Introdução ao estudo da Morfologia

TÉCNICAS HISTOLÓGICAS
Metodos de Estudos em Biologia
Profa Ednilse Lem
• Microscópio Eletrônico Revela a Estrutura Fina
da Célula.
• Limite de Resolução do Microscópio
Eletrônico.
• Micrografia eletrônica de uma
camada delgada de ouro, mostrando
fileiras individuais de átomos no
cristal
(pontos
luminosos).
A
distância entre as fileiras adjacentes
de átomos de ouro é de cerca de 0,2
nm (2Å).
Características principais do microscópio
óptico, eletrônico de transmissão e do
microscópio eletrônico de varredura
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS
-Ocular
-Objetivas e revólver
-Platina
-Charriot
-Macrométrico
-Micrométrico
-Diafragma no condensador
-Condensador
-Botão do condensador
-Dois parafusos centralizadores do
condensador
-Fonte de luz
-Controle de iluminação
-Diafragma de campo (alavanca no
lado esquerdo do microscópico)
-Dois parafusos de ajuste de lâmpada
(esquerdo e direito)
Principais unidades de medida usadas
em histologia
Unidade
Representação e valor
Micrômetro
1 m = 0,001 milímetro
nanômetro
1 nm = 0,001 micrômetro
Etapas pelas quais passam os fragmentos de
orgãos removidos para estudos histológicos (peças
histológicas) até a inclusão em parafina.
ETAPAS
FINALIDADES
DURAÇÕES
1- Fixação em fixador simples ou em misturas Preservar a morfologia e a composição dos
fixadoras (líquido de Bouin, Helly etc)
tecidos
Cerca de 12 horas, dependendo do fixador e
do tamanho da peça
2-Desidratação em álcool etílico de
concentrações crescentes, começando com
álcool a 70% e terminando com álcool
absoluto.
6 a 24 horas, dependendo do tamanho da
peça
Remover a água dos tecidos
3 Clareamento ou diafanização em benzol,
Embeber a peça m substância miscível com 1 a 6 horas, dependendo do tamanho da
xilol ou toluol, solvente do álcool e da parafina a parafina
peça
4 Impregnação pela parafina fundida,
geralmente realizada em estufa a 60°C
A parafina penetra nos vasos, nos espaços
intercelulares e mesmo no interior das
células, impregnando o tecido e tonando
mais fácil a obtenção dos cortes no
micrótomo
Inclusão: a peça é colocada num molde
retangular contendo parafina fundida
Obtenção de bloco de parafina de forma
regular, para ser cortado no micrótomo.
Coloraçao
corantes ácidos: fucsina ácida, azul de
anilina e orange G; de toluidina.
30 minutos a 6 horas, dependendo do
tamanho da peça.
básicos: azul de metileno, verde metil e azul
INTERPRETAÇÃO DE CORTES APLICADOS
À ODONTOLOGIA
• Em cortes transversais de coroa e de
raiz quais são os constituintes dentais e
periodontais observados:
• a)
• b)
Por técnica de descalcificação
Por técnica de desgaste
Anatomia Dental
Introdução ao estudo da
Morfologia Humana
1. Generalidades
• Citologia: ciência que estuda a estrutura das
células.
• Biologia/Fisiologia Celular: estudo das funções
e do funcionamento celular.
• Histologia: ciência que estuda a organização
dos tecidos.
• Embriologia:
ciência
que
estuda
o
desenvolvimento pré-natal, desde a concepção
até a 8ª semana de vida I.U.
Níveis de organização do corpo humano
2. A célula
•
A célula é a unidade microscópica
que constitui os seres vivos, em geral
definida como a menor porção da
matéria viva dotada de auto-duplicação
independente.
•
Alguns seres são constituídos
apenas por uma célula, são seres
unicelulares. Outros são formados por
várias ou muitas células, são os seres
pluricelulares,
neste
caso
são
constituídos por tecidos.
2.1 Tamanho das células
•
Na sua grande maioria, as células são
microscópicas. No homem, seu tamanho
médio varia entre 10 e 50 m. Ex: o ovócito
possui de 100 a 200 m de diâmetro.
• As fibras musculares estriadas esqueléticas
e os neurônios podem ter vários centímetros
de comprimento. Porém, certas células
nervosas podem ter apenas 6 m de
diâmetro.
• As hemácias 7 m de diâmetro.
Ovócito
Fibra muscular
Neurônio
Hemácia
2.3 Graus de individualismo das
células
• A)
células livres – apresentam o maior
grau de autonomia, são isoladas e vivem em
ambientes líquidos. Ex: espermatozóides,
células sangüíneas,
protozoários, algas,
fungos unicelulares.
