INSTRUÇÕES DE USO BD Directigen EZ Flu A + B

INSTRUÇÕES DE USO
BD Directigen EZ Flu A + B
Instruções de uso – BD Directigen EZ Flu A + B
1
BD Directigen EZ Flu A + B
Para a detecção diferenciada e direta dos antígenos virais de Influenza A e B
UTILIZAÇÃO A QUE SE DESTINA
O teste Directigen EZ Flu A +B consiste num imunoensaio cromatográfico rápido para detecção direta
e qualitativa de antígenos virais de influenza A e B em lavados / aspirados nasofaríngeos e swabs da
garganta de doentes sintomáticos. O teste Directigen EZ Flu A + B é um teste diferenciado, de tal
forma que é possível distinguir os antígenos virais de influenza A dos antígenos virais de influenza B
ao processar uma única amostra com um único dispositivo. O teste deve ser utilizado como auxiliar
no diagnóstico de infecções virais de influenza A e B. Todos os resultados de teste negativos devem
ser confirmados com uma cultura celular.
RESUMO E EXPLICAÇÃO
A gripe (influenza) apresenta-se classicamente com um aparecimento súbito de febre, arrepios, dores
de cabeça, mialgias e tosse sem expectoração. As epidemias de gripe ocorrem tipicamente durante
os meses de inverno com um número estimado de 114.000 hospitalizações1 e 36.000 mortes2 por
ano nos EUA. Os vírus influenza podem também causar pandemias, durante as quais as taxas de
doença e de morte derivada de complicações da gripe podem aumentar drasticamente.
Os doentes que se apresentam potencialmente infectados com influenza poderão beneficiar do
tratamento com um agente antiviral, especialmente quando administrado nas primeiras 48h após os
primeiros sintomas da doença. É importante distinguir rapidamente entre o influenza A e influenza B
para que os médicos possam escolher a intervenção antiviral seletiva. Além disso, é importante
determinar se a doença sintomática é provocada pelo influenza A ou B numa comunidade ou
instituição específica (por exemplo, um lar) para que se possa ser tomada a intervenção preventiva
apropriada junto dos indivíduos susceptíveis. Consequentemente, é importante não só determinar se
está presente o vírus influenza mas também qual o tipo de vírus implicado.
Os testes disponíveis de diagnóstico da influenza incluem o imunoensaio rápido, o ensaio de
imunofluorescência, a reação em cadeia da polimerase (PCR), sorologia e cultura viral.
3-10
Os
ensaios de imunofluorescência implicam a marcação de amostras imobilizadas em lâminas de
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2
microscópio com anticorpos de marcação fluorescente para observação através de microscopia de
fluorescência.
5,11,12
Os métodos de cultura requerem o isolamento inicial do vírus numa cultura de
células, seguido de ensaios de inibição da hemadsorção, de imunofluorescência ou de neutralização
para confirmar a presença do vírus influenza. 12,14
O teste Directigen EZ Flu A + B consiste num imunoensaio cromatográfico para a detecção de
antígenos de influenza A ou B em amostras respiratórias de doentes sintomáticos com resultados em
15 min.
A velocidade e procedimento simplificado do teste Directigen EZ Flu A + B permitem que seja
utilizado como um teste imediato de detecção de antígenos de Influenza A e B, fornecendo
informações relevantes para auxiliar no diagnóstico da influenza. A utilização do teste Directigen EZ
Flu A + B para diferenciar entre a infecção de influenza A e B pode fornecer uma oportunidade para
uma melhor escolha da intervenção antiviral.
PRINCÍPIOS DO PROCEDIMENTO
O teste Directigen EZ Flu A + B consiste num ensaio cromatográfico para a detecção qualitativa de
antígenos virais de influenza A e B em amostras processadas de espécimes respiratórios. Quando as
amostras são processadas e adicionadas ao dispositivo de teste, os antígenos virais de influenza A
ou B associam-se aos anticorpos anti-influenza, conjugados com partículas para visualização, nas
tiras de teste A e B correspondentes. O complexo antígeno-conjugado migra ao longo da tira de teste
até à área de reação e é capturado pela linha de anticorpos existente na membrana. Um resultado
positivo para influenza A é visualizado como uma linha púrpura avermelhada na posição de teste “T”
e na posição de controle “C” da janela de leitura Directigen EZ Flu A. Um resultado positivo para
influenza B é visualizado como uma linha púrpura avermelhada na posição de teste “T” e na posição
de controle “C” da janela de leitura Directigen EZ Flu B.
