1:1) e observados ao microscópio óptico para
identificação dos FMA, que foi realizada por consulta ao manual de identificação de FMA
(Schenck e Pérez 1990) e publicações recentes com a descrição dos táxons. A classificação
adotada foi a proposta por Oehl et al. (2011).
Comunidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares
Para avaliar as comunidades de FMA e sua composição foram determinados:
riqueza de espécies, frequência de ocorrência e relativa, equitabilidade, e diversidade. A
riqueza foi definida como o número de espécies de FMA registrado em cada área estudada.
A frequência de ocorrência (Fi) foi estimada segundo a equação: Fi = Ji/k onde, Fi =
frequência de ocorrência da espécie i, Ji = número de amostras onde a espécie i ocorreu, k
= número total de amostras de solo (Brower e Zar, 1984). Para determinar a frequência
relativa de ocorrência (FRi) das espécies de FMA foi aplicada a equação: FRi = frequência
de ocorrência relativa da espécie i, fi = frequência de ocorrência da espécie i , f = soma
das frequências de todas as espécies, e classificadas segundo Zhang et al. (2004) em
espécies dominantes (fi> 50 %), muito comuns (30 % <fi ≤ 50 %), comuns (10 % < fi ≤ 30
%), e raras (fi ≤ 10 %).
Os índices ecológicos foram avaliados segundo as fórmulas: Índice de Diversidade
de Shannon-Wiener (H’)= - Ʃ (Piln[Pi]); onde Pi= ni/N, ni = número de indivíduos na
espécie i, e N = número total de indivíduos em todas espécies (Shannon e Weaver, 1949).
Índice de Equitabilidade de Pielou (J) = H’/Log (S) em que H’ é o valor obtido pelo índice
de Shannon e S é o número total de espécies (Pielou, 1975). O índice de Margalef foi
calculado com base na seguinte equação: d = S-1/LogN, S é o número de espécies, N é o
número total de esporos na amostra (Margalef, 1958). O índice de similaridade de
Sørensen (Brower e Zar, 1984) foi aplicado para comparar as comunidades de FMA entre
as diferentes áreas de coleta. As análises foram realizadas com o programa PRIMER 6.0
(Clarke e Gorley, 2006).
Análises dos dados
39
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Os dados referentes aos atributos do solo das áreas foram submetidos a análises de
variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey (P<0,05), no programa Assistat 7.6
beta (Silva e Azevedo, 2006). Os dados de composição das comunidades de FMA foram
ordenados usando non-metric multidimensional scaling (NMS) (Kruskal, 1964) e a
distância de Sørensen. Uma matriz secundária foi usada para correlacionar as variavéis
edáficas com os dados de composição de comunidades de FMA (matriz primária) com o
objetivo de observar se havia relação entre os atributos do solo e os FMA; a significância
das
correlações
foi
estimada
em
consulta
a
VassarStats
website
(http://vassarstats.net/rsig.html).
Para análise das espécies indicadoras (combinação da abundância relativa e
frequência relativa das espécies), utilizou-se o índice proposto por Dufrêne e Legendre
(1997) e a significância das espécies como indicadora das áreas/tratamentos foi feita pelo
teste de Monte Carlo (Dufrêne e Legendre, 1997). Nesse estudo, as espécies que
apresentaram valor de indicação (IndVal) > 40 e p ≤ 5 % foram consideradas boas
indicadoras das áreas.
Diferenças estatísticas na composição das comunidades de FMA nas áreas foram
testadas usando o procedimento de permutação de multirespostas (MRPP) (Mielke e Berry,
2000), com base na distância de Sørensen. O teste de Mantel foi empregado usando o
método de randomização de Monte Carlo e a distância de Sørensen, para avaliar se existe
relação entre a matriz de composição de comunidades de FMA e a matriz composta por
variáveis do solo. Todas as análises multivariadas (espécie indicadora, NMS, MRPP e
Mantel) foram realizadas com auxílio do programa PC-ORD versão 5.0 (McCune e
Mefford, 2006).
Áreas de estudo
Fe
Caatinga
Pousio
Feijão+ 0 t ha-1
Feijão+ 12 t ha-1
Feijão+ 24 t ha-1
Feijão+ 48 t ha-1
155,0 a
45,5b
60,7b
70,3b
56,3b
39,2b
Áreas de estudo
V
Cu
0,4 bc
0,1 c
0,7 ab
1,0 a
0,7 ab
0,7 ab
Zn
mg/dm3
10,8 ab
5,5 b
10,1 ab
10,9 ab
14,0 ab
16,0 a
Mn
23,4 ab
30,0 a
21,3 b
21,1 b
20,8 b
21,5 b
Atributos Químicos
C
M
M.O.
%
P
19,5 c
88,0 b
114,0 a
132,0 a
118,0 a
130,0 a
Atributos Químicos
K
Na
0,3 a
0,7 a
0,7 a
0,7 a
0,5 a
0,8 a
0,6 a
0,1 b
0,1 b
0,1 b
0,1 b
0,1 b
Al
0,03 a
0,00 b
0,00 b
0,00 b
0,00 b
0,00 b
Ca
Mg
cmolc / dm3
3,2 a
1,6 a
2,4 a
0,7 b
2,7 a
0,9 b
2,8 a
1,0 b
2,7 a
0,9 b
3,0 a
0,8 b
H
S.B.
CTC
2,5 a
0,4 b
0,5 b
0,6 b
0,7 b
0,5 b
5,9 a
4,0 b
4,5 b
4,7 b
4,2 b
4,9 b
8,4 a
4,4 b
5,0 b
5,2 b
5,0 b
5,4 b
Atributos Físicos
pH
Umidade
%
0,91 b
0,49 b
3,18 a
3,22 a
3,44 a
3,74 a
TºC
Areia
Total
Areia
Grossa
Areia Fina
Silte
Argila
67,5 b
1,4 a
0,5 a
2,5 a
5,4 b
36,2 a
13,9 a
13,1 a
Caatinga
73,0 b
41,7 b
31,4 a
90,4 a
0,7 b
0,0 b
1,3 b
7,1 a
27,1 b
6,1 b
9,6 b
Pousio
84,3 a
53,0 a
31,2 a
-1
89,2 a
0,8 b
0,0 b
1,4 b
6,8 a
26,4 b
5,9 b
8,8 bc
Feijão+ 0 t ha
85,3 a
50,1 a
35,2 a
88,7 a
0,9 b
0,0 b
1,6 b
6,8 a
26,6 b
5,8
b
8,4 bc
Feijão+ 12 t ha-1
85,7 a
52,3 a
33,5 a
-1
85,7 a
0,9 b
0,0 b
1,5 b
6,8 a
26,4 b
5,8 b
8,7 bc
Feijão+ 24 t ha
85,5 a
52,1 a
33,4 a
-1
89,7 a
0,9 b
0,0 b
1,6 b
7,0 a
27,2 b
86,4 a
5,9 b
7,7 c
Feijão+ 48 t ha
53,9 a
32,5 a
S.B.= Soma de bases trocáveis; CTC= Capacidade de troca catiônica; V= saturação por bases; m= Saturação por Al; M.O.= Matéria Orgânica. Médias seguidas pela mesma letra,
nas colunas, não diferem significativamente pelo teste de Tukey a 5 %.
Pontes, Juliana- Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Tabela 1. Caracterização química e física do solo em área de Caatinga, área em pousio e áreas cultivadas com feijão caupi e concentrações de fibra de coco como cobertura do
solo e adubadas com 10 t ha-1 de esterco bovino (exceto a Caatinga e pousio), em Petrolina, PE.
40
41
Pontes, Juliana- Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
RESULTADOS
Ao todo foram extraídos 5.180 glomerosporos de FMA, os quais representaram 61
espécies pertencentes a 18 gêneros e 12 famílias (Acaulosporaceae, Ambisporaceae,
Archaeosporaceae,
Gigasporaceae,
Dentiscutataceae,
Glomeraceae,
Diversisporaceae,
Pacisporaceae,
Paraglomeraceae,
Entrophosporaceae,
Racocetraceae
e
Scutellosporaceae). Glomus apresentou o maior número de espécies (22), seguido por
Acaulospora (14), Gigaspora (4), Claroideoglomus e Paraglomus (3) e Diversispora e
Racocetra (2); os demais gêneros (Achaeospora, Ambispora, Cetraspora, Dentiscutata,
Entrophospora, Funneliformes, Fuscutata, Kuklospora, Pacispora, Scutellospora e
Septoglomus) foram representados apenas por uma espécie (Tabela 2).
