IX Semana de Biologia da UFPB Aplicações Mini-curso Laboratório de Genética de Microrganismos - DBM Microbiologia de Bactérias Gram-positivas: Uma Abordagem Etnofarmacológica Biotecnologia ► Ganhou evidência há relativamente pouco tempo, por outro lado, os processos biotecnológicos vêm sendo utilizados desde a mais remota antiguidade 6000 anos AC: Preparação de cerveja por babilônios e sumérios. 4000 anos AC: Fabricação de pão pelos egípcios. Século XIV: Preparação de bebidas destiladas. Século XVIII: Jenner consegue a primeira vacina. Século XIX: Pasteur consegue identificar a levedura como o agente responsável pela fermentação alcoólica. Nasce a Microbiologia. Século XX: Berg (1972), Cohen e Boyer (1973) conseguem obter DNA recombinante. Nascem a Engenharia Genética e a Biotecnologia moderna. Microbiologia de Bactérias Gram-positivas: Uma Abordagem Etnofarmacológica Utilização em Técnicas Moleculares ► Clonagem Æ Projetos genoma ► Indústria Æ produção de hormônios, enzimas, proteínas, vacinas, antibióticos, inibidores, ativadores, processos fermentativos, Biopolímeros (gomas – xantana e dextrana) Bebidas alcoólicas, alimentos... (Farmacêutica, Alimentos, Biotecnologia) ► Agricultura Æ Cultura de Tecidos, Fixação de Nitrogênio, Controle Biológico de Pragas... Microbiologia de Bactérias Gram-positivas: Uma Abordagem Etnofarmacológica Aplicações Comerciais da Biotecnologia Área Aplicação Potencial Saúde - remédios e vacinas mais eficazes com maior grau de pureza e a um custo menor - diagnóstico , prevenção e tratamento de doenças genéticas Alimentos - novos produtos processos alimentícios mais eficientes - melhor rendimento e qualidade na produção agropecuária Energia - maior eficiência na conversão de biomassa em combustíveis - menor consumo energético em processos industriais - aumento na recuperação de petróleo Materiais - menor custo na produção de produtos químicos com matérias primas de biomassa - extração econômica de minerais de baixo teor Meio Ambiente - alternativas biológicas à herbicidas e pesticidas - tratamento de detritos tóxicos Microbiologia de Bactérias Gram-positivas: Uma Abordagem Etnofarmacológica 1 Por que nós precisamos de novas drogas? Fármacos Baseados em Produtos Naturais ► Controle inadequado das infecções; ► Vacinas indisponíveis até o momento; ► Atuais drogas são insatisfatórias; ► Resistência a drogas; ► Efeitos; ► Baixa eficácia; ► Alto custo. Mortes por doenças infecciosas em 2003 (WHO). Microbiologia de Bactérias Gram-positivas: Uma Abordagem Etnofarmacológica Produtos Naturais Metabólitos Secundários Microbiologia de Bactérias Gram-positivas: Uma Abordagem Etnofarmacológica E a indústria farmacêutica... Metabólitos Primários ► Motivação pela descoberta de quimioterápicos eficazes como: vimblastina (Velban®) [diabetes], vincristina (Oncovin®)…e o taxol (Taxol®) [câncer]. ► Interesse por substâncias de origem vegetal com estruturas complexas difíceis de serem obtidas por processo de síntese. Isolamento de princípios ativos ► Semi-síntese comercial do taxol, tem sua materia-prima a bacatina III (Taxus baccata ). Plantas Æ laboratório de síntese orgânica Æ Milhões de anos de evolução e adaptação sobre a terra Microbiologia de Bactérias Gram-positivas: Uma Abordagem Etnofarmacológica Com objetivos muito bem definidos, a indústria farmacêutica não despreza o potencial que as plantas possuem em fornecer substâncias novas. ► 1980 Æ Busca racional de drogas ► Utiliza ensaios específicos para enzimas, receptores, DNA, mecanismo de ação de novas substâncias químicas bioativas. Microbiologia de Bactérias Gram-positivas: Uma Abordagem Etnofarmacológica Seleção de Alvo, Validação e Ligação Um enfoque genômico Genômica Transcriptoma Genômica e Metabolômica comparativa Microbiologia de Bactérias Gram-positivas: Uma Abordagem Etnofarmacológica Metabolômica Bioquímica e Biol. Mol comparativa Alvos potenciais ► Contribui para o conhecimento de “novas entidades químicas”, que podem ser usadas como matrizes para a descobertas de novos fármacos. ► O estudo de modificações, ex., a partir de exclusão de algumas subunidades fragmentais Æ partes essenciais e desnecessárias. Proteôma Validação dos alvos Proteínas Alvos de drogas Composto químico, proteína ou anticorpo. Microbiologia de Bactérias Gram-positivas: Uma Abordagem Etnofarmacológica 2 Modificação da atividade Avaliação dos candidatos a Nova Entid. Química Planejamento racional Exemplo: ► Morfina Æ Morfinano Æ Análogo hidroxilado (R=OH), o levorfanol é 3-4x mais potente do que a morfina, embora retenha propriedade de vício. ► A pentazocina, [R=CH2CH=C(CH3)2] é um análogo com menor propriedade de vício. Dados da análise estrutural, bioquímica e biologia molecular Morfina Morfinano Modelagem de fármacos Pentazocina Modelos tridimensionais a partir de softwares Determina propriedades estéricas e eletrônicas com relação a interação com o seu receptor Ajustes (correções) para otimizar suas propriedades Etorfina Tratamento de inúmeras doenças. Ex. inibidores de proteases de vírus ► Complexidade/Potência: etorfina, possui uma ponte de 2 átomos de carbono e um substituinte Æ 1000x mais potente que a morfina Æ Medicina veterinária. “chavechave-fechadura” fechadura” Microbiologia de Bactérias Gram-positivas: Uma Abordagem Etnofarmacológica Microbiologia de Bactérias Gram-positivas: Uma Abordagem Etnofarmacológica 3