Espermatozóide
Hemácia
B) células federadas – se organizam sob a forma de
tecidos, tornaram-se especializadas e perderam parte de
sua autonomia em favor do conjunto, passando a viver na
dependência de outras; Trocam alimentos entre si através
do líquido intersticial. Ex: células epiteliais.
Tecido epitelial
• C) células anastomosadas – estão
fusionadas umas as outras por meio de
comunicações citoplasmáticas. Ex: células
ósseas.
D) Cincícios – consistem em uma massa
protoplasmática com muitos núcleos. Ex: placenta.
E)
Plasmódios – são provenientes de uma célula
mononucleada que sofre sucessivas divisões nucleares sem
as correspondentes divisões citoplasmáticas. Ex: fibra
estriada esquelética, fungos.
2.4 Tempo de vida das células
• A)
células lábeis: são células de
vida curta, geralmente não formam
tecidos, não se reproduzem e resultam
da diferenciação rápida das células
indiferenciadas embrionárias.
Ex: hemácias  120 dias;
gametas (♀ e ♂)  2 ou 3 dias.
• B)
células estáveis: são células que
se diferenciam do desenvolvimento
embrionário, e depois mantém um ritmo
constante de multiplicação, mesmo no
indivíduo adulto, elas substituem as que
morrem por lesão ou outra causa,
duram meses ou anos.
Ex: células conjuntivas e fibras
musculares lisas.
• C)
células permanentes: são
células altamente especializadas e que
resultam de uma diferenciação celular
muito precoce no embrião.
Perderam totalmente a capacidade de
reprodução.
Acompanham
o
crescimento do organismo alongandose bastante.
Persistem no indivíduo até a morte.
Ex: células musculares estriadas,
neurônios.
4. Tipos de células
•
Procariontes,
presentes
bactérias e cianobactérias.
•
Eucariontes, presentes em todos os
outros seres vivos, incluindo algas,
fungos, protozoários, plantas e animais.
em
As células procariontes têm uma
organização
bem
mais
simples,
possuindo um único compartimento
interno, delimitado pela
membrana
plasmática. O nucleóide (uma região
correspondente ao núcleo) não há uma
membrana que separe esse local do
líquido citoplasmático.
Apresentam uma organização mais
simples do que as eucariontes.
Salmonella typhi
Staphylococcus aureus
Célula Procariótica
As células eucariontes têm seu
espaço interno dividido em inúmeros
compartimentos membranosos (sendo
o núcleo geralmente o maior, delimitado
pela membrana nuclear).
• Eucarioto:
 DNA no núcleo, separado do citoplasma por
membrana;
 Múltiplos cromossomos;
 DNA associado à histonas;
 Diversas organelas revestidas por
membrana,
 Se dividem por mitose.
Célula Eucariótica
Seres Procariotos x Eucariotos
• Procariotos:
 DNA não está envolvido por membrana, e é
um cromossomo circular;
 DNA não está associado á histonas;
 Não possuem organelas revestidas por
membrana;
 As paredes celulares quase sempre contém
o polissacarídeo peptideoglicana;
 Normalmente se dividem por fissão binária.
Organelas
Retículo End.
Origem
Comp. Quím.
Da membrana celular
Funções
Lipoproteíca
•síntese de proteínas para exportação –
RER
•Síntese de lipídios – REL
•Condução de estímulos
•Regular pressão osmótica
•Transporte intracelular de substâncias –
REL
•Originar carioteca - REL
•Metabolizar substâncias tóxicas
Ribossomos
No nucléolo, pelo RNA-ribossômico.
Lisossomos
Do Complexo de Golgi
Complexo de Golgi ou dictiossomo ou
golgiossomo
Do REL
Plastos
De plastos primitivos
--Lipoproteíca, com muitas enzimas no
seu interior.
- síntese de proteínas para uso intracelular
•Digestão intracelular (fagocitose e
pinocitose)
•Exocitose – eliminação dos dejetos
celular
•Autofagia – renovação do material
celular
•Autólise – destruição celular, liberação
de enzimas no citoplasma.
•Regressão da cauda do girino
Lipoproteíca
•produção da parte glicídica de algumas
secreções
•armazenar, concentrar, empacotar e
eliminar secreções
•formação do acrosomo dos
espermatozóides
•síntese de lipídios
Semelhante a de uma célula.
•fotossíntese e outras coisas. Apresenta
DNA, RNA e faz síntese proteíca
Mitocôndrias
Centríolos
A partir da
mitocôndrias
duplicação
de
outras
Por autoduplicação de outros centríolos
Semelhante a de uma célula
•Respiração celular
•Presença de DNA e RNA, sintetizam
proteínas
•Concentração e transporte ativo de íons
•Síntese de ácidos graxos
Microtúbulos proteícos
•Ligada ao processo de divisão celular
•Formação de cílios e flagelos