Maior riqueza de espécies foi encontrada na área de referência, com 42 espécies de
FMA, seguida pela área plantada com menor concentração de fibra de coco (36 espécies) e
menor na área em pousio (19). As espécies com maior frequência relativa foram F.
mosseae, Gl. tortuosum e Glomus sp.3 no pousio e Am. appendicula, Gl. trufemii e Gl.
macrocarpum na área de referência; e Cl. etunicatum teve maior frequência nas quatro
áreas cultivadas.
As culturas armadilha permitiram a identificação de duas espécies de FMA não
observadas nas amostras recém-examinadas de campo: Fu. heterogama foi identificada em
culturas armadilhas da área cultivada com feijão e 12 t ha-1 de fibra de coco e Gl.
ambisporum foi encontrado apenas na área de referência.
Tabela 2. Espécies de FMA com a frequência de ocorrência (FO) e frequência relativa (FR), registradas em campo (C) em área de Caatinga, área em pousio e áreas cultivadas com
feijão caupi e concentrações de fibra de coco como cobertura do solo e adubadas com 10 t ha-1 de esterco bovino (exceto a Caatinga e pousio), em Petrolina, PE.
Espécies de FMA
Feijão + 0 t ha-1
Feijão + 12 t ha-1
Feijão + 24 t ha-1
Feijão + 48 t ha-1
FR
C
FO
FR
C
FO
FR
C
FO
FR
C
FO
FR
Pousio
FO
-
FR
-
C
Acaulospora excavata Ingleby & C. Walker
C
-
FO
-
-
-
X
MC
1,3
X
MC
1,7
X
C
0,1
-
-
-
-
X
C
0,7
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
A. foveata Trappe & Janos
A. laevis Gerd. & Trappe
X
C
0,1
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
A. longula Spain & N.C. Schenck
X
MC
1,0
X
MC
3,7
X
D
2,0
X
D
1,0
X
D
0,6
X
D
2,3
A. mellea Spain & N.C. Schenck
A. minuta Oehl, Tchabi, Hount., Palenz., I.C
Sánchez & G.A. Silva
X
C
0,8
X
MC
1,5
-
-
-
X
D
0,2
X
D
0,1
X
MC
0,4
X
C
0,1
-
-
-
X
MC
1,4
X
MC
1,2
X
MC
0,4
X
D
2,1
A. scrobiculata Trappe
A. sieverdingii Oehl, Sýkorová, Błaszk. &
G.A. Silva
X
MC
0,3
X
D
8,2
X
D
7,5
X
D
7,0
X
D
4,8
X
D
7,7
-
-
-
X
C
0,7
X
C
0,1
X
C
0,2
X
MC
0,9
-
-
-
A. spinosa Walker & Trappe
-
-
-
-
-
-
X
C
0,1
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Acaulospora sp. 1
-
-
-
-
-
-
X
D
1,5
X
MC
2,0
X
MC
0,8
X
D
1,2
Acaulospora sp. 2
Acaulospora sp. 3
X
C
0,1
-
-
-
-
-
-
X
D
0,6
X
D
0,5
X
MC
0,6
X
C
0,1
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
MC
0,4
Acaulospora sp. 4
X
C
0,3
-
-
-
-
-
-
X
C
0,3
-
-
-
X
C
0,8
Acaulospora sp. 5
Ambispora appendicula (Spain, Sieverd. &
N.C. Schenck) C. Walker
-
-
-
-
-
-
X
C
0,1
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
D
28,2
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Archaeospora sp.
X
Cetraspora pellucida (T.H. Nicolson & N.C.
Schenck) Oehl, F.A. Souza & Sieverd.
Claroideoglomus claroideum (N.C. Schenck
& G.S. Sm.) C. Walker & A. Schüssler
X
MC
1,0
X
C. etunicatum (W.N. Becker & Gerd.) C.
Walker & A. Schüßler
X
D
1,5
X
C. luteum (L.J. Kenn., J.C. Stutz & J.B.
Morton)C. Walker & A.Schüssler
X
C
0,4
X
C= Comum; MC= Muito Comum; D= Dominante; X= ocorreu no campo.
C
2,2
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
0,0
-
-
X
C
0,1
X
MC
0,2
X
-
0,1
X
MC
0,1
C
0,7
X
C
0,1
X
C
0,1
X
C
0,5
X
-
0,0
D
8,2
X
D
19,2
X
D
9,1
X
D
13,4
X
D
13,5
MC
4,5
-
-
-
X
D
0,9
-
-
-
X
MC
0,8
-
Pontes, Juliana- Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Caatinga
42
Caatinga
Espécies de FMA
Dentiscutata cerradensis (Spain & J. Miranda)
Sieverd., F.A. Souza & Oehl
Diversispora versiformes (P. Karst.) Oehl,
G.A. Silva & Sieverd.
Feijão + 0 t ha-1
Pousio
Feijão + 12 t ha-1
Feijão + 24 t ha-1
Feijão + 48 t ha-1
C
FO
FR
C
FO
FR
C
FO
FR
C
FO
FR
C
FO
FR
C
FO
FR
X
C
0,1
-
-
-
X
C
0,1
X
C
0,1
-
-
-
-
-
-
X
C
0,1
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
MC
0,9
-
-
-
Diversispora sp.
Entrophospora sp.
Funneliformis mosseae (T.H. Nicolson & Gerd.)
C. Walker & A. Schüßler
Fuscutata heterogama (T.H. Nicolson & Gerd.)
Oehl, F.A. de Souza, L.C. Maia & Sieverd.
X
C
0,1
-
-
-
-
-
-
X
C
0,2
-
-
-
-
-
-
X
D
0,6
X
D
19,4
X
D
7,2
X
D
4,3
X
D
9,8
X
D
7,3
-
-
-
-
-
-
-
-
-
*
-
-
-
-
-
-
-
-
Gigaspora albida Schenck & Smith
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
C
0,1
-
-
-
G. decipiens I.R. Hall & L.K. Abbott
G. gigantea (T.H. Nicolson & Gerd.) Gerd. &
Trappe
X
C
0,3
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
D
1,0
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
C
0,1
-
-
-
G. margarita W.N. Becker & I.R. Hall
X
C
0,1
-
-
-
X
C
0,1
-
-
-
-
-
-
X
C
0,3
Glomus ambisporum G.S. Sm. & Schenck
*
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
G. aggregatum N.C. Schenck & G.S. Sm
X
MC
0,7
-
-
-
X
MC
2,8
X
D
7,3
X
D
12,4
X
D
14,4
G. clarum T.H. Nicolson & N.C. Schenck
G. coremioides (Berk. & Broome) D. Redecker &
J.B. Morton
X
D
6,1
-
-
-
X
C
0,9
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
MC
0,5
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
C
0,2
-
-
-
G. glomerulatum Sieverd.
X
C
0,3
-
-
-
-
-
-
X
C
0,2
X
C
3,5
-
-
-
G. intraradices N.C. Schenck & G.S. Sm.
X
C
0,1
X
D
3,7
-
MC
0,4
X
D
1,3
X
MC
0,4
X
C
0,1
G. macrocarpum Tul. & C. Tul.
X
D
10,7
X
D
7,5
-
D
9,4
X
D
6,4
X
D
7,2
X
D
14,5
G. microcarpum Tul. & C. Tul.
G. sinuosum (Gerd. & B.K. Bakshi) R.T. Almeida
& N.C. Schenck
X
C
1,4
-
-
-
-
-
-
X
C
0,8
X
C
0,4
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
D
5,6
X
D
8,5
X
D
4,1
X
D
1,4
-
-
-
X
D
10,4
X
D
2,2
X
MC
0,5
-
-
-
-
-
-
G. trufemii B.T.Goto, G.A. Silva & Oehl
X
D
12,6
-
-
-
X
D
5,7
X
D
1,3
X
D
5,5
X
D
1,0
Glomus sp. 1
X
D
9,1
C= Comum; MC= Muito Comum; D= Dominante; X= ocorreu no campo; *= presente apenas na cultura armadilha.
