Carcinogenesis vol.31 no.5 pp.918–926, 2010 Advance Access

Carcinogenesis vol.31 no.5 pp.918–926, 2010
Advance Access publication February 1, 2010
Epigenetic repression of E-cadherin by
human papillomavirus 16 E7 protein
Joanna Laurson, Sadaf Khan, Rachel Chung, Karen Cross
and Kenneth Raj
Introdução
O que é o vírus do papiloma humano ?
 Infecta célula epitelial – queratinócito – de mucosas e pele;
 Contem DNA de dupla hélice circular com 8 mil pares de
base, sem envelope lipídico;
 Existem mais de 80 tipos de HPV classificados em alto risco
(HPV 16, 18, 45 e 56), risco intermediário (HPV 31, 33, 35, 39,
51 e 52) e baixo risco (HPV 6, 11, 41, 42, 43 e 44);
 Os vírus de alto risco 16 e 18 sintetizam proteínas
oncogênias E6 e E7 que interagem com proteínas supressoras
de tumor, favorecenco a transformação maligna da célula.
Introdução
 O genoma do HPV, por razões ainda não esclarecidas, pode integrar-se ao
genoma humano sendo essa etapa fundamental para a transformação
neoplásica.
 O gene E6 codifica para a proteína E6 que desempenha papel importante
na tranformação celular neoplásica, em especial pelo fato dessa proteína
interagir de maneira a acelerar os mecanismos de degradação fisiológica
da proteína supressora do crescimento tumoral p53, fenômeno esse, que
interfere profundamente nos mecanismos de apoptose e reparo do DNA.
 Outras funções de E6 incluem a
ativação da enzima telomerase
favorecendo mecanismos de
imortalização celular e a transativação
da sequência promotora do oncogene cmyc.
Introdução
 O gene E7 codifica para a proteína E7 também envolvida na
transformação celular neoplásica por aumentar a degradação da proteína
supressora tumoral Retinoblastoma.
 A proteína E7 é capaz de reduzir os níveis de E-caderinas.
E7
Fosforila e se liga Rb
Rb – E2F
Rb é degradada
Célula perde o controle do ciclo celular
E2F desliga de Rb
DNA (Transcrição de
Genes)
Introdução
 As células de Langerhans são células dendríticas do sistema imune
apresentadoras de antígenos muito encontradas em tecidos de
revestimento (mucosas e pele);
 A interação destas células com os queratinócitos é mediada pela Ecaderina que constitui uma molécula de adesão célular;
 A migração destas células é influenciada por citocinas como TNF-a e
interleucina -10 produzidas pelos queratinócitos;
 A expressão de E-caderinas nas células de Langerhans é estimulada por
TGF-b e permite a fixação dessas células no epitélio
 Proteína E7 viral diminui os níveis de E-caderina pelo aumento de Dnmt 1
( DNA Metiltransferase I)
Materiais
Cultura de células de queratinócitos humanos:
 NIKS : queratinócitos + HPV 16 vírus ( plasmídio com DNA viral para
infectar as células)
 NIKS: queratinócitos + HPV 16 E7null vírus (com mutação no gene E7)
Persistence of HPV16wt episomes and HPV16E7-null episomes in
NIKS cells
Southern blot analyses of DNA
extracted form various passages of
NIKS cells infected with wild-type
HPV DNA
NIKS cells infected with
E7null HPV16
Differences in E-cadherin protein levels in NIKS, NIKS HPV16wt and
NIKS HPV16E7null cells
HPV16 E7 alone is responsible for the reduction of E-cadherin
protein level in cells
HPV16 E7 protein does not target E-cadherin protein for
degradation
Proteína p53 é dedragada
fisiologicamente nas células na
ausência de injúria ao DNA
HPV16 E7 suppresses transcription of E-cadherin gene
Reduction of E-cadherin protein level by HPV16 E7 is independent
of
pRb degradation or AP-2a downregulation
HPV16 E7 augments the level of Dnmt1 in cells
Inhibition of Dnmt activity allows recovery of E-cadherin levels
Inhibition of Dnmt activity allows recovery of E-cadherin levels
Discussão
 Observações de inúmeras análises independentes mostram que células
contendo HPV tem seus níveis de E-caderina reduzidos;
 Proteína E7 tem papel na redução de E-caderina independente de outras
proteínas;
 E7 não leva E-caderinas para a via de degradação proteassomal;
 Redução de E-caderina é mediada pelo aumento de Dnmt 1 que metila a
região promotora de alguma proteína desconhecida que interage para a
síntese de E-caderina.
A região específica modificada epigeneticamente pode ser uma maneira
pela qual o HPV modula a expressão de alguns genes celulares que lhe
conferem facilidade para proliferar, sem que haja morte( sem p53 e Rb)
bem como “fugir” do sistema imune das células infectadas.
Prevenção: já existe vacina contra os tipos mais
agressivos do vírus ( 18 e 16) em clínicas privadas !