Núcleo Interfásico Organização da cromatina, arquitetura da membrana nuclear e nucléolo Célula Procariótica • Organização do DNA: • Circular e disperso no citossol; • Tradução imediata do RNAm recém transcrito. Célula Eucariótica • Presença de um núcleo verdadeiro: • Formam-se dois compartimentos distintos; • RNAm é processado (splicing) antes de ser enviado ao citossol. Paradoxo do Valor C • Valor C: quantidade de DNA em um lote haplóide. • Paradoxo: presença de DNA não codificante e processamento do RNAm. Organização do DNA • Cromatina: DNA + proteínas (histonas). • Eucromatina: menos condensada (regiões codificantes); • Heterocromatina: mais condensada (regiões não codificantes). Cromossomos • Constituído por TRÊS elementos principais: • Centrômero (constrição primária): composto por sequências repetitivas e de heterocromatina e sua posição é variável; • Cinetócoro: consiste em três camadas protéicas sobre o centrômero, onde os fusos se ligam durante a divisão celular; • Telômero: proteção das extremidades. A replicação do DNA resulta em seu encurtamento (senescência celular x telomerase) Organização da Cromatina • QUATRO níveis de compactação: • 1º nível: Nucleossomo (11 nm) – octâmero de histonas (H2A, H2B, H3 e H4) e DNA enrolado ao seu redor (≈146 pb). Organização da Cromatina • QUATRO níveis de compactação: • 2º nível: Solenóide ou Zigue-zague (30 nm) – Histona H1 possui autoafinidade, resultando em associação dos nucleossomos. Organização da Cromatina • QUATRO níveis de compactação: • O que acontece quando removemos a histona H1? Organização da Cromatina • QUATRO níveis de compactação: • 3º nível: Alças (300 nm) – Solenóides se associam a um arcabouço protéico (cromossomos de células interfásicas). Organização da Cromatina • QUATRO níveis de compactação: • 4º nível: Cromossomos mitóticos (700 nm) – arcabouço protéico se organiza em solenóide (cromossomos de células em divisão). Níveis de Compactação Animação Envoltório Nuclear • Formado por membrana dupla (domínio do retículo endoplasmático granular). • Membrana externa – recoberta por ribossomos; Membrana Nuclear • Formado por membrana dupla (domínio do retículo endoplasmático granular). • Membrana externa – recoberta por ribossomos; • Membrana interna – recoberta pela lâmina nuclear. • Lâmina nuclear – formada por laminas (filamentos intermediários), conferem sustentação e dão forma ao núcleo. Membrana Nuclear • Formado por membrana dupla (domínio do retículo endoplasmático granular). • Membrana externa – recoberta por ribossomos; • Membrana interna – recoberta pela lâmina nuclear. • Lâmina nuclear – formada por laminas (filamentos intermediários), conferem sustentação e dão forma ao núcleo. Complexo Poro-nuclear • Comunicação entre o núcleo e o citossol • Complexo protéico com rígido controle do tráfego de moléculas. Nucléolo • Estrutura não membranosa: RNAr + DNA ribossomal + proteínas; • Formado por três componentes principais: • Centro fibrilar – DNAr; • Componente fibrilar – transcritos de RNAr; • Componente granular – sub-unidades de ribossomos. RONs • O nucléolo estrutura-se ao redor das RONs; • RON – Região Organizadora do Nucléolo: loci gênico que possui múltiplos genes para RNAr em sequência (em tandem); • Em humanos: cromossomos 13, 14, 15, 21 e 22 (acrocêntricos) RONs • O nucléolo estrutura-se ao redor das RONs; • RON – Região Organizadora do Nucléolo: loci gênico que possui múltiplos genes para RNAr em sequência (em tandem); • Em humanos: cromossomos 13, 14, 15, 21 e 22 (acrocêntricos) • Ao longo do ciclo celular, o número de nucléolos varia. Por quê? RONs - Organização RNAr • A transcrição dos DNAr é feita pela RNA polimerase I; • O splicing do RNAr precursor (45S) origina os segmentos de 18S, 5.8S e 28S; Ribossomos • Compostos por duas sub-unidades (amadurecem no citossol): • Maior (60S): RNAr 28S + 5.8S + 5S (fora da RON) + 40 proteínas; • Menor (40S): RNAr 18S + 30 proteínas.