X
D
14,5
X
D
9,2
X
D
9,2
43
G. tortuosum N.C. Schenck & G.S. Sm.
Pontes, Juliana- Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Continuação da tabela 2
Feijão + 48 t ha-1
Caatinga
Pousio
Feijão + 24 t ha-1
Feijão + 48 t ha-1
C
FR
C
FO
FR
C
FR
C
FO
FR
C
FO
FR
C
Glomus sp. 2
X
D
1,3
X
D
9,0
-
-
-
X
D
12,5
-
-
-
X
D
8,3
Glomus sp. 3
X
D
4,6
X
MC
10,4
X
MC
1,4
X
D
6,1
X
D
8,8
X
D
7,1
Glomus sp. 4
X
C
0,3
X
C
5,2
-
-
-
X
C
0,1
X
C
0,1
-
-
-
Glomus sp. 5
Glomus sp. 6 (hialino aff. cubenses)
X
C
0,7
-
-
-
X
C
2,1
X
D
3,2
X
MC
0,9
X
C
0,5
X
D
6,4
-
-
-
-
-
-
X
C
0,2
X
MC
1,4
X
C
0,4
Glomus sp. 7
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
C
0,2
-
-
-
-
-
-
Glomus sp. 8
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
C
0,1
Glomus sp. 9
X
C
0,1
-
-
-
X
C
0,2
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Glomus sp. 10
Glomus sp. 11
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
MC
0,5
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
C
0,1
X
MC
3,2
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Pacispora sp.
Paraglomus occultum (C. Walker) J.B.
Morton & D. Redecker
X
D
0,4
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
MC
2,3
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Paraglomus sp.1
X
D
4,9
-
-
-
X
D
2,9
X
D
2,3
X
D
1,8
X
C
0,5
Paraglomus sp.2
Racocetra coralloidea (Trappe, Gerd. &
I. Ho) Oehl, F.A. Souza & Sieverd.
Racocetra sp.
X
D
3,4
-
-
-
-
-
-
X
C
0,1
-
-
-
X
MC
1,0
X
C
0,1
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
C
0,1
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
X
C
0,1
Scutellospora sp.
Septoglomus constrictum (Trappe)
Sieverd., G.A. Silva & Oehl
-
-
-
X
C
0,7
X
D
1,4
X
C
0,4
X
C
0,1
X
C
0,1
X
MC
3,4
X
C
1,5
X
MC
6,2
X
C
4,4
X
MC
7,5
X
D
2,8
C= Comum; MC= Muito Comum; D= Dominante; X= ocorreu no campo.
FR
Feijão + 12 t ha-1
Espécies de FMA
Kuklospora colombiana (Spain & N.C.
Schenck) Oehl & Sieverd.
FO
Feijão + 0 t ha-1
FO
FO
Pontes, Juliana- Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Continuação da tabela 2
44
45
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Os índices ecológicos aplicados mostraram dintintos valores de diversidade, a área
de referência apresentou maior diversidade de espécies com base no índice de Margalef;
considerando o índice de Shannon, os valores de diversidade foram similares entre as áreas
com maior valor encontrado na área com 12 t ha-1 de fibra de coco. O número de esporos e
os indices de diversidade foram menores na área em pousio (Tabela 3).
Tabela 3. FMA: Número de espécies (N), esporos (E), índices de diversidade de Shannon (H’) e de
Margalef (d), equitabilidade de Pielou (J’) em áreas de Caatinga (referência), pousio e áreas cultivadas com
feijão caupi e concentrações de 0, 12, 24 e 48 t ha-1 de fibra de coco como cobertura do solo e adubadas
com 10 t ha-1 de esterco bovino (exceto a Caatinga e o pousio), em Petrolina, PE
Áreas
Caatinga
Pousio
Feijão + 0 t ha-1
Feijão + 12 t ha-1
Feijão + 24 t ha-1
Feijão + 48 t ha-1
N
42
19
29
36
32
32
E
1335
134
853
1231
848
779
H’
3,78
3,70
3,94
4,09
3,97
3,80
d
5,69
3,67
4,14
4,91
4,59
4,65
J’
0,70
0,87
0,81
0,79
0,79
0,76
As áreas cultivadas com feijão caupi foram mais similares entre si, com 80 % de
similaridade entre áreas adubadas com 12 e 24 t ha-1 de fibra de coco e 68,3 % de
similaridade entre a área com 48 t ha-1 de fibra de coco e as demais áreas cultivadas. A área
de pousio foi mais similar às áreas cultivadas (62,1 %) do que à de referência. Menor
similaridade (52 %) foi observada entre a área de referência e as demais áreas (Fig.1).
Figura1. Dendrograma baseado em Sørensen representando o índice de similaridade de espécies de fungos
micorrízicos arbusculares, entre as áreas estudadas Caatinga, pousio e cultivadas com feijão caupi e fibra de
coco nas concentrações 0 t ha-1(F+0), 12 t ha-1(F+12), 24 t ha-1 (F+24) e 48 t ha-1(F+48) todas adubadas com
esterco bovino (exceto a Caatinga e o pousio), em Petrolina, PE.
46
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Considerando a análise de NMS foi possível explicar 82,2 % da variância total dos
dados. Desse total 52 % é explicado pelo eixo 1 e 30 % pelo eixo 2, sendo observada a
formação de três grupos distintos (Fig. 2). Houve diferença significativa na composição
das comunidades de FMA entre as áreas de referência, pousio e cultivadas, como
observado pelo teste de MRPP (Tabela 4).
Figura 2. Resultado do NMS baseado na composição das espécies de fungos micorrízicos arbusculares
correlacionada com as propriedades físicas e químicas de amostras de solo de áreas de Caatinga, pousio e
cultivadas com feijão caupi e fibra de coco nas concentrações 0 t ha-1(1), 12 t ha-1(2), 24 t ha-1(3) e 48 t ha-1(4)
todas com esterco (exceto a Caatinga e o pousio), em Petrolina, PE.
Tabela 4. Valores de Significância com base no teste estatístico MRPP por comparação da composição de
espécies de FMA entre as áreas, Caatinga, pousio, áreas cultivadas com feijão caupi e concentrações de fibra de
coco 0 t ha-1(F+0), 12 t ha-1(F+12), 24 t ha-1(F+24) e 48 t ha-1(F+48) todas com esterco bovino (exceto a
Caatinga e o pousio), em Petrolina, PE.
Caatinga
Pousio
F+0
F+12
F+24
F+48
Caatinga
0,01
0,01
0,01
0,01
0,01
Pousio
0,01
0,01
0,01
0,01
F+0
0,01
ns
0,01
F+12
ns
ns
F+24
ns
F+48
-
O teste de Mantel revelou correlação significativa (r = 0,53 e p ≤ 0,001 %) entre a
matriz primária (espécies de FMA) e a secundária (atributos químicos e físicos do solo).
47
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Todas as variáveis foram significativamente relacionadas ao eixo 1 ou eixo 2 (Tabela 5),
mostrando a importância dos atributos do solo na estrutura das comunidades de FMA.
Tabela 5. Coeficientes de correlação (r) entre as variáveis do solo e escores dos Eixos 1 e 2 da ordenação.
Coeficientes de Correlação
Variáveis
Fe
Cu
Zn
Mn
P
pH
K
Na
Al
Ca
Mg
CTC
V
C
MO
Areia
Silte
Argila
Eixo 1 – NMS
-0,36***
-0,46**
-0,41***
0,62*
-0,03ns
0,37***
0,14ns
-0,31***
-0,37***
-0,63*
-0,51**
-0,54**
0,40***
- 0,52**
-0,52**
0,28ns
-0,36***
-0,11ns
Eixo 2 - NMS
-0,76*
0,02ns
-0,04ns
-0,20ns
-0,71*
-0,90*
-0,49**
0,80*
0,74*
0,53**
0,75*
0,85*
-0,90*
0,88*
0,88*
-0,84*
0,82*
0,78*
*significativo a 0,1 %; ** significativo a 1 %; *** significativo a 5 %; ns: não significativo; CTC:
Capacidade de troca catiônica; V: saturação por bases; MO: matéria orgânica do solo.
Apenas na área de referência e de cultivo com menor concentração de fibra de coco
foi possível registrar espécies com valor de indicação acima de 40%. Das nove espécies
consideradas indicadoras, oito eram da Caatinga e apenas uma da área cultivada (Tabela
6).
48
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Tabela 6. Espécies de fungos micorrízicos arbusculares indicadoras das áreas de estudo, valor de
indicação (ID) e nível de significância p.
Espécies
Áreas
V (ID) %
p*
Ambispora appendicula
CA
100,0
0,0002
Gigaspora gigantea
CA
56,0
0,0292
Glomus clarum
CA
91,1
0,0002
Glomus trufemii
CA
58,3
0,0006
Glomus sp. 2
F+12
61,8
0,0002
Glomus sp. 6
CA
50,1
0,0332
Pacispora sp.
