UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MARINGÁ PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM GENÉTICA E MELHORAMENTO Fonte Arial 12, em maiúsculo, centralizado. NOME DO PÓS-GRADUANDO Fonte Arial 12, em maiúsculo, negrito, centralizado. Título da dissertação/tese Fonte Arial 14, somente a primeira letra em maiúsculo, centralizado, negrito, espaçamento simples. MARINGÁ PARANÁ – BRASIL MÊS - ANO Fonte Arial 12, em maiúsculo, centralizado, espaçamento simples. Digitar o mês (por extenso) e o ano da defesa. NOME DO PÓS-GRADUANDO Fonte Arial 12, em maiúsculo, negrito, centralizado. Título da dissertação/tese Fonte Arial 12, recuado 7,5 cm à direita. Fonte Arial 14, somente a primeira letra em maiúsculo, centralizado, negrito, espaçamento simples. Dissertação / Tese apresentada à Universidade Estadual de Maringá, como parte das exigências do Programa de PósGraduação em Genética e Melhoramento, para obtenção do Título de Mestre/Doutor. Orientador: Prof. Dr. Nome do Orientador. MARINGÁ PARANÁ - BRASIL MÊS - ANO Fonte Arial 12, em maiúsculo, centralizado, espaçamento simples. Digitar o mês (por extenso) e o ano da defesa FICHA CATALOGRÁFICA. É ELABORADA PELA BIBLIOTECA CENTRAL DA UEM E DEVERÁ SER IMPRESSA NO VERSO DA FOLHA DE ROSTO, OU SEJA, NO VERSO DA FOLHA ANTERIOR. Dados Internacionais de Catalogação-na-Publicação (CIP) (Biblioteca Central - UEM. Maringá, PR, Brasil) PÁGINA DESTINADA À FOLHA DE APROVAÇÃO. ENCONTRA-SE NA SECRETARIA DO PGM ii PÁGINA DESTINADA À DEDICATÓRIA. (Exemplo) Aos meus pais, ‘Nome do Pai’.. e ‘Nome da Mãe. Aos meus irmãos ‘Nome’, ‘Nome’ e ‘Nome’. Etc. Obs.: Este espaço é destinado à família, aos amigos, àqueles que afetivamente foram responsáveis pela conquista. Fonte Arial 12, centralizado na página, espaçamento 1 ½. iii AGRADECIMENTOS Fonte Arial 12, centralizado, negrito. A Deus, (Acréscimos de “justificativas/motivos” fica a critério do autor). À Universidade Estadual de Maringá e ao Programa de Pós-Graduação em Genética e Melhoramento (Acréscimos de “justificativas/motivos” a critério do autor). Ao CNPq/Capes/Araucária (órgão responsável por subsídios financeiros) (Acréscimo de “justificativas/motivos” a critério do autor). Ao professor doutor ‘Nome’, (Acréscimos de “justificativas/motivos” a critério do autor). Aos coorientadores, professora doutora ‘Nomes’, professora doutora ‘Nome’ e professor doutor ‘Nome’, (Acréscimos de “justificativas/motivos” a critério do autor). Aos Técnicos do Laboratório, ‘Nomes’ (Acréscimos de “justificativas/motivos” a critério do autor). Obs.: Na seqüência, o autor poderá agradecer a pessoas que contribuíram com o trabalho, porém evitando repetir pessoas citadas na dedicatória. Obs.: O texto abaixo vale como sugestão. Porém, os agradecimentos devem seguir a esta ordem, restringindo-os a pessoas (professores, técnicos, pesquisadores...) ou entidades (empresas, instituições...) ligadas diretamente ao desenvolvimento científico da Tese. iv BIOGRAFIA (modelo) NOME e SOBRENOME (todo em maiúsculo), filho de ‘Nome do Pai’ e de ‘Nome da Mãe’, nasceu em ‘dia’ de ‘mês’ de ‘ano’, na cidade de ‘Cidade’, estado do ‘Estado’. Em ‘mês’ de ‘ano’, concluiu o Ensino Fundamental na ‘Nome da Escola’, na cidade de ‘Cidade’, estado do ‘Estado’. Concluiu o Ensino Médio, em ‘mês’ de ‘ano’, na ‘Nome da Escola’, na cidade de ‘Cidade’, estado do ‘Estado’. Ingressou no Curso de ‘Curso’, em ‘mês’ de ‘ano’, na ‘Instituição’, na cidade de ‘Cidade’, estado do ‘Estado’, obtendo o título de ‘Título obtido’ em ‘mês’ de ‘ano’. (Caso tenha concluído Curso pós-graduação lato sensu, acrescentar neste parágrafo informações conforme informado para o curso de Graduação). (Em se tratando de Curso de Doutorado, acrescentar neste parágrafo informações relativas ao curso de Mestrado, conforme informado para o curso de Graduação). (A critério do autor, acrescentar informações relativas a atividades profissionais e/ou de pesquisa). Em ‘mês’ de ‘ano’, ingressou no curso de Mestrado/Doutorado do Programa de Pós-Graduação em Genética e Melhoramento (PGM), da Universidade Estadual de Maringá – UEM, em Maringá, estado do Paraná, Brasil. v SUMÁRIO 1. INTRODUÇÃO ....................................................................................................... 1 2. REVISÃO DE LITERATURA ................................................................................... 4 2.1. Milho doce.. ...................................................................................................... 4 2.1.1. Origem do milho doce ............................................................................... 