Determinação da Especificidade do Ácido Hialurônico Urinário Como Marcador Diagnóstico do Carcinoma Urotelial da Bexiga Pesquisador PRODOC Luiz Eduardo Café Pesquisador Líder Manoel Barral Netto Escola Bahiana de Medicina e Saúde Pública / FIOCRUZ Grupo de Uro-oncologia do Hospital Santa Izabel Ciências da Saúde - Medicina Objetivos do Projeto Determinar a especificidade da dosagem do ácido hialurônico urinário como um método diagnóstico em pacientes com risco aumentado para o carcinoma urotelial de bexiga. Criação de um Banco de Amostras (urina, soro e tecido) de pacientes com câncer urológico (Próstata, Bexiga, Rim, Pênis, via excretora). Introdução Carcinoma Urotelial de Bexiga 2o Tumor urológico + frequente 261000 casos novos/ano 115000 óbitos/ano 70 a 80% tumores superficiais História natural 60 a 80% recorrências Progressão Ta - 5 a 25% T1 - 13 a 75% Parkin e col., 1999; Whitmore, 1984; Herr, 1993 Diagnóstico Ultra-sonografia Cistoscopia Citologia Urinária Marcadores Tumorais BTA NMP22 Telomerase Marcadores Teste Sensibilidade Detecta Citologia 18 a 54% Células malignas BTA test 29 a 40% Componentes da membrana basal BTA stat 50 a 82% Proteína relacionada ao fator de complemento H NMP22 66% Proteínas da matriz nuclear Telomerase 70% Atividade da telomerase 60- 80% AH Á. Hialurônico (HA-HAase) Brown FM, 2000 Malkowicz SB, 2000 Método Estudo prospectivo de pacientes internados para cirurgia urológica Coleta no centro-cirúrgico imediatamente antes da cirurgia Período: Fevereiro de 2003 a Dezembro de 2005 Armazenamento: Urina: freezer a -20oC Sangue: Freezer a -20oC após centrifugação Tecido: Nitrogênio líquido Método - Procedimentos Mensuração do AH Método fluorimétrico Sensibilidade: 0.24 a 500 ng/mL Variação intra-método: 2 a 3% Variação inter-método: 5% Martins e Passerotti, 2001 Resultados Número de Amostras = 228 Câncer de Bexiga = 59 Controles = 169 Câncer de Próstata - 73 Câncer de Rim - 19 Câncer de Pênis - 04 Hiperplasia Prostática Benigna - 69 Outras neoplasias - 04 Resultados 1400 1400 51 1200 1000 52 49 800 50 600 400 200 0 N= Ácido Hialurônico (ng / mL) Ácido Hialurônico (ng / mL) 51 1200 1000 800 600 400 200 23 17 controle 0 N= câncer 23 controle e BPM BG e AG Resultados 100 100 1200 1200 ÁcidoHialurônico Hialurônico(ng (ng/ /mL) mL) Ácido ÁcidoHialurônico Hialurônico(ng (ng/ /mL) mL) Ácido 1400 1400 1000 1000 800 800 600 600 400 400 200 200 00 00 90 90 80 80 70 70 60 60 50 50 40 40 30 30 20 20 10 10 1 controle controle 00 1 00 22 câncer câncer 11 controle controle 33 22 câncer câncer 33 Ácido Hialurônico / Creatinina (ng/g) 250 200 150 100 50 0 Ácido Hialu rônico / C reatinina ( ng/g) (ng/g) / Creatinina Hialurônico Ácido Resultados 0 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 01 controle 1 2 controle câncer 32 câncer 3 50 250 Ácido Hialurônico / Creatinina (ng/g) Ácido Hialurônico / Creatinina (ng/g) Resultados 200 150 100 50 0 0 1 controle 40 30 20 10 0 0 2 BPM 3 1 BG controle 4 2AG BPM 35 BG 4 AG 5 Resultados Sensibilidade Especificidade Valor Preditivo Positivo Valor Preditivo Negativo Acurácia Ácido Hialurônico (50 ng/mL) Controle X Câncer 59,3% 95,8% 94,1% 67,6% 76,5% Controle + BPM X BG+AG 84,2% 96,9% 94,1% 91,2% 92,2% Ácido Hialurônico / Creatinina (5 ng/g) Controle X Câncer 66,7% 95,8% 94,7% 71,9% 80,4% Controle + BPM X BG+AG 89,5% 96,9% 94,4% 93,9% 94,1% 95,3% 96,2% Ácido Hialurônico / Creatinina (30 ng/g) Alto Grau X Controle+BPM+BG 81,8% 100,0% 100,0% Divulgação Conferência: Marcadores Moleculares Em Câncer De Bexiga: Perspectivas Atuais. Módulo: Uro-oncologia. Congresso Ítalo-brasileiro De Urologia, Salvador, 2003 Criação De Um Modelo De Banco De Dados E Amostras Biológicas De Tumores Urológicos: 28o Congresso Brasileiro De Urologia, Fortaleza, 2003 Marcadores Urinários No Diagnóstico Do Câncer De Bexiga L.E. Café Urologia Contemporânea – 11 (2) 315-320, 2005 Urinary Hyaluronic Acid: A Marker To Evaluate Aggressiveness For The Urothelial Cancer? Café, Le ; Arruda, H; Nader, Hb; Srougi, M Bju International Encaminhado Para Publicação IMPACTO Possibilidade de criação de patente e parceria com a iniciativa privada afim de desenvolver “kit” diagnóstico para comercialização a laboratórios clínicos. Criação de expressivo banco de dados e amostras biológicas (persiste coleta e armazenamento) Parceria com Escola Bahiana de Medicina e Saúde Pública para desenvolver linha de pesquisa de pós-graduação em medicina (em desenvolvimento) Parceria com laboratórios de Patologia e de Biologia Molecular da FIOCRUZ para desenvolver linha de pesquisa em uro-oncologia utilizando o material armazenado Criação e cadastro no CNPq de grupo de pesquisa em uro-oncologia (CPUro) (10 alunos da graduação do curso de medicina da EBMSP) COMENTÁRIOS FINAIS PRODOC- FAPESB OPORTUNIDADE DE REALIZAR PESQUISA OPORTUNIDADE DE DESENVOLVER LINHA DE PESQUISA OPORTUNIDADE DE CONTINUAR FAZENDO PESQUISA