CA
60,0
0,0136
Paraglomus sp. 1
CA
47,8
0,0012
Paraglomus sp. 2
CA
83,3
0,0002
-1
CA= Caatinga; F+12= Área cultivada com caupi e 12 t ha de fibra de coco. *: valor significativo a 5 %, 1 %
ou 0,1 % de probabilidade.
DISCUSSÃO
O número de espécies encontradas (61) nas áreas de estudo é elevado quando
comparado aos resultados registrados em outros trabalhos na mesma região semiárida,
como o pioneiro de Maia e Trufem (1990) realizado em diversas culturas incluindo feijão
caupi, em Pernambuco (24 espécies de FMA). Em trabalho mais recente em áreas
cultivadas com feijão caupi, milho e algodão e com adição de matéria orgânica, menor
número (21) de espécies de FMA foram identificadas (Sousa et al., 2012). Em outros
plantios no semiárido, com leucena (Leucena leucocephala L.) e sabiá (Mimosa
caesalpiniaefolia Benth), 24 espécies de FMA foram referidas (Silva et al., 2007),
possivelmente pela investigação ter ocorrido em apenas uma época do ano.
O elevado número de espécies recuperadas no presente estudo pode estar
relacionado ao esforço amostral, considerando que se coletou, em diferentes épocas do
ano, 360 subamostras, que representaram 60 amostras compostas examinadas. Os
resultados são semelhantes ao referido para áreas semiáridas em deserto da China, com 54
espécies (Shi et al., 2007) e em áreas naturais e cultivadas com chá, no Himalaya, onde se
registrou 51espécies (Singh et al., 2008).
O número de espécies encontrado corresponde a 50 % das espécies descritas para o
Brasil (Siqueira et al., 2010) e a 77 % das mencionadas para a Caatinga (Goto et al., 2010).
Resultados similares foram encontrados por Carvalho et al. (2012) em áreas endêmicas de
campus rupestres em Minas Gerais, sugerindo que regiões semiáridas possuem ampla
49
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
diversidade de FMA. Os dados apontam também para a importância da preservação dessas
áreas onde se encontram representativas comunidades de espécies de FMA.
Os gêneros mais encontrados foram Glomus e Acaulospora, os quais também foram
os mais representativos em outras áreas de Caatinga (Souza et al., 2003) e em áreas
impactadas por mineração (Mergulhão et al., 2010). Segundo Maia et al. (2010), espécies
desses gêneros estão adaptadas a uma ampla faixa de pH. Além disso, produzem esporos
pequenos e com ciclo de formação rápido, e em ambientes secos e antropizados espécies
desses gêneros têm facilidade de propagação e apresentam tolerância a estresses (Zhao e
Zhao, 2007; Shi et al., 2007), como ocorre nas áreas estudadas, devido às altas
temperaturas e manejo do solo para plantio.
Poucos representantes de espécies gigasporoides foram observados, como detectado
em outros trabalhos em áreas cultivadas, o que deve estar associado à sensibilidade dessas
espécies a manejos agrícolas (Tchabi et al., 2008; Singh et al., 2008; Campos, 2009);
segundo Lekberg et al. (2007) espécies com esporos gigasporoides predominam em solos
arenosos o que não foi observado no presente estudo. Como todas as variáveis do solo
foram significativas para explicar os resultados deste estudo confirma-se a importância do
ambiente edáfico na distribução das espécies de FMA, como observado por Oehl et al.
(2010).
Claroideoglomus etunicatum, F. mosseae e Gl. macrocarpum têm sido
consideradas de ampla frequência em diversos trabalhos e classificados como generalistas
por se adaptarem às mais diversas condições, principalmente em ambientes semiáridos
(Oehl et al., 2003; Silva et al., 2007; Mergulhão et al., 2010). A espécie que teve maiores
frequência de ocorrência e frequência relativa na área de referência foi Ambispora
appendicula, que não foi registrada nas demais áreas estudadas, sugerindo que é mais
sensível ao manejo do solo. Com relação às espécies encontradas apenas nas culturas
armadilhas, Fu. heterogama já havia sido referida para o semiárido brasileiro ocorrendo
em áreas naturais, em agrossistemas e em áreas impactadas (Goto et al., 2010), e Gl.
ambisporum, que ocorreu na área de referência, havia sido citada apenas para áreas
naturais (Goto et al., 2010), como no presente trabalho. Acaulospora minuta, A.
sieverdingii, Claroideoglomus luteum e Glomus trufemii são citados pela primeira vez para
o bioma Caatinga (Goto et al., 2010, 2012; Maia et al., 2010).
Vinte e um táxons não foram identificados ao nível específico; seis por se tratarem
de novos registros para a ciência e os demais por estarem degradados. As espécies
50
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
consideradas novas para a ciência são Acaulospora sp.1, Acaulospora sp.5, Glomus sp.1,
Glomus sp.6, Pacispora sp.1 e Paraglomus sp.1estas serão multiplicadas e posteriormente
descritas (Figura 3).
Figura 3. Espécies de fungos micorrízicos arbusculares consideradas novas para a ciência: a) Acaulospora
sp.1, b) Acaulospora sp.5, c) Glomus sp.1, d) Glomus sp.6, e) Pacispora sp.1 e f) Paraglomus sp.1.
A similaridade de espécies entre as áreas demonstrou a influência da composição
vegetal e da adubação sobre a comunidade de FMA, pois as áreas cultivadas foram mais
semelhantes entre si, do que com a Caatinga (referência), que tinha outro tipo de vegetação
e solo não adubado. Outros trabalhos relatam a influência das práticas agrícolas (Treseder e
Turner, 2007) e do tipo de vegetação na composição de espécies de FMA (van der Heijden
et al. 1998) e até na eficiência das espécies (Carrenho et al., 2010).
O índice de diversidade de Shannon sugeriu uma uniformidade de espécies de FMA
entre as áreas de estudo, pois os valores foram muito semelhantes. Esse índice avalia tanto
a riqueza como a distribuição das espécies e embora a área de referência tenha tido valor
elevado de riqueza os valores de equitabilidade são muito próximos entre as áreas e podem
ter influenciado o resultado. O oposto foi observado por Singh et al. (2008) em áreas
naturais e cultivadas com chá, onde a maior riqueza contribuiu para o aumento da
diversidade. O maior valor de diversidade na área com 12 t ha-1 de fibra de coco,
possivelmente contribuiu com aumento da matéria fresca nesta área observada por Vieira
et al. (2012).
51
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Os valores de diversidade de FMA nas áreas estudadas foram superiores (4,09) ao
encontrado por outros autores em cultivos com adubação orgânica nos Estados Unidos
(Franke-Snyder et al., 2001) e na Europa (Oehl et al., 2004), onde o índice de diversidade
não passou de 2,51. Em comparação à área de pousio, as áreas cultivadas possibilitaram a
manutenção da diversidade de FMA pelas condições favoráveis ao crescimento do fungo,
com presença de vegetação, disponibilidade de nutrientes e umidade, favorecendo a sua
distribuição.
O índice de diversidade de Margalef, que se baseia na riqueza de espécies, foi
maior para a área de referência, possivelmente porque é uma área com maior estabilidade,
o que favorece a manutenção da riqueza de espécies de FMA. Em áreas cultivadas ocorre
um favorecimento na esporulação, mas não necessariamente ocorre maior riqueza de
espécies de FMA, pois não existe correlação entre o número de esporos e espécies de FMA
nas áreas estudadas (Carrenho et al., 2010).
Espécies indicadoras são definidas como as espécies mais características de um
grupo (Dufrêne e Legendre, 1997). Quase todas as espécies consideradas indicadoras
pertenciam à área de referência. Dessas, Ambispora appendicula não estava presente em
nenhuma outra área, o que retrata a sensibilidade desta espécie ao impacto das práticas
agrícolas. As outras espécies indicadoras da área de referência também foram registradas
nas áreas de cultivo, porém foram mais associadas à área de referência (Tabela 2).
Apenas uma espécie (Glomus sp. 2) foi considerada indicadora da área cultivada,
podendo ser utilizada como inoculante nas áreas de plantio de feijão caupi para melhorar a
produtividade agrícola, pois espécies nativas estão mais adaptadas ao ambiente e em geral
são mais eficientes que espécies exóticas (Enkhtuya et al., 2000). Porém, estudos de
eficiência simbiótica são necessários para comprovar os benefícios dessas espécies (Santos
et al., 2008).
