Rede de Tipificação Molecular para Vigilância de Doenças de Transmissão Alimentar PULSENET América Latina 3ª Reunião Internacional 17-18/06/2005 Dalia dos Prazeres Rodrigues, Ph.D Laboratório de Enterobacterias Laboratório de Referência Nacional de Cólera e Enteroinfecções Bacterianas Instituto Oswaldo Cruz/FIOCRUZ [email protected] ou [email protected] Protocolo da Rede PulseNet Teste piloto – problemas: Longo intervalo de tempo para recepção das cepas para controle; Inicio do uso de NanoDrop (D.O. suspensão)09/2004 Defeito em equipo para controle D.O. da suspensão bacteriana (NanoDrop), com tempo para substituição superior a 3 meses; Considerações relatadas INEI-ANLIS (resultados recebidos em 06/06/2005) apontaram excesso de DNA, resultante da realização da técnica sem a infra-estrutura (equipamento) empregada na rotina do Laboratório; Sistema Nacional de Laboratórios de Saúde Pública SNLSP REDES DE VIGILÂNCIA EPIDEMIOLÓGICA DE VIGILÂNCIA AMBIENTAL EM SAÚDE NACIONAIS DE VIGILÂNCIA SANITÁRIA DE ASSISTÊNCIA Centros Colaboradores Laboratórios de Referência Nacional Laboratórios de Referência Regional Laboratórios de Referência Estadual Laboratórios de Referência Municipal Laboratórios Locais Locais Laboratórios de Fronteiras CGLAB/SVS/MS Ações quanto ao Programa PULSENET Encaminhamento das informações: relatório de viagem e reunião realizada em 2004 CGLAB/SVS/MS; Utilização em paralelo da metodologia preconizada em 2004; Disseminação junto aos Laboratórios da necessidade de encaminhamento de cepas isoladas de surtos; Recebimento e subseqüente processamento das cepas, para diagnóstico conclusivo e rastreamento; Resultados das avaliações seguem hierarquia do pais: Encaminhamento dos resultados aos remetentes; Notificação a CGLAB/SVS/MS do diagnóstico de patógenos emergentes ou exóticos. CEPAS PROCESSADAS: PRINCIPAIS CRITÉRIOS DE SELEÇÃO PARA EXECUÇÃO DE DIFERENTES MÉTODOS DE RASTREAMENTO Cepas isoladas de surtos de transmissão alimentar; Cepas multirresistentes a drogas de última geração isoladas de alimentos e animais (atividades de monitoramento) Cepas multirresistentes, envolvidas em surtos hospitalares; Sorovares que emergem como epidêmicos em outros países. Métodos Clássicos de rastreamento: Caracterização antigênica conclusiva; Avaliação da suscetibilidade aos antimicrobianos; Fagotipagem: S. Typhi, S.Typhimurium, S.Enteritidis, S.Infantis, S.Hadar; Métodos de rastreamento molecular: PFGE - RFLP - Ribotipia - ERIC Uso de PFGE na definição de Surtos – Atividades de Rotina do LABENT-Lab.Ref. Nacional Colera e Enteroinfecções Bacterianas Equipamentos e tipo de insumos (2004/2005) Aparelhos: Nano Drop CHEF DR III Sistema de fotodocumentação: Gel Doc Software: Bio Numerics 4.0 (Applied Maths) Enzimas: SpeI, XbaI, XmaI, SfiI, NotI Atividades desenvolvidas PFGE de Serratia marcescens (resistentes aos carbapenemas)- hospitalar alimentar, ambiental e humana PFGE de S. Infantis (XbaI) – humana, alimentar Diferenciação de S.Enteritidis PT4 e fagotipos correlatos isoladas de alimentos de origem animal e humano empregando SpeI Diferenciação de V.parahaemolyticus PFGE – surtos origem alimentar Atividades executadas e sua relevância para ampliar a Vigilância pela Rede Nacional de Laboratórios de Saúde Pública - 2004 Curso: Atualização em Métodos de Análise dos Patógenos Bacterianos Veiculados por Água e Alimentos para os Serviços de Bromatologia e Vigilância Sanitária LRN/IOC e INCQS Curso: Diagnóstico Laboratorial de Enterobactérias Patogênicas com ênfase em Emergentes e Reemergentes – CentroOeste – LABENT/LRN/IOC - Atividades propostas e sua relevância para ampliar a Vigilância pela Rede Nacional de Laboratórios de Saúde Pública Encaminhamento pelos Laboratórios de relatórios mensais para o LRN, com informações consolidadas pelo LABENT/LRN e encaminhadas trimestralmente a CGLAB/SVS/MS- Janeiro/2005 Curso: Patógenos Emergentes e Reemergentes Veiculados pela Água e Alimentos e Detectados em Espécimes Clínicos – Regiões Norte/Nordeste27/06 a 01/07/2005