Introdução a Biologia Molecular: DNA Nutrição Prof. João Ronaldo Tavares de Vasconcellos Neto ABR/2011 REPLICAÇÃO DO DNA Replicação • O DNA é um polímero de nucleotídeos unidos entre si por ligações fosfodiéster. As fitas complementares estão ligadas por ligações de hidrogênio. Nas células, cada cadeia está orientada em sentido contrário ao da outra (anti-paralelismo). Os nucleotídeos são compostos por açúcar (pentose), radicais fosfatos e bases nitrogenadas. Replicação • As bases nitrogenadas são: ► Adenina ► Guanina ► Citosina ► Timina Replicação • Os nucleotídeos de uma cadeia da molécula de DNA podem interagir com os da cadeia complementar através de ligações de hidrogênio entre suas bases nitrogenadas, sendo que a Adenina se liga por meio de duas ligações de hidrogênio à Timina, e a Citosina se liga através de três ligações com a Guanina Replicação • Primeiro passo: ►Enzima DNA-Helicase abre a molécula de DNA. Rompe as ligações ponte de hidrogênio. ►A enzima DNA-Topoisomerase matem a fita dupla linear. A molécula de DNA deixa de ser helicoidal com a ação desta enzima. Evita a formação de super-hélices. Replicação • Segundo passo: ►Proteínas SSB de ligam ao DNA unifilamentar evitando que de enrole novamente ou forme pontes ou gaps. ►A Enzima DNA-Polimerase III de acopla a fita de DNA unifilamentar para o inicio da replicação. Síntese continua; Síntese descontinua. Replicação • Terceiro passo: ►A Síntese continua ocorre normalmente com a adição de nucleotídeos complementares a fita de DNA unifilamentar pela ação da enzima DNA-polimerase III. ►A medida que a nova fita é sintetizada as proteínas SSB se desligam permitindo o enovelamento do DNA. Replicação • Quarto passo: ► Síntese descontinua forma fragmentos de Okazaki. ► A DNA polimerase III apenas sintetiza fitas de DNA na direção 5’ a 3’. Sendo assim a segunda fita de DNA unifilamentar precisa ser duplicada em fragmentos para respeitar essa necessidade. ► Um fragmento de RNA chamado primer se liga a fita de DNA unifilamentar permitindo que a enzima DNA-polimerase III possa fazer a sintese do fragmento. Replicação • Quinto passo: ►A fita descontinua possui diversos fragmentos de DNA não ligados. Este fragmentos são conectados pela enzima DNA-ligase. ►Os primers são substituídos por nucleotídeos de DNA pela mesma enzima DNA-polimerase I. ►No final do processo duas duplas fitas de DNA são formadas tendo como molde as fitas unifilamentares. Replicação Replicação Replicação