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REAGENTES
No kit Directigen Ez Flu A + B estão incluídos os seguintes componentes:
Dispositivos BD Flu A + B
30 dispositivos
Dispositivo embalado em folha de alumínio e que
inclui duas tiras de reação. Cada tira tem uma linha
de teste de anticorpo monoclonal específico para o
antígeno viral Influenza A ou B e uma linha de
controle de anticorpo anti-espécie.
Reagente E
4,7mL
Detergente,
com
azida
de
sódio
a
0,2%
(conservante)
Controle A+/B-
2,8mL
Controle Positivo Influenza A e Negativo Influenza B,
antígeno de Influenza A inativo (nucleoproteína
recombinante)
com
azida
de
sódio
a
0,1%
(conservante).
Controle B+/A-
2,8mL
Controle Positivo Influenza A, antígeno de Influenza
B inativo (nucleoproteína recombinante) com azida
de sódio a 0,1% (conservante).
Tubos DispensTube
30
Tubos para processamento da amostra e colocação
da amostra dentro dos dispositivos.
Pontas DispensTube
30
Pontas para filtrar a amostra, quando esta é
colocada dentro dos dispositivos.
Materiais necessários mas não fornecidos: Pipeta (capacidade de 300µL), cronometro, vortex,
meios de transporte (consulte “Coleta e manipulação das amostras”), soro fisiológico normal e swabs
de (espuma de) poliuretano.
Avisos e precauções:
Para uso em Diagnóstico in-vitro.
1. Na amostras podem existir microrganismos patogênicos, incluindo os vírus das hepatites e o
vírus da imunodeficiência humana. Na manipulação de todos os itens contaminados com
sangue e outros líquidos corporais, devem ser seguidas as “Precauções Padrão”15-18 e as
linhas de orientação da instituição.
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2. Os reagentes contêm azida de sódio, a qual é nociva por inalação, ingestão ou em contato
coma a pele. O contato com ácidos liberta um gás altamente tóxico. Se ocorrer contato com a
pele, lavar imediatamente com água em abundância. A azida de sódio pode reagir com as
canalizações de chumbo e cobre, produzindo azidas metálicas altamente explosivas. Ao
eliminar, deve-se irrigá-la com um grande volume de água para evitar a sua acumulação.
3. Não utilizar componentes do kit para além do prazo de validade.
4. Não misture reagentes provenientes de kits com números de lote diferentes.
5. Não reutilize o dispositivo.
6. Não utilize o kit se o Controle A+/B- e o Controle B+/A- não produzirem os resultados
apropriados.
7. Utilize apenas swabs de (espuma de) poliuretano.
Armazenamento e manipulação: Os kits podem ser conservados a 2 – 25ºC. NÃO CONGELAR. Os
reagentes e dispositivos deverão encontrar-se à temperatura ambiente (15-25º) quando forem
utilizados nos testes.
COLETA E PREPARAÇÃO DE AMOSTRAS
Transporte e armazenamento de amostras:
As amostras recém-colhidas devem ser processadas imediatamente. Se for necessário, é possível
armazenar as amostras num meio de transporte adequado e mantê-las a uma temperatura de 2-8ºC
até 72 h e a -20º até sete dias.
O cumprimento dos métodos corretos de coleta e preparação das amostras é crucial. Não centrifugar
as amostras antes de proceder à sua utilização, dado que a remoção do material celular poderá
influenciar adversamente a sensibilidade do teste. As amostras obtidas na fase inicial da doença têm
uma maior concentração do vírus.
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Meios de transporte: Os meios de transporte apresentados em seguida foram testados e são
compatíveis com o Teste Directigen EZ Flu A + B.
Meio Bartels ViraTrans
PBS com Albumina Sérica Bovina (BSA) a 0,5%
Cellmatics
PBS com gelatina a 0,5%
Meio essencial mínimo de Earle (EMEM)
Soro fisiológico tamponado com fosfato (PBS)
EMEM com BSA a 0,5%
Starplex Multitrans
EMEM com BSA a 1%
Fosfato de sacarose (2-SP)
Solução de sais basal de Hanks
Meio líquido de soja Trypticase
Meio M4
Meio líquido de soja Trypticase + gelatina a 0,5%
Meio M4 RT
Meio líquido de soja Trypticase + BSA a 0,5%
Meio M5
Meio líquido de infusão de vitela (VIB)
Soro fisiológico normal*
VIB com BSA a 0,5%
Meio de Transporte Viral Universal BD
* A conservação por congelamento das amostras recolhidas com soro fisiológico normal não é
recomendada para a realização de testes Directigen EZ Flu A + B.
Poderão ser utilizados outros meios de transporte se for realizado um exercício de validação
apropriado.
NOTA: O meio EMEM com lactalbumina (ou seja, 0,5% ou 1%) ou qualquer outro meio de transporte
que inclua lactalbumina não é compatível com o teste Directigen EZ Flu A + B test.