CONCLUSÕES
Os resultados deste trabalho evidenciaram uma ampla diversidade de FMA em
áreas do semiárido, e mostraram a importância da preservação de áreas naturais, uma vez
que algumas espécies se mostraram sensíveis às práticas agrícolas como Ambispora
appendicula que só ocorreu na área de Caatinga. No entanto, quando ocorre o distúrbio no
solo pela retirada da vegetação, uma das formas de minimizar os impactos é a introdução
de uma cultura micotrófica, como a utilizada neste trabalho. Essas práticas constituem
52
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
alternativas para a recuperação e/ou manutenção do solo, contribuindo para manter a
riqueza e a diversidade de FMA e aumento da produtividade da cultura, uma vez que os
atributos do solo influenciam diretamente as comunidades de FMA, como verificado neste
estudo.
53
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
4. DINÂMICA DE PROPÁGULOS DE FUNGOS MICORRÍZICOS
ARBUSCULARES (FMA) EM CULTIVO DE FEIJÃO CAUPI [VIGNA
UNGUICULATA (L.) WALP.] COM FIBRA DE COCO 1
RESUMO
O feijão caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp.] é amplamente cultivado na região
Nordeste devido à adaptação a altas temperaturas, salinidade e baixa disponibilidade de
água. Substratos orgânicos como fibra de coco e esterco bovino podem constituir
alternativa para maximizar a produção, minimizar os impactos agrícolas e favorecer os
micro-organismos promotores do crescimento de plantas como os fungos micorrízicos
arbusculares (FMA). Para testar a hipótese de que a adição de resíduos orgânicos ao solo
influencia a esporulação e a infectividade de FMA e a produção de proteínas do solo
relacionadas à glomalina (PSRG) em um campo cultivado com feijão caupi foi estudado
durante dois ciclos de produção. Amostras de solo rizosférico foram coletadas no Campus
de Ciências Agrárias da Univasf em Petrolina/PE, nas seguintes áreas: Caatinga (área de
referência), área de pousio, áreas cultivadas com feijão caupi recebendo 10 t ha-1 de esterco
e doses de 0, 12, 24, 48 t ha-1 de fibra de coco, totalizando seis tratamentos. Antes do
cultivo, amostras de solo foram retiradas da área de referência e da área de pousio. Após 30
dias da primeira coleta de solo, o cultivo de feijão caupi foi estabelecido na área de pousio.
As duas coletas seguintes foram realizadas após ciclos de 80 dias nas áreas de cultivo e na
área de referência. As seguintes variáveis foram analisadas: número de glomerosporos e de
propágulos infectivos de FMA, colonização micorrízica, produção de proteínas do solo
relacionadas à glomalina (PSRG). A densidade de glomerosporos não diferiu entre as
áreas; a colonização micorrízica não ultrapassou 40,8 % nas áreas cultivadas, mas chegou a
60% na Caatinga e foi influenciada pelo teor de fósforo no solo. O número total de
propágulos infectivos de FMA variou de 4,5 a 33 nas áreas cultivadas e alcançou 350
propágulos por cm3 de solo na área de referência. As quantidades de PSRG foram maiores
na área de referência e em geral correlacionadas aos teores de argila e de matéria orgânica
indicando a influência negativa da mudança da área natural para cultivo. Altos teores de
fósforo nas áreas cultivadas devido aos substratos orgânicos introduzidos influenciaram
negativamente a colonização micorrízica. A retirada da vegetação natural afeta
negativamente a atividade dos FMA, mas a utilização de práticas agrícolas sustentáveis
possibilita a recuperação dos propágulos infectivos desses fungos, possibilitando a
manutenção da comunidade de FMA nas áreas.
Palavras-chave:
monocultura,
micorriza
arbuscular,
_____________
Artigo a ser submetido para publicação no periódico Pedobiologia
substrato
orgânico.
54
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
INTRODUÇÃO
O feijão caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp.] também conhecido como feijão
macassar, feijão de corda, feijão fradinho e feijão verde, é uma leguminosa herbácea,
anual, geralmente adaptada a zonas temperadas e tropicais (Freire Filho et al., 1999). A
produção mundial de feijão caupi, no ano de 2007, estava distribuída por 36 países,
destacando-se entre os maiores produtores a Nigéria, o Níger e o Brasil, respectivamente,
que representavam 84,1 % da área e 70,9 % da produção mundial (FAO, 2009 apud Silva,
2011).
O caupi é amplamente cultivado nos países tropicais e principalmente na região
Nordeste do Brasil onde constitui a base da alimentação, apresentando algumas
características adaptativas a condições adversas, como tolerância a altas temperaturas,
salinidade e baixa disponibilidade de água (Sousa, 2006).
As sementes de feijão caupi são muito nutritivas, além de apresentar vitaminas
como tiamina, riboflavina e niacina (Davis et al., 1991). Devido ao seu valor proteico o
feijão caupi é utilizado na alimentação humana na forma de grãos secos ou verdes e como
vagens, mas seus ramos e folhas também são utilizados na alimentação animal na forma de
grãos e forragem (Freire Filho et al., 1999).
Fungos micorrízicos arbusculares (FMA) formam associação simbiótica com a
maioria das plantas terrestres, recebendo carboidratos obtidos durante a fotossíntese, em
troca, os fungos fornecem água e nutrientes minerais principalmente os de baixa
mobilidade, como o fósforo, além de formas indisponíveis de nitrogênio, absorvidos por
suas hifas no solo (Cardoso et al., 2010).
Uma forma de aumentar a produtividade de culturas de interesse econômico é a
utilização de resíduos orgânicos. Dentre esses, o esterco bovino é um dos substratos mais
utilizados na agricultura pelos benefícios às características físicas, químicas e biológicas do
solo, como o aumento da aeração, permeabilidade e diminuição da compactação do solo
(Garrido et al., 2008). Outro substrato que vem sendo utilizado é a fibra do coco que se
destaca por apresentar alta porosidade, retenção de umidade e baixo custo (Rosa et al.,
2001).
Tem sido demonstrada a influência desses substratos na atividade micorrízica, e a
fibra do coco tem sido utilizada em culturas como pimentão e melão; no entanto, os efeitos
benéficos às plantas pela adição desse substrato só são observados quando aplicado em
níveis abaixo de 30 % da fibra, e valores de 80 % prejudicam os FMA (Monteiro et al.,
55
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
2009; Silva Junior et al., 2006; 2010). A utilização de esterco tem beneficiado a
colonização micorrízica e a eficiência simbiótica em mudas de cafeeiro (Tristão et al.,
2006); porém, dependendo da dose, o esterco pode diminuir a colonização micorrízica
(Trindade et al., 2000).
O conhecimento sobre a interação das plantas de feijão caupi com FMA na
presença de resíduos orgânicos é importante para compreender se essa prática traz
benefícios à cultura e à comunidade microbiana. Para aplicação de FMA é necessário
conhecer a sua distribuição e seu potencial de infectividade no sistema de interesse,
considerando ainda se são produzidos esporos em quantidade suficiente para utilização
como inóculo (Smith e Read, 2008; Moreira e Siqueira, 2006).
O objetivo deste trabalho foi verificar se a adição de resíduos orgânicos (fibra de
coco e esterco bovino) ao solo influencia a esporulação, a infectividade e a atividade
desses fungos, representada pela produção de glomalina, em área cultivada com feijão
caupi.
MATERIAL E MÉTODOS
ÁREA DE ESTUDO
O estudo foi realizado com amostras de solo coletadas em área experimental
instalada no Campus de Ciências Agrárias da Universidade Federal do Vale do São
Francisco, Petrolina, PE. O solo da região é classificado como Argissolo Amarelo.
Segundo a classificação de Koppen o clima da região é tropical semiárido do tipo BSwh’,
caracterizado pela escassez e irregularidade das precipitações com temperatura média
anual de 28 °C e precipitação pluviométrica de 548 mm. Para o estudo foram consideradas
as seguintes áreas: Caatinga em sucessão espontânea com predomínio da leguminosa
Mimosa tenuiflora (Willd) Poir, utilizada como referência; área em pousio por
aproximadamente 10 anos, localizada próxima à área de referência; área cultivada com
feijão caupi, estabelecida na área de pousio, um mês após a primeira coleta de solo. A área
cultivada foi dividida em quatro tratamentos (0, 12, 24 e 48 t ha-1 de fibra de coco, todas
adubadas 10 t ha-1 de esterco bovino). O solo foi revolvido por meio de aração e gradagem,
aplicando-se uma única dose de 10 t ha-1 de esterco bovino na linha de plantio um mês
antes do experimento. A área total do experimento abrangeu 320 m2, com parcelas
medindo 16 m2 (4 x 4m). Um tubo gotejador foi instalado por linha de plantio e irrigações
foram realizadas diariamente por 1 hora.
