Análise da expressão circadiana da proteína PERIOD no relógio

54º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 54º Congresso Brasileiro de Genética • 16 a 19 de setembro de 2008
Bahia Othon Palace Hotel • Salvador • BA • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2
Análise da expressão circadiana da proteína
PERIOD no relógio biológico de insetos vetores
Campos, CA1; Gentile, C2; Peixoto, AA1; Bauzer, LGSR1
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Laboratório de Biologia Molecular de Insetos, Instituto Oswaldo Cruz, Fiocruz
School of Biological and Chemical Sciences, Queen Mary University of London
[email protected]
2
Palavras-chave: Insetos vetores, Relógio circadiano, Period, Aedes aegypti, Drosophila melanogaste
A compreensão de aspectos comportamentais de insetos vetores é essencial para o controle de doenças transmitidas
por eles. A partir do modelo Drosophila melanogaster, genes que controlam o comportamento foram caracterizados,
principalmente aqueles envolvidos no funcionamento do relógio circadiano. O modelo atual de controle molecular de
ritmos circadianos é baseado em mecanismos de auto-regulação negativa envolvendo diversos genes sendo os principais
period, timeless, Clock e cycle. Estes genes formam a primeira alça de regulação do relógio onde os fatores de transcrição
CLOCK e CYCLE ativam a expressão de period e timeless. Em seguida, os produtos destes genes, PERIOD e TIMELESS,
formam heterodímeros que migram para o núcleo reprimindo a ação de CLOCK e CYCLE, desativando assim sua
própria expressão. Este mecanismo de auto-regulação negativa é responsável pela regulação cíclica dos genes period
e timeless. Através de experimentos de Western Blot, ritmos de expressão da proteína PERIOD do relógio de Aedes
aegypti, vetor da dengue e febre amarela, foram comparados com dados existentes no modelo Drosophila. A utilização
do anticorpo anti-PERIOD em Aedes aegypti revelou bandas com peso molecular acima de 200 kD, um valor maior
do que o peso de 160 kD previsto a partir da anotação de seqüências de cDNA do gene period desta mesma espécie
sugerindo que, assim como observado em Drosophila, alterações pós-traducionais da proteína PERIOD de Aedes
aegypti, possivelmente fosforilação, aumentam seu tamanho molecular. Quantificação das bandas observadas indica
que, diferentemente do descrito em Drosophila melanogaster, a expressão da proteína PERIOD não sofre uma alteração
substancial na comparação entre as amostras coletadas na fotofase e aquelas coletadas na escotofase.
Apoio financeiro: HHMI, CNPq, Faperj e Fiocruz.
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