Coleta e preparação das amostras: As amostras aceitáveis para análise com o teste Directigen EZ
Flu A + B incluem lavados/aspirados nasofaríngeos e swabs da garganta.
Procedimento para amostras de lavados/aspirados nasofaríngeos:
1. São recomendados volumes de amostras de 1-3mL. Se for utilizado um meio de transporte, é
preferível um mínimo de diluição da amostra.
2. Devem ser evitados volumes de lavados excessivos, uma vez que poderão resultar numa
diminuição da sensibilidade do teste.
3. Processe a amostra conforme descrito em “Procedimento do teste”.
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Procedimento para amostras de swabs da garganta (são necessários swabs de (espuma de)
poliuretano – consulte a seção “Apresentação”):
1. Amostras recolhidas com swab devem ser processadas sem diluição no meio de transporte,
conforme descrito em “Procedimento do teste”.
PROCEDIMENTO
Procedimento do teste
NOTAS:
•
Os reagentes, as amostras e os dispositivos deverão encontrar-se à temperatura ambiente
(15-25º) quando forem utilizados nos testes.
•
Antes de retirar uma alíquota para processamento, misture totalmente as amostras. Não
centrifugue as amostras.
•
Os tubos DispensTube e frascos de reagentes deverão ser mantidos em posição vertical (a
cerca de 2,5cm do poço de amostras do dispositivo Directigen EZ Flu A + B ou do tubo
DispensTube), enquanto o utilizador coloca suavemente uma gota de cada vez.
1. Retire o dispositivo do Directigen EZ Flu A + B da embalagem de folha de metal laminado
imediatamente antes do teste.
2. Identifique um dispositivo e um tubo DispensTube para cada controle e amostra a testar.
3. Coloque o(s) tubo(s) DispensTube(s) identificado(s) na área designada da estação de trabalho
ou do suporte de tubos.
4. Misture o reagente suavemente. Coloque 4 gotas no tubo DispensTube. Mantenha o frasco de
reagente na posição vertical (a cerca de 2,5cm acima do tubo DispensTube) enquanto
adiciona as gotas.
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5. Misture totalmente a amostra ou o controle e análise conforme é indicado abaixo:
a. Para amostras de lavado/aspirado nasofaríngeo:
1. Misture completamente a amostra no vortex ou manualmente. Não centrifugue.
2. Pipete 300µL da amostra para dentro do tubo DispensTube (com reagente E).
b. Para amostras da garganta:
1. Adicione 300µL de soro fisiológico normal ao tubo DispensTube (com reagente E).
2. Introduza o swab e pressione rodando o swab 6-8 vezes enquanto aperta o tubo.
3. Retire o swab (aperte o tubo para remover o excesso de fluído da ponta do swab).
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c. Para controle do kit:
1. Misture suavemente os frascos de Controle A+/B- e de Controle B+/A-.
2. Adicione 6 gotas de Controle A+/B- ao tubo DispensTube (com reagente E) com a
identificação apropriada.
3. Adicione 6 gotas de Controle B+/A- ao tubo DispensTube (com reagente E) com a
identificação apropriada.
6. Introduza uma ponta DispensTube no tubo DispensTube que contém a amostra processada
ou controle.
Nota: Não utilize pontas de outros produtos Directigen.
7. Misture totalmente a amostra no vortex ou manualmente.
8. Inverta o tubo dispensTube e, segurando o tubo na metade superior e longe da ponta, aperte
suavemente para verter três (3) gotas da amostra processada no poço de amostra Flu A e três
(3) gotas no poço de amostra Flu B do dispositivo Directigen EZ Flu A + B com a identificação
apropriada.
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Nota: Se apertar o tubo próximo da ponta, poderá provocar a ejeção da ponta e derramar o
conteúdo do tubo.
9. Depois de adicionar a amostra, verifique o resultado do teste após 15 min e registre o mesmo.
Controle de qualidade:
Os requisitos do controle de qualidade devem ser efetuados de acordo com os regulamentos ou
requisitos de acreditação locais e/ou nacionais e com os procedimentos padrão de controle de
qualidade do seu laboratório.
Cada dispositivo Directigen EZ Flu A + B contém controles internos/processuais positivos e negativos.
•
O aparecimento de uma linha de controle púrpura avermelhada na janela de leitura Flu A e/ou
Flu B na posição de controle “C” fornece um controle interno positivo que valida o
funcionamento correto do reagente e confirma que foi seguido o procedimento do teste
correto.
•
A área de membrana ao redor do teste Flu A e/ou Flu B e das linhas de controle consiste no
controle internonegativo do dispositivo. Uma área de fundo, de cor branca a cor-de-rosa claro,
indica se o teste está sendo realizado corretamente.