56
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
A
B
C
D
E
F
Figura 1. (A) área em pousio, (B) aspecto da área após a retirada da vegetação, (C) e (D) primeiro e
segundo ciclos de feijão caupi (80 dias), e (E) e (F) aspecto da Caatinga em regeneração, em
Petrolina, PE.
DELINEAMENTO EXPERIMENTAL DO CULTIVO
O delineamento experimental foi em blocos ao acaso com quatro tratamentos (0,
12, 24 e 48 t ha-1 de bagaço de coco verde) em cinco repetições totalizando 20 parcelas de
16 m2 cada. A fibra do coco, parcialmente triturada, foi cedida pela Amacoco Nordeste e
utilizado como cobertura. A cultivar de feijão caupi utilizada foi a BRS Pujante, e as
sementes inoculadas com estirpe de Rizóbio (BR 3267) enviado pela Embrapa
Agrobiologia; o espaçamento foi de 30 cm entre plantas e 50 cm entre as linhas, com
57
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
duas plantas por cova. A coleta do solo foi realizada nas quatro fileiras centrais de cada
parcela.
COLETAS
O solo foi coletado de forma aleatória na rizosfera das plantas na profundidade de
0-20 cm e utilizado para as análises relativas aos FMA e caracterização físico-química do
solo. As três coletas realizadas nesse estudo foram referentes aos meses de julho/2011,
outubro/2011 (período seco) e março/2012 (período chuvoso). A primeira coleta foi
realizada para o reconhecimento da área no tempo zero (área de pousio antes do cultivo do
feijão), para isso, cinco amostras de solo, compostas de seis subamostras, foram coletadas
nas áreas de pousio e fragmento de Caatinga. As duas coletas subsequentes foram
realizadas aos 80 dias de cultivo, fase de frutificação do feijão caupi (outubro/2011 e
março/2012), nas parcelas com 0, 12, 24 e 48 t ha-1de bagaço de coco verde, além da área
de Caatinga (referência). No total, foram coletadas 360 subamostras de solo durante as três
coletas, considerando cinco amostras compostas de seis subamostras em cada
tratamento/área, cada amostra composta continha 4 kg de solo que foi acondicionado em
sacos plásticos e encaminhados para análise no laboratório de micorrízas da UFPE.
CARACTERÍSTICAS DO SOLO
A temperatura do solo foi aferida no local da coleta com um termômetro de solo. O
pH foi avaliado em amostras de 10 g de solo em água (Embrapa, 1999) e a umidade
determinada após secagem de 2 g de solo em estufa (105 °C/24 h), (Debosz et al., 1999).
As demais análises do solo foram realizadas na Estação Experimental de Cana-de-açúcar
do Carpina, pertencente à Universidade Federal Rural de Pernambuco (Tabela 1).
AVALIAÇÃO DOS PARÂMETROS MICORRÍZICOS
-Densidade de glomerosporos: o número de esporos foi obtido a partir de 50 g de solo,
após a extração via peneiramento úmido (Gerdermann e Nicolson, 1963), seguido por
centrifugação em água e sacarose a 50 % (Jenkins 1964), sendo a contagem realizada em
estereomicroscópio.
-Colonização micorrízica: fragmentos de raízes foram retirados de cada uma das amostras
de solo, diafanizados com KOH (10 %) e corados com Azul de Trypan (0,05 %) (Phillips e
Hayman, 1970). A percentagem de colonização radicular foi avaliada pelo método da
58
Pontes, Juliana - Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
lâmina com auxílio de microscópio, observando-se a presença ou ausência de estruturas
micorrízicas, em 100 segmentos de raízes por amostra (Giovannetti e Mosse 1980).
-Número mais provável de propágulos infectivos: o número de propágulos infectivos de
FMA foi estimado em bioensaio como proposto por Feldmann e Idczak (1994). Para cada
tratamento uma amostra composta do solo coletado foi diluída com areia esterilizada
(diluente), em quatro níveis de diluição (0; 1:10; 1:100; 1:1000), com cinco repetições
cada. Como planta hospedeira foi utilizado o milho (Zea mays L.); após 30 dias as raízes
foram coradas (Phillips e Hayman, 1970) e analisadas quanto à presença de estruturas de
FMA. O número de propágulos foi estimado de acordo com a tabela de Cochran (1950) e
expresso em número de propágulos por cm3 de solo.
-Proteínas do solo relacionadas à Glomalina (PSRG): a produção de PSRG foi
determinadas segundo o método de Wright e Upadhyaya (1998), com extração por
autoclavagem do solo com citrato de sódio, nas porções facilmente extraíveis e total,
quantificadas pelo método de Bradford (1976) em espectrofotômetro e os dados expressos
em mg glomalina por g de solo.
ANÁLISE ESTATÍSTICA
Os dados de colonização micorrízica e número de esporos foram transformados em
arco seno e log x+1, respectivamente, sendo submetidos à análise de variância e as médias
comparadas pelo teste de Tukey (P 5 %). Foram também realizadas análises de correlação
simples de Pearson (r) entre as variáveis do solo e os teores de glomalina total e facilmente
extraível, a porcentagem de colonização micorrízica e número de glomerosporos (Tabela
3). Essas análises foram realizadas com auxílio do programa Assistat 7.6 beta (Silva e
Azevedo, 2006).
Áreas de estudo
Caatinga
Pousio
Feijão+ 0 t ha-1
Feijão+ 12 t ha-1
Feijão+ 24 t ha-1
Feijão+ 48 t ha-1
Fe
Cu
155,0 a
45,5 b
60,7 b
70,3 b
56,3 b
39,2 b
0,4 bc
0,1 c
0,7 ab
1,0 a
0,7 ab
0,7 ab
Áreas de estudo
V
Mn
P
23,4 ab
30,0 a
21,3 b
21,1 b
20,8 b
21,5 b
19,5 c
88,0 b
114,0 a
132,0 a
118,0 a
130,0 a
Atributos Químicos
C
m
M.O.
%
1,4 a
0,7 b
0,8 b
0,9 b
0,9 b
0,9 b
0,5 a
0,0 b
0,0 b
0,0 b
0,0 b
0,0 b
2,5 a
1,3 b
1,4 b
1,6 b
1,5 b
1,6 b
0,3 a
0,7 a
0,7 a
0,7 a
0,5 a
0,8 a
0,6 a
0,1 b
0,1 b
0,1 b
0,1 b
0,1 b
Al
0,03 a
0,00 b
0,00 b
0,00 b
0,00 b
0,00 b
Ca
Mg
cmolc / dm3
3,2 a
1,6 a
2,4 a
0,7 b
2,7 a
0,9 b
2,8 a
1,0 b
2,7 a
0,9 b
3,0 a
0,8 b
H
S.B.
CTC
2,5 a
0,4 b
0,5 b
0,6 b
0,7 b
0,5 b
5,9 a
4,0 b
4,5 b
4,7 b
4,2 b
4,9 b
8,4 a
4,4 b
5,0 b
5,2 b
5,0 b
5,4 b
Atributos Físicos
pH
5,4 b
7,1 a
6,8 a
6,8 a
6,8 a
7,0 a
Umidade
%
0,91 b
0,49 b
3,18 a
3,22 a
3,44 a
3,74 a
TºC
Areia
Total
36,2 a
27,1 b
26,4 b
26,6 b
26,4 b
27,2 b
73,0 b
84,3 a
85,3 a
85,7a
85,5 a
86,4 a
Areia
Grossa
Areia Fina
Silte
Argila
13,9 a
13,1 a
41,7 b
31,4 a
6,1 b
9,6 b
53,0 a
31,2 a
5,9
b
8,8 bc
50,1 a
35,2 a
5,8 b
8,4 bc
52,3 a
33,5 a
5,8 b
8,7 bc
52,1 a
33,4 a
5,9 b
7,7 c
53,9 a
32,5 a
S.B.= Soma de bases trocáveis; CTC= Capacidade de troca catiônica; V= saturação por bases; m= Saturação por Al; M.O.= Matéria Orgânica. Médias seguidas pela mesma letra,
nas linhas, não diferem significativamente pelo teste de Tukey a 5 %.