4 2.1.2. Classificação botânica .............................................................................. 5 2.1.3. Características do milho doce ................................................................... 6 2.1.4. Textura do pericarpo ................................................................................. 8 2.1.5. Espessura do pericarpo ............................................................................ 8 2.2. Melhoramento genético do milho doce .......................................................... 11 2.3. Divergência genética ...................................................................................... 13 2.4. Híbridos e Heterose ....................................................................................... 14 2.5.1. Marcadores Microssatélites ou SSR ....................................................... 20 3. MATERIAIS E MÉTODOS..................................................................................... 22 3.1. Material vegetal .............................................................................................. 22 3.2. Extração do DNA. .......................................................................................... 22 3.3. Quantificação do DNA .................................................................................... 24 3.4. Amplificação do DNA ..................................................................................... 24 3.5. Análise dos dados obtidos....... ...................................................................... 25 3.5.1. Medidas de divergência genética ............................................................ 26 3.5.2. Métodos de agrupamento ....................................................................... 27 4. RESULTADOS E DISCUSSÃO... .......................................................................... 29 4.1. Seleção de primers ........................................................................................ 29 4.2. Heterozigosidade média e PIC....................................................................... 33 4.3. Medidas de divergência genética ................................................................... 33 5. CONCLUSÕES ..................................................................................................... 40 6. REFERÊNCIAS ..................................................................................................... 41 APÊNDICE A - Avaliação numérica células inflamatórias da medula óssea ............. 54 APÊNDICE B - Avaliação numérica células inflamatórias do sangue... .................... 56 ANEXO A - Representação gráfica de contagem de células - Modelo 1... ................ 58 ANEXO B - Representação gráfica de contagem de células - Modelo 2................... 59 vi LISTA DE QUADROS Quadro 1 - Análise limnológica ................................................................................. 19 Quadro 2 - Freqüência da coerência entre objetivos e resultados em valores absolutos de sedimentação .................................................................... 25 Quadro 3 - Freqüência da coerência entre objetivos e resultados em valores absolutos de sedimentação de rios canalizados .................................... 56 vii LISTA DE FIGURAS Quadro 1 - Seqüência do programa utilizado para amplificação do DNA de Zea mays L .................................................................................................... 33 Quadro 2 - Seqüências dos primers de microssatélites, nº de alelos detectados por cada primer e localização destes nos cromossomos, usados na estimação da diversidade genética nas 15 linhagens de milho doce ..... 33 Quadro 3 - Concentrações dos reagentes estoques e utilizados nas reações de amplificação ........................................................................................... 75 viii RESUMO Fonte Arial 12, centralizado, negrito. SOBRENOME, Nome, M.Sc. / D.Sc. Universidade Estadual de Maringá, mês de ano. Título da dissertação/tese. Professora orientadora: Nome. Professores conselheiros: Nome e Nome Neste espaço deve ser digitado o resumo, que não deve ultrapassar 400 palavras. Fonte Arial 12, justificado, em espaço 1 ½ Palavras-chave: No máximo 03 (três) palavras ou expressões. ix ABSTRACT Fonte Arial 12, centralizado, negrito. SOBRENOME, Nome, M.Sc. / D.Sc. Universidade Estadual de Maringá, month, year. Título da dissertação/tese Adviser: Nome. Committee Members: Nome and Nome. Neste espaço, deverá ser digitado o Abstract (o resumo em língua inglesa) Keywords: No máximo 03 (três) palavras ou expressões x