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Cada kit Directigen EZ Flu A + B contém Controle A+/B- e Controle B+/A- em forma líquida:
Estes controles são testados da mesma forma que as amostras dos doentes e fornecem um meio
de controle de qualidade externo.No mínimo, estes controles líquidos deverão ser processados
como um procedimento de controle de qualidade para cada novo lote ou remessa recebida. Se
pretendido, Também é possível determinar a qualidade do desempenho dos reagentes e da
técnica de teste ao utilizar amostras qualificadas como positivas ou negativas para o vírus
Influenza A ou B.
A formação de uma linha púrpura ou avermelhada na membrana da janela de leitura Flu A na
posição de teste (T) e na posição de Controle (C), quando o Controle A+/B- é testado, e da janela
de leitura Flu B na posição teste (T) e na posição de Controle (C), quando o Controle B+/A- é
testado, indica que a propriedade de associação ao antígeno Influenza da tira de teste está
funcional.
A formação de uma linha de controle púrpura avermelhada na posição de Controle (C) na janela
de leitura Flu B e ausência de uma linha de teste púrpura avermelhada na posição de teste (T),
quando é utilizado o Controle A+/B-, consistem num resultado apropriado de controle negativo de
Flu B que indica desempenho adequado dosreagentes e um procedimento de teste correto. De
forma semelhante, a formação de uma linha de controle púrpura avermelhada na posição de
Controle (C) da janela de leitura Fla A e ausência de uma linha teste púrpura avermelhada na
posição de teste (T), quando é utilizado o Controle A+/B-, indica um resultado apropriado de
controle negativo Flu A.
Se os controles do kit não apresentarem os resultados esperados, não efetue o relatório dos
resultados do doente. Contate o seu representante local da BD ou os Serviços de Assitência
Técnica para obter assistência.
INTERPRETAÇÃO DE RESULTADOS
NOTA: A intensidade da linha de controle pode variar entre as janelas de leitura Flu A e Flu B.
Esta variação na intensidade da linha de controle é aceitável. A área do fundo deve ser branca a
rosa clara e pode variar de intensidade entre as janelas de leitura Flu A e Flu B.
Teste positivo de Flu A (presença de antígeno influenza A) – Surge uma linha púrpura
avermelhada na posição de teste “T” e na posição de Controle “C” da janela de leitura Directigen
EZ Flu A. Também deverá aparecer uma linha púrpura avermelhada na posiçào de Controle “C”
na janela de leitura Directigen EZ Flu B. Isto indica que o antígeno de Influenza A foi detectado na
amostra. A área de fundo deverá apresentar uma cor branca a rosa claro.
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Teste positivo de Flu B (presença de antígeno influenza B) -
Surge uma linha púrpura
avermelhada na posição de teste “T”e na posição de Controle “C” da janela de leitura Directigen
EZ Flu B. Também deverá aparecer um linha púrpura avermelhada na posição de Controle “C” na
janela de leitura Directigen EZ Flu A. Isto indica que o antígeno de influenza B foi detectado na
amostra.A área de fundo deverá apresentar uma cor branca a rosa claro.
Teste negativo de Flu A ou Flu B (sem detecção de antígeno) – Sem linha púrpura
avermelhada na posição de teste “T” na janela de teste Flu A ou Flu B indica que não foi
detectado antígeno de influenza A nem influenza B nem ambos na amostra. Uma linha púrpura
avermelhada na posição de Controle “C” da janela de leitura Flu A, da janela de leitura Flu B ou
de ambas indica um desempenho correto do procedimento de teste e dos reagentes. A área de
fundo deverá apresentar uma cor branca a rosa claro.
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Teste inválido – O teste é inválido quanto a Flu A ou Flu B quando não é visível uma linha
púrpura avermelhada junto à posição de controle “C” das respectivas janelas de leitura. O teste
também é inválido se surgir uma linha púrpura avermelhada na posição de teste “T” nas duas
janelas de leitura, Flu A e Flu B, para a mesma amostra. Se o teste é inválido, deverá ser
repetido.
RELATÓRIO DOS RESULTADOS
Teste positivo – Positivo quanto à presença de antígeno de influenza A ou influenza B. Um
resultado positivo pode ocorrer na ausência de vírus viáveis.
Teste negativo – Negativo quanto à presença de antígenos de influenza A ou influenza B. A
infecção pelo influenza não pode ser excluída, uma vez que o antígeno existente na amostra pode
situar-se abaixo do limite de detecção do teste. É recomendada a confirmação das
amostrasnegativas através da cultura em células.
Teste inválido – O resultado do teste é inconclusivo. Não inclua os resultados no relatório.
LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO
Este teste não permite estabelecer a etiologia de infecções respiratórias provocadas por outros
microrganismos além do vírus influenza A ou B. O teste Directigen EZ Flu A + B tem capacidade
para detectar partículas de influenza viáveis e não viáveis. O desempenho do teste Directigen EZ
Flu A + B depende da carga de antígeno e pode não apresentar correlação com a cultura celular
efetuada na mesma amostra.
A coleta de amostras inadequada, o manuseio/transporte incorretos da amostra ou baixos níveis
de eliminaçào do vírus poderão produzir um resultado falso negativo. Da mesma forma, um
resultado de teste negativo não elimina a possibilidade de uma infecção de influenza A e/ou
influenza B. A validade do teste Directigen EZ Flu A + B não foi demonstrada para a identificação
ou confirmação de isolados de culturas de células.
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13
VALORES ESPERADOS
O grau de positividade observado no teste respiratório é variável, dependendo do método de
coleta de amostras, sistema de manipulação/transporte utilizado, método de detecção utilizado,
altura do ano, idade do doente, localização geográfica e, mais importante, prevalência local da
doença. A prevalência global observada em cultura durante o estudo clínico de 2003-2004 foi de
24,3% para a influenza A e 3,8% para o influenza B. Durante o estudo clínico de 2004-2005,
prevalência global observada em cultura foi de 26,0% para o influenza A e 31,2% para o influenza
B.
CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO
As características do desempenho do teste Directigen EZ Flu A + B foram estabelecidas num
estudo multicêntrico realizado em cinco centros clínicos, durante a estação de doenças
respiratórias de 2003-2004, e em 13 centros clínicos, durante a estação de doenças respiratórios
de 2004-2005. Os centros clínicos estiveram localizados em diferentes áreas geográficas dos
Estados Unidos da América, Japão e Hong Kong.
Procedeu-se à avaliação de um total de 735 amostras prospectivas utilizando o teste Directigen
EZ Flu A + B e cultura celular. Estas amostras consistiram em lavado nasofaríngeo, aspirados
nasofaríngeos e swabs da garganta de doentes com suspeita de terem influenza.
Desempenho clínico:
As características de desempenho do teste Directigen EZ Flu A + B, em comparação com o
método de cultura em células para cada tipo de amostra, são indicadas na Tabela 1 a tabela 4.
Instruções de uso – BD Directigen EZ Flu A + B
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Tabela 1: Resumo do desempenho do teste Directigen EZ Flu A + B em comparação com a
cultura para todos os tipos de amostras – Influenza A, combinação das estações de
doenças respiratórioas de 2003-2004 e 2004-2005.
Tipo de amostra
Lavado/aspirados
Teste Directigen EZ Flu A + B
P
Nasofaríngeos
Sensibilidade: 86% (IC 95%: 79%-91%)
Especificidade: 99% (IC 95%: 98%-100%)
Swabs da garganta
Sensibilidade: 77% (IC 95%:64%-87%)
Especificidade: 86% (IC 95%: 81%-91%)
Cultura em
células
P
N
115
2
N
19
330
P
N
43
13
29
184
Tabela 2: Resumo do desempenho do teste Directigen EZ Flu A + B em comparação com a
cultura para todos os tipos de amostras – Influenza B, combinação das estações de
doenças respiratórias de 2003-2004 e 2004-2005.
Tipo de amostra
Lavado/aspirados
Nasofaríngeos
Sensibilidade: 80% (IC 95%: 69%-89%)
Especificidade: 100% (IC 95%: 99%-100%)
Swabs da garganta
Sensibilidade: 69% (IC 95%:55%-81%)
Especificidade: 99% (IC 95%: 96%-100%)
Instruções de uso – BD Directigen EZ Flu A + B
Teste Directigen EZ Flu A + B
P
Cultura em
células
P
N
57
1
N
14
394
P
N
38
17
3
211
15
Tabela 3: Resumo do desempenho do teste Directigen EZ Flu A + B em comparação com a
cultura para todos os tipos de amostras por população – Influenza A, combinação das
estações de doenças respiratórias de 2003-2004 e 2004-2005.
Cultura em células
Pediátrico
Adultos
Teste
Directigen EZ
Tipo de amostra
Flu A + B
Lavado/aspirados
P
Nasofaríngeos
N
Sensibilidade:Pediátrico: 90% (IC 95%: 82%-95%); Adulto:
72% (IC 95%: 53%-87%)
Especificidade:Pediátrico: 99% (IC 95%: 98%-100%), Adulto:
100% (IC 95%: 90%-100%)
Teste
Directigen EZ
Flu A + B
Tipo de amostra
P
Swabs da garganta
N
Sensibilidade:Pediátrico: 79% (IC 95%: 65%-90%); Adulto:
63% (IC 95%: 24%-91%)
Especificidade:Pediátrico: 87% (IC 95%: 81%-91%), Adulto:
85% (IC 95%: 69%-94%)
Instruções de uso – BD Directigen EZ Flu A + B
P
94
11
N
2
294
P
21
8
N
0
36
Pediátrico
Adultos
P
38
10
P
5
3
N
23
151
N
6
33
16
Tabela 4: Resumo do desempenho do teste Directigen EZ Flu A + B em comparação com a
cultura para todos os tipos de amostras por população – Influenza B, combinação das
estações de doenças respiratórias de 2003-2004 e 2004-2005.