Caatinga
Pousio
Feijão+ 0 t ha-1
Feijão+ 12 t ha-1
Feijão+ 24 t ha-1
Feijão+ 48 t ha-1
67,5 b
90,4 a
89,2 a
88,7 a
85,7 a
89,7 a
Zn
mg/dm3
10,8 ab
5,5 b
10,1 ab
10,9 ab
14,0 ab
16,0 a
Atributos Químicos
K
Na
Pontes, Juliana- Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Tabela 1. Caracterização química e física do solo em área de Caatinga, área em pousio e áreas cultivadas com feijão caupi e concentrações de fibra de coco como cobertura do
solo e adubadas com 10 t ha-1 de esterco bovino (exceto a Caatinga e pousio), em Petrolina, PE.
59
60
Pontes, Juliana- Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
RESULTADOS
Não houve diferença significativa no número de glomerosporos entre as áreas
cultivadas com feijão caupi e a área de referência. No entanto, na primeira coleta, o
número de esporos foi maior na área de referência do que na área de pousio. A média do
número de glomerosporos variou de 53,8 a 221,8 esporos 50g solo-1, nas áreas de pousio e
de referência, respectivamente. Em relação aos períodos de coleta, o número de
glomerosporos diferiu estatisticamente da primeira coleta em relação às demais, em todas
as áreas (Figura 2).
Figura 2. Densidade de esporos de fungos micorrízicos arbusculares em áreas de Caatinga (CA) e área antes
do cultivo (I coleta), áreas cultivadas com feijão caupi e fibra de coco nas concentrações 0 t ha-1(F+0), 12 t
ha-1(F+12), 24 t ha-1(F+24) e 48 t ha-1(F+48) e 10 t ha-1 de esterco (II e III coleta), em Petrolina, PE. Letras
minúsculas comparam os períodos de coleta; letras maiúsculas comparam entre as áreas dentro de cada
período. Médias seguidas pela mesma letra não diferem significativamente pelo teste de Tukey a 5 %.
A colonização micorrízica foi maior na área de referência do que nas demais áreas,
com média de 60,8 %. A taxa de colonização não diferiu estatisticamente entre os cultivos,
embora tenha sido menor nas áreas acondicionadas com fibra de coco em comparação com
a área não acondicionada e também com a área de pousio (Figura 3).
61
Pontes, Juliana- Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Figura 3. Colonização micorrízica em raízes de plantas da área de Caatinga (CA) e antes do plantio
(gramíneas espontâneas) (I coleta), áreas cultivadas com feijão caupi e fibra de coco nas concentrações 0 t ha1
(F+0), 12 t ha-1(F+12), 24 t ha-1(F+24) e 48 t ha-1(F+48) e 10 t ha-1 de esterco (II e III coleta), em Petrolina,
PE. Letras minúsculas comparam as coletas; letras maiúsculas comparam as áreas. Médias seguidas pela
mesma letra nas barras não diferem significativamente pelo teste de Tukey a 5 %.
O potencial de infectividade dos FMA variou de 4,5 a 350 propágulos por cm3, nas
áreas com feijão sem a fibra de coco e na área de referência, respectivamente. Os maiores
valores de propágulos foram encontrados na área de referência, na 3º coleta. Nas áreas
cultivadas houve tendência para aumento da infectividade dos FMA com o aumento da
dosagem de fibra de coco, mas as diferenças não foram significativas, e em todas as áreas o
número de propágulos aumentou com o estabelecimento da cultura (Tabela 2).
Tabela 2. Número mais provável (NMP) de propágulos infectivos de fungos micorrízicos arbusculares
(FMA) em solos de área de Caatinga, em pousio, áreas cultivadas com feijão caupi e concentrações de
fibra de coco e esterco bovino, em Petrolina, PE.
NMP cm-3
Áreas
I coleta
Caatinga
Pousio
-1
II coleta
III coleta
79,0
110,0
350,0
33,0
*
*
*
4,5
11,0
-1
*
11,0
17,0
Feijão + 24 t ha-1
*
6,8
14,0
Feijão + 48 t ha-1
*
13,0
33,0
Feijão + 0 t ha
Feijão + 12 t ha
*Não houve coleta nesses períodos.
As quantidades de PSRG variaram de 0,30 a 1,30 mg glomalina g solo seco-1 da
porção facilmente extraível e de 0,40 a 2,20 mg glomalina g solo seco-1 na glomalina total;
62
Pontes, Juliana- Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
os teores de glomalina (frações facilmente extraível e total) foram maiores na área de
referência e não diferiram estatisticamente entre as áreas cultivadas (Figura 4). Registrouse correlação positiva entre as frações de glomalina e o teor de argila, silte, matéria
orgânica e colonização micorrízica e correlação negativa com pH e teor de fósforo (Tabela
3).
A
B
Figura 4. Proteínas do solo relacionadas à glomalina fração facilmente extraível (A) e total (B) em solos de
área de Caatinga (CA) e área antes do cultivo (I coleta), áreas cultivadas com feijão caupi e fibra de coco nas
concentrações 0 t ha-1(F+0), 12 t ha-1(F+12), 24 t ha-1(F+24) e 48 t ha-1(F+48) e 10 t ha-1 de esterco (II e III
coleta), em Petrolina, PE. Letras minúsculas comparam os períodos de coleta dentro das áreas; letras
maiúsculas comparam as áreas dentro dos períodos de coleta. Médias seguidas pela mesma letra não diferem
significativamente pelo teste de Tukey a 5%.
63
Pontes, Juliana- Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Todas as variáveis dos FMA analisadas foram relacionadas com a umidade;
enquanto a produção de esporos aumentou com o aumento da umidade, as demais variáveis
decresceram.
Tabela 3. Coeficiente de correlação de Pearson entre as variáveis biológicas e os atributos do solo.
Esporos
Colonização
GFE
GT
Esporos
-0,3461
ns
Colonização
0,1614
ns
0,4895
**
GFE
0,1066
ns
0,5577
**
0,9688
**
GT
0,4155
*
-0,6285
**
-0,4001
*
-0,4405
*
Umidade
0,1283
ns
0,6327
**
0,8315
**
0,8839
**
Temperatura
0,0623
ns
0,5929
**
0,7046
**
0,7770
**
Fe
0,3429
ns
-0,7230
**
-0,6885
**
-0,7598
**
P
-0,0689
ns
-0,6184
**
-0,8293
**
-0,8716
**
pH
0,1358
ns
-0,2226
ns
-0,3821
*
-0,4098
*
K
0,0564
ns
0,5207
**
0,8352
**
0,8772
**
Na
0,5735
**
0,0540
ns
0,6172
**
0,5716
**
Ca
0,2730
ns
0,3509
ns
0,7552
**
0,8060
**
Mg
0,3115
ns
0,4759
**
0,8969
**
0,9235
**
CTC
-0,0371
ns
-0,5993
**
-0,8598
**
-0,9037
**
V
0,2212
ns
0,5073
**
0,6594
**
0,6861
**
M
0,2827
ns
0,4562
*
0,8844
**
0,9147
**
M.O.
0,0059
ns
-0,7308
**
-0,8699
**
-0,9225
**
Areia Total
0,1064
ns
0,6407
**
0,8871
**
0,9345
**
Silte
-0,1978
ns
0,8126
**
0,7536
**
0,8100
**
Argila
GFE= Glomalina facilmente extraível; GT= Glomalina total; S.B.= Soma de bases trocáveis; CTC=
Capacidade de troca catiônica; V= saturação por bases; m= Saturação por Al; M.O.= Matéria Orgânica.
** significativo ao nível de 1% de probabilidade (p <0,01); * significativo ao nível de 5% de
probabilidade (0,01 =< p <0,05); ns não significativo (p >= 0,05)
DISCUSSÃO
Os valores de glomerosporos foram similares aos encontrados na mesma cultura, em
quatro municípios pernambucanos, onde se registrou de 16 a 140 esporos 50 g de solo -1
(Maia e Trufem, 1990). No entanto, em cultivo tratado com substratos orgânicos, no estado
da Paraíba, a densidade de glomerosporos variou de 181 a 292 esporos 50 g de solo-1 no
segundo ciclo do cultivo (Sousa et al., 2012).
