BIOLOGIA DO DESENVOLVIMENTO EM PLANTAS ______________________________________________ ANO LECTIVO 2012/13 6ªAULA PRÁTICA Dep. Biologia Vegetal, FCUL Tarefa 1 - Análise das principais características de diferenciação no decurso do ciclo de vida de Brassica rapa de ciclo rápido (continuação). Nesta aula deverá continuar a cuidar e seguir o crescimento das plantas que semeou. Tarefa 4 - Porque as plantas morrem um dia, mas a espécie continua: a diferenciação de gâmetas e a reprodução sexuada. A alternância de gerações durante a evolução só foi possível após o aparecimento da reprodução sexuada. Neste tipo de reprodução os organismos dependem da formação de células especializadas (gâmetas) que se fundem para dar origem ao zigoto (singamia). Durante esta alternância de gerações as espécies “rejuvenescem” o seu património genético e o seu potencial adaptativo através de dois processos estocásticos: o “crossing-over” meiótico e a redundância de gâmetas. Nesta tarefa tentará caracterizar os principais passos de diferenciação celular dos gâmetas e a sua interacção. Formação e diferenciação de gâmetas 1. A parte masculina 1.1. Diferenciação do grão de pólen A diferenciação do grão de pólen é um dos processos de diferenciação celular mais complexos que se conhece. Nesta experiência tentará caracterizar os principais estádios da dinâmica nuclear durante a formação do grão de pólen. Parte Experimental Materiais - Inflorescências imaturas espécies disponíveis. - Orceína acética. Procedimento - Destaque um botão imaturo duma inflorescência. Desmonte as peças florais até isolar um saco polínico. - Esmague um saco polínico entre lâmina e lamela contendo uma gota de orceína acética. 1.2. Germinação do grão de pólen in vitro. Os grãos de pólen da maioria das espécies podem ser germinados em soluções muito simples contendo uma fonte de carbono (normalmente sacarose) e alguns traços de boro e cálcio. Neste trabalho vai caracterizar as reacções iniciais da germinação de pólen de algumas espécies. Parte Experimental Materiais - Grãos de pólen de Lilium longiflorum e Nicotiana tabacum. - Meio de germinação. Procedimento - Inocule o pólen em meio de germinação líquido. Agite suavemente o meio de 2 em 2 minutos. - Monte em lâmina e lamela, observe e descreva no início da germinação, 5 min., 10 min., 30 min., 1 hora, 1h30 min e 2 horas. Utilize a ocular micrométrica para caracterizar quantitativamente os diferentes passos da germinação. - Observe os grãos de pólen e tubos polínicos de diversas dimensões. Caracterize a dinâmica nuclear no decurso da germinação. 2. A parte feminina: o óvulo e o saco embrionário A geração gametofítica feminina é bastante mais complexa e dependente do esporófito que a masculina. A unidade estrutural básica é o óvulo, mas o verdadeiro gametófito encontra-se no seu interior: o saco embrionário. Nesta experiência tentará isolar óvulos a partir das espécies que lhe forem distribuídas e observar a estruturação interna dos sacos embrionários. Parte Experimental Materiais - Ovários não fertilizados (ou em início de fertilização) das espécies disponíveis - Orceína acética Procedimento - Disseque cuidadosamente um ovário até conseguir isolar alguns óvulos. - Monte e observe. Se a preparação a isso se prestar, core com orceína acética. A partir da observação inicial, faça cortes ou esmague o óvulo e tente observar o saco embrionário.