Cultura em células
Pediátrico
Adultos
Teste
Directigen EZ
Tipo de amostra
Flu A + B
Lavado/aspirados
P
Nasofaríngeos
N
Sensibilidade:Pediátrico: 79% (IC 95%: 67%-88%); Adulto:
72% (IC 95%: 53%-87%)
Especificidade:Pediátrico: 99% (IC 95%: 98%-100%), Adulto:
89% (IC 95%: 52%-100%)
Teste
Directigen EZ
Flu A + B
Tipo de amostra
P
Swabs da garganta
N
Sensibilidade:Pediátrico: 61% (IC 95%: 42%-78%); Adulto:
79% (IC 95%: 58%-93%)
Especificidade:Pediátrico: 99% (IC 95%: 97%-100%), Adulto:
91% (IC 95%: 72%-99%)
P
49
13
N
1
338
P
8
1
N
0
56
Pediátrico
Adultos
P
19
12
P
19
5
N
1
190
N
2
21
Reprodutibilidade: A reprodutibilidade do teste Directigen EZ Flu A + B foi avaliada em quatro locais. O painel
de reprodutibilidade é composto por 20 amostras de influenza simuladas. Estas amostras incluem amostras
positivas com baixa concentração de Flu A ou Flu B (próximo do Limite de Detecção do ensaio), amostras
positivas com concentraçào média de Flu A ou Flu B e amostras negativas. A taxa de reprodutibilidade global
do teste Directigen EZ Flu A + B foi de 99,6%.
Instruções de uso – BD Directigen EZ Flu A + B
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Estudos analíticos
Sensibilidade analítica (limite de detecção)
O limite de detecção (LOD) para o teste Directigen EZ Flu A + B foi estabelecido para um total de 15 estirpes de
influenza: nove de influenza A e seis de influenza B.
Tipo
Estirpe viral Influenza
LOD (CEID50/mL*)
A
A/PR/8/34 (H1N1)
1,75 X 104
A
A/FM/1/47 (H1N1)
1,98 X 103
A
A/NWS/33 (H1N1)
1,00 X 104
A
A1/Denver/1/57 (H1N1)
5,56 X 103
A
A/New Jersey/8/76 (H1N1)
4,45 X 103
A
A/Port Chalmers/1/73 (H3N2)
1,00 X 103
A
A/Hong Kong/8/68 (H3N2)
2,78 X 102
A
A2/Aichi2/68 (H3N2)
3,50 X 103
A
A/Victoria/3/75 (H3N2)
2,78 X 104
B
B/Lee/40
6,95 X 105
B
B/Allen/45
2,00 X 103
B
B/GL/1739/54
5,56 X 103
B
B/Taiwan/2/62
3,50 X 102
B
B/Maryland/1/59
2,23 x 104
B
B/Hong Kong/5/72
2,23 x 104
* CEID50mL = Dose infecciosa do embrião de galinha, em que 50% dos embriões morrem.
Especificidade Analítica (Reatividade Cruzada)
O Teste Directigen EZ Flu A + B foi avaliado com um total de 98 microrganismos. As 51 bactérias e
duas leveduras foram testadas a uma concentração de ~108 CFU/mL (CFU – unidades de formação
de colônias). Mycoplasma pneumoniae e Mycoplasma orale foram testadas a uma cocentração de
>106 e >107 CCU/mL (CCU – unidades de mudança de cor), respectivamente. As três estirpes de
micobactérias foram inoculadas com uma concentração de 107 CFU/mL e Clamydia trachomatis
LGVII foi testada a 2,5 x 108 EB/mL (EB = corpos elementares). Os 39 vírus testados foram avaliados
a concentrações de 104 – 109 TCID50mL – dose infecciosa de cultura em tecidos, em que 50% das
células são lisadas) ou 104 a 108 CEID50mL (CEID50 – dose infecciosa do embrião de galinha, em que
50% dos embriões de galinha são infectados. Todos os microrganismos (com excessão dos vírus
influenza) produziram resultados do teste Flu A e B negativos. Os vírus influenza A que foram
testados (n=2) apresentaram resultados de teste Flu A positivos e resultados de teste Flu B
negativos. Os vírus influenza B que foram testados (n=6) apresentaram resultados de teste Flu B
postivos e resultados de teste Flu A negativos.