Ao contrário de resultados encontrados por outros autores, o número de esporos foi
correlacionado positivamente com a umidade (r=0,41; p<0,05 – Tabela 3); na maioria dos
trabalhos a esporulação é maior no período seco, em virtude da escassez de água
disponível, gerando estresse e estimulando a produção do propágulo pelos FMA (Souza et
al., 2003; Amorim et al., 2004; Bonfim et al., 2010). Apenas a terceira coleta foi realizada
no período chuvoso, porém todas as áreas cultivadas eram irrigadas periodicamente, por
isso não houve diferença entre a segunda e terceira coleta para o número de
glomerosporos.
64
Pontes, Juliana- Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
Mesmo com a irrigação e adubação no cultivo de caupi o número de glomerosporos
foi semelhante ao da área de referência. O elevado número de glomerosporos se deve
provavelmente ao favorecimento da esporulação pela monocultura com leguminosas, tendo
em vista que os FMA são influenciados pela comunidade vegetal com a qual estão
associados (van der Heijden et al., 1998).
Os valores de colonização micorrízica nas áreas cultivadas são semelhantes aos
encontrados em outras leguminosas, com valores de 11 e 64 %, como encontrado por Silva
et al. (2007). Em solos salinos, no estado do Ceará, foram encontrados resultados similares
para a mesma espécie de feijão, com percentual de colonização micorrízica de 48 %
(Tavares et al., 2009). No trabalho de Sousa et al. (2012) em cultivo de feijão caupi, na
Paraíba, utilizando como fontes orgânicas gliricídia, esterco caprino e gliricídia + esterco, a
colonização alcançou 35,3 % no primeiro ano de cultivo. Valores inferiores aos
encontrados neste trabalho foram observados em três leguminosas cultivadas em casa de
vegetação, em associação com FMA nativos (Caldeira et al., 2003) e em feijão caupi
cultivado em Araripina e Serra Talhada, PE com 0,3 e 1,5 % de colonização,
respectivamente (Maia e Trufem, 1990).
Na
área
de
referência,
o
percentual
de
colonização
micorrízica
foi
significativamente superior ao registrado nos cultivos de feijão, provavelmente porque em
condições de longos períodos de seca os FMA investem mais energia colonizando o
hospedeiro para se proteger das condições adversas, sendo o ambiente mais favorável às
espécies que se propagam por fragmentos de raízes colonizadas (Maia et al., 2010). Para
estabelecimento do cultivo a área foi manejada, rompendo-se o micélio micorrízico; além
disso, a cultura foi irrigada e recebeu adubação orgânica, o que favoreceu a retenção de
umidade no solo favorecendo os hospedeiros vegetais e não os FMA. Em áreas de
Caatinga a taxa de colonização micorrízica é variável, com valores entre 4 e 80 %
dependendo do hospedeiro (Maia et al., 2010).
A diferença significativa na colonização das plantas, entre as áreas estudadas,
também parece estar relacionada com os níveis elevados de fósforo, resultado da adição de
esterco ao solo; as plantas da área de referência, com menor nível de fósforo, apresentaram
maior colonização micorrízica ao contrário das áreas adubadas, com níveis elevados desse
nutriente e elevada umidade; esse dado foi confirmado pela correlação negativa entre o P
(r=-0,72, p<0,01 – Tabela 3) e a umidade (r=-0,62, p<0,01 – Tabela 3), com a colonização
micorrízica. De acordo com Moreira e Siqueira (2006), níveis elevados de P podem inibir o
65
Pontes, Juliana- Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
desenvolvimento da associação micorrízica. Resultados semelhantes foram encontrados
por Rheinheimer (1997) estudando o efeito dos FMA no crescimento de leguminosas
forrageiras, e por Sampaio et al. (2012), os quais mencionaram que maior disponibilidade
de nutrientes reduziu a colonização micorrízica em plantas de banana maçã (Musa spp.).
Os maiores valores de proteínas do solo relacionadas à glomalina na área de
Caatinga e os menores no cultivo indicam que as práticas agrícolas afetam a produção
dessa glicoproteína. O revolvimento do solo ocasiona a quebra do micélio e dos agregados,
favorecendo a degradação dessa glicoproteína pelos micro-organismos do solo (Treseder e
Turner, 2007); a adição da fibra do coco aparentemente não interferiu no teor de PSRG
registrado no solo cultivado. As frações GFE e total das PSRG foram correlacionadas
positivamente com o teor de argila (r=0,75 e r=0,81, respectivamente; p<0,01 – Tabela 3) e
matéria orgânica (r=0,88 e r=0,91, respectivamente; p<0,01 – Tabela 3). Resultados
semelhantes de correlação foram encontrados por Souza et al. (2011) que observaram
maiores teores de PSRG em solo ácidos, com baixo teor de P e com maiores concentrações
de argila, indicando que a argila serve como proteção mecânica da glomalina dentro de
seus agregados, como sugerido por Nichols e Wright (2005).
O maior valor de propágulos infectivos de FMA na área de referência confirma que
esta tem maior estabilidade quando comparada ao cultivo. As práticas agrícolas, que
ocorrem principalmente na camada superficial do solo, tornam os propágulos fúngicos
muitas vezes inviáveis pelo rompimento da rede de hifas e degradação das raízes e esporos
(Moreira e Siqueira, 2006).
Em áreas naturais, como a de Caatinga, o número de propágulos de FMA tende a
ser maior do que em áreas impactadas e cultivadas, como observado em área de Caatinga
impactada por mineração (Mergulhão et al., 2007; Silva et al., 2001), em cultivo
consorciado de milho e feijão (Sousa, 2009) e em cultivo de nim (Azadirachta indica A.
Juss) (Monte Júnior, 2011). Durante o presente estudo foi possível observar que com o
plantio o número de propágulos baixou substancialmente devido ao impacto produzido
pela prática agrícola, mas com o tempo e melhor estabelecimento das plantas e do
substrato no solo a condição inicial começou a ser restabelecida, nesta mesma área a
produtividade de feijão caupi foi avaliada por Vieira et al. (2012) onde os valores
encontrados são muito superiores a outras áreas de cultivo de caupi irrigado, demonstrando
a importância da utilização de substratos orgânicos em cultivos, visando à implementação
de uma agricultura mais sustentável.
66
Pontes, Juliana- Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
CONCLUSÕES
A retirada da vegetação natural afeta negativamente a atividade dos FMA, contudo
a adição de resíduos orgânicos (esterco bovino como adubo, e fibra de coco como
acondicionador do solo), tem influência diferenciada em sua atividade, em cultivo de feijão
caupi, afetando de forma geral positivamente os propágulos desses fungos. A utilização de
práticas agrícolas sustentáveis como a observada, possibilita a recuperação da atividade
dos FMA, além de elevar a produtividade da cultura.
67
Pontes, Juliana- Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
5. CONSIDERAÇÕES GERAIS
O bioma Caatinga apresenta riqueza e diversidade de espécies de fungos
micorrízicos arbusculares e essa comunidade pode ser afetada negativamente pela
substituição da vegetação natural pelo monocultivo, porém a introdução de culturas
micotróficas como o feijão caupi, contribuem para o desenvolvimento da comunidade de
FMA. A composição das espécies de FMA é diferenciada para as áreas de caatinga e
cultivo possivelmente pela influência dos atributos do solo, alterados pela mudança de uso
e adição de resíduos orgânicos. O estabelecimento do cultivo, as condições de umidade e
aporte de nutrientes no solo foram importantes para a restauração dos propágulos
infectivos de FMA nas áreas cultivadas.
Este trabalho contribuiu para o conhecimento da diversidade de fungos micorrízicos
arbusculares em áreas de Caatinga natural e agrossistemas. A identificação de 61 espécies
de FMA neste estudo representa cerca de 30 % das espécies descritas para o mundo e 77 %
das registradas para o Bioma. Ainda foi possível adicionar quatro novos registros para o
Bioma Caatinga, Acaulospora minuta, A. sieverdingii, Claroideoglomus luteum e Glomus
trufemii. Das 21 espécies identificadas ao nível genérico, seis constituem novos táxons
para a ciência e serão posteriormente descritos. Considerando os resultados obtidos neste
trabalho evidencia-se a importância dos estudos de diversidade nas áreas de Caatinga, além
de proporcionarem subsídios para aplicação biotecnológica desses organismos na produção
agroflorestal e recuperação de áreas degradadas.
68
Pontes, Juliana- Diversidade de Fungos Micorrízicos Arbusculares em cultivo de feijão caupi...
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