Instruções de uso – BD Directigen EZ Flu A + B
18
Acinetobacter baumannii
Neisseria meningitidis
Coxsackievirus Tipo A9 (Griggs)
Neisseria mucosa
Coxsackievirus Tipo A9 (P.B.
(calcoaceticus)
Actinobacillus suis
Bozek)
Bacteroides fragilis
Neisseria sicca
Coxsackievirus Tipo B5 (Faulkner)
Bordetella pertussis
Neisseria subflava
Coxsackievirus Tipo B6 (Schmitt)
Candida albicans
Peptostreptococcus anaerobius
Coxsackievirus Tipo A21
(Kuykendall)
Candida glabrata
Porphyromonas asaccharolyticus
Cytomegalovirus (AD-169)
Cardiobacterium hominis
Prevotella oralis
Echovirus Tipo 2 (Cornelis)
Chlamydia trachomatis LGVII
Proteus mirabilis
Echovirus Tipo 3 (Morrisey)
Corynebacterium diphtheriae
Proteus vulgaris
Echovirus Tipo 6 (D’Amori)
Eikenella corrodens
Pseudomonas aeruginosa
HSV Tipo 1 (HF)
Enterococcus faecalis
Salmonella choleraesuis
HSV Tipo 2 (MS)
Enterococcus gallinarum
sub minnesota
Influenza A/PR/8/34 (H1N1)
Escherichia coli
Serratia marcescens
Influenza A/Victoria/3/75 (H3N2)
Fusobacterium nucleatum
Staphylococcus aureus
Influenza B/Hong Kong/5/72
Gardnerella vaginalis
Staphylococcus aureus – Cowan 1
Influenza B/Lee/40
Haemophilus aphrophilus
Streptococcus bovis II grupo D
Influenza B/Allen/45
Haemophilus influenza
Staphylococcus epidermidis
Influenza B/GL/1739/54
Haemophilus parainfluenzae
Streptococcus mutans
Influenza B/Maryland/1/59
Haemophilus paraphrophilus
Streptococcus oralis
Influenza B/Taiwan/2/62
Kingella kingae
Streptococcus pneumoniae
Vírus do sarampo (Edmonston)
Klebsiella pneumoniae
Streptococcus pyogenes gruppe A
Vírus da parotidite (Enders)
Lactobacillus casei
Streptococcus sanguis
Parainfluenza Tipo 1 (Sendia/52)
Lactobacillus fermentum
Streptococcus sp. grupo B
Parainfluenza Tipo 2 (Greer)
Lactobacillus plantarum
Streptococcus sp. grupo C
Parainfluenza Tipo 3 (C243)
Legionella pneumophila
Streptococcus sp. grupo F
Rhinovirus Tipo 1ª (2060)
Listeria monocytogenes
Streptococcus sp. grupo G
Rhinovirus Tipo 2 (HGP)
Moraxella catarrhalis
Veillonella parvula
Rhinovirus Tipo 13 (353)
Mycobacterium avium
Adenovirus, Tipo 3 (GB)
Rhinovirus Tipo 15 (1734)
Mycobacterium intracellulare
Adenovirus, Tipo 5 (Adenoid 75)
Rhinovirus Tipo 16 (11757)
Mycobacterium tuberculosis
Adenovirus, Tipo 7 (Gomen)
Rhinovirus v 37 (151-1)
Mycoplasma orale
Adenovirus, Tipo 10 (J.J)
RSV Tipo A (Long)
Mycoplasma pneumoniae
Adenovirus, Tipo 18 (D.C.)
RSV Tipo B (Wash/1853/62)
Neisseria gonorrhoeae
Coronavirus (229E)
VZV (Ellen)
Instruções de uso – BD Directigen EZ Flu A + B
19
Reatividade de Estirpes com virus Influenza A e B
O teste Directigen EZ Flu A + B foi avaliado por uma painel de 37 estirpes de influenza. Neste painel,
estavam representados todos os subtipos de hemaglutinina (15) e neuraminidase (9) de influenza A.
Todas as estirpes humanas e animais de influenza A apresentaram resultados de teste Flu A
positivos e resultados de teste Flu B negativos. Por outro lado, todas as estirpes de influenza B
apresentaram resultados de teste Flu B positivos e resultados de teste Flu A negativos.
Vírus influenza (estirpe
Tipo de vírus
humana)
Vírus influenza (estipe
Tipo de vírus
animal)
A/NWS/33
A (H1N1)
A/Turkey/Kansas/4880/80
A (H1N1)
A/PR/8/34
A (H1N1)
A/Mallard/New
A (H2N2)
York/6750/78
A1/FM/1/47
A (H1N1)
A/Turkey/England/69
A (H3N2)
A1/Denver/1/57
A (H1N1)
A/Chicken/Alabama/75
A (H4N8)
A/New Jersey/8/76 (Hsw
A (H1N1)
A/Turkey/Wisconsin/68
A (H5N9)
A/Port Chalmers/1/73
A (H3N2)
A/Turkey/Canada/63
A (H6N8)
A/Victoria/3/75
A (H3N2)
A/Turkey/Oregon/71
A (H7N3)
A/Vietnam/3028/04
A (H5N1)
A/Turkey/Ontario/6118/67
A (H8N4)
A/Thailand/MK2/04
A (H5N1)
A/Turkey/Wisconsin/66
A (H9N2)
A/Hong Kong/486/97
A (H5N1)
A/Chicken/Germany/N/49
A (H10N7)
A/California/07/2204
A (H3N2)
A/Duck/Memphis/546/74
A (H11N9)
B/Lee/40
B
A/Duck/Alberta/60/76
A (H12N5)
B/Allen/45
B
A/Gul/MD/704/77
A (H13N6)
B/GL/1739/54
B
A/Mallard/Guriev/263/82
A (H14N5)
B/Maryland/1/59
B
A/Shearwater/WA/2576/79
A (H15N6)
B/Taiwan/2/62
B
B/Mass/3/66
B
B/Homg Kong/5/72
B
B/Victoria/504/00
B
B/Tokyo/53/99
B
B/Quingdao/102/91
B
B/Leningrad/86/93
B
N1)
Instruções de uso – BD Directigen EZ Flu A + B
20
Substâncias interferentes
Foram avaliadas várias substâncias com o teste Directigen EZ Flu A + B. Estas substâncias incluíram
sangue total (2%) e vários medicamentos. Não foi detectada interferência neste ensaio por qualquer
das substâncias utilizadas.
Medicamentos Avaliados
Três lavagens orais a 25% de venda livre
HCl de pseudoefedrina (20mg/mL)
Três gotas para orofaringe a 25% de venda livre
Éter gliceril guaiacol (20mg/mL)
Três aplicações de spray nasal a 10% de venda Ibuprofeno (10mg/mL)
livre)
4-Acetamidofenol (10mg/mL)
Oximetazolina (0,05mg/mL)
Ácido acetilsalicílico (20mg/mL)
Fenilefrina (1mg/mL)
Maleato de clorfeniramina (5mg/mL)
Loratadina (100ng/mL)
Dextrometorfano (10mg/mL)
HCl de difenidramina (5mg/mL)
Fexofenadina (500ng/mL)
Zanamivir (1mg/mL)
Amantadina (500ng/mL)
Rimantadina (500ng/mL)
Albuterol (0,083mg/mL)
Oseltamivir (500ng/mL)
Ribavirina (500ng/mL)
Synagis (0,1mg/mL)
DISPONIBILIDADE
Nº de Cat.
Descrição
256050
Directigen EZ Flu A + B, kit de 30 testes
220144
CultureSwab EZ 100 (um swab)
220145
CultureSwab EZ II 100 (2 swabs)
221819
Soro fisiológico normal, 5mL, caixa de 100
Instruções de uso – BD Directigen EZ Flu A + B
21
REFERÊNCIAS
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September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to
biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of
Article 16(1) of Directive 89/391/EECP). Office Journal L262, 17/10/2000, p.
0021-0045.
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INDICAÇÃO DOS TERMOS DE GARANTIA DA QUALIDADE
A Becton Dickinson garante que este produto terá o desempenho indicado neste relatório, desde que
tenha sido usado da forma recomendada nas instruções de uso. Caso o produto não tenha o
desempenho prometido, a empresa se responsabiliza pela substituição dos kits defeituosos por
outros novos.
Importado e distribuído por:
Becton Dickinson Indústrias Cirúrgicas Ltda.
Rua Pres. Juscelino Kubitschek, 273 – Juiz de Fora – MG - Brasil
CNPJ: 21551379/0001-06
Centro de Relacionamento com o Cliente: 0800 0555654
Responsável Técnico Marcelo A. Lopes – CRF MG-13673
Registro ANVISA nº
Fabricado por:
Becton, Dickinson and Company
7 Loventon Circle
Sparks, Maryland 21152 - USA
EDIÇÃO DAS INSTRUÇÕES DE USO
8010589
2005/06
_____________________
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Marcelo A. Lopes
Arnaldo Naves Lima
Responsável Técnico
Representante Legal
CRF MG-13673
Diretor de Relações Governamentais
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