Aspectos bioquímicos da infecção viral pelo vírus HBV

Aspectos bioquímicos da
infecção viral pelo vírus
HBV
Edna Almeida
2º ano Bioquímica
Introdução ao vírus
Foi em 1964 que Blumberg conseguiu
identificar o antigénio de superfície deste
vírus, e denominou-o antigénio Austrália actualmente denominado AgHBs
(Dane DS, Cameron CH, Briggs M, 1970).
Em 1970, Dane identificou partículas do
vírus no soro de um paciente.
Confirmou-se a natureza viral destas partículas, detectou-se um DNA
endógeno dependente da DNA polimerase e que esta se encontrava
dentro dele. Estas descobertas permitiram a caracterização do
genoma do vírus da hepatite B.
(Robinson et al., 1974).
Infecção pelo vírus
O primeiro surto de VHB foi em 1883 em que a infecção era causada
pelo uso de agulhas mal esterilizadas numa clínica.
Mais tarde (1942), o maior surto de VHB foi detectado em militares
que tinham sido imunizados contra a febre-amarela, uma vacina que
continha soro humano.
A Hepatite B é responsável mundialmente por 2 milhões de
mortos/ano, sendo a maior incidência nos países subdesenvolvidos.
Descrição geral do vírus
O genoma deste vírus é o único por ter uma natureza compacta, por ter
grelhas de leitura sobrepostas e por ser dependente da transcriptase
reversa.
Família dos hepadnavírus
(família de vírus de DNA
hepatotróficos)
O seu genoma é constituído
por 3200 nucleótidos e está
parcialmente em cadeia dupla,
uma longa e uma curta
Descrição geral do vírus
A partícula infecciosa:
A partícula infecciosa do vírus da hepatite B
(partícula de Dane) possui uma estrutura interna
ou core (AgHBc), um invólucro externo AgHBe e
antigénios de superficie (AgHBs).
O core é composto por
DNA (que se duplica
dentro dos núcleos
infectados) e DNA
polimerase.
A camada mais externa é
composta por um
revestimento que é
adicionado ao vírus no
citoplasma e antigénios de
superfície.
Antigénios de Superfície
Constituído por glicoproteínas e lípidos e
compreende três componentes moleculares básicos:
Pré-S1, Pré-S2 e pequeno S.
[adaptado de  2002 James A.
Perkins]
Outras partículas vírais encontradas no soro
Há também partículas subvirais mais pequenas (filamentosas e esféricas)
encontradas no soro de um individuo infectado, e são constituídas apenas por
antigénios se superfície, já enunciados anteriormente (AgHBs, AgHBe)
[Murray et. al, Medical
Microbiology, 2005, 66]
Ciclo de vida
O RNAm por um lado é traduzido em proteínas (p. ex. HBsAg) e por outro lado é
empacotado numa nucleocápside. No citoplasma, o RNA da nucleocápside vai servir de
molde para a síntese da cadeia menos (-) e da cadeia mais (+) do DNA.
[http://www.labmed.pt]
Replicação do vírus da hepatite B
1) Modificação do genoma em forma de RC-DNA para a
forma circular e entrada no nucleo.
O genoma do vírus está parcialmente em cadeia dupla, É
circular mas não é fechado covalentemente.Tem cerca
de 3,2Kb de comprimento (DNA relaxado ou RC-DNA).
RC-DNA é convertido num
plasmídeo covalentemente
fechado,o cccDNA circular.
2) Produção de pgRNA,e
encapsulamento com proteína P
(co-factor da transcriptase
reversa)
3) Acção da transcriptase reversa e transformação de novos genomas de RC-DNA;
A síntese de (+) DNA é feita através do DNA (-), o que faz com que se gerem novos RC-DNA.O
RC-DNA contendo a nucleocápsula vai ser envolvido libertado pela membrana plasmática
[Beck J,Nassal M, in World Journal of Gastroenterology,2007 ]
Genoma do vírus
O RC-DNA está parcialmente em duas cadeias, é
circular e é indicado por linhas pretas grossas,
com o P ligado covalentemente à extremidade 5'
do (-) DNA e o primer do RNA (linha em zigzag) à
extremidade nos 5’ do (+) DNA. A parte tracejada
simboliza os comprimentos heterogéneos da
cadeia positiva. DR1 e DR2 são zonas
sobrepostas. O círculo exterior simboliza o pgRNA
terminal redundante com o ε perto da
extremidade 5', e da cauda poli-A ligada à
extremidade 3'. O mRNA precoce é quase
idêntico, excepto que ele começa ligeiramente
acima.
[Adaptado de: Beck J,Nassal M, in World Journal of Gastroenterology 2007]
No genoma do vírus há 4 cadeias de leitura aberta
(ORF, open reading frames) na cadeia positiva do
genoma do vírus:
•
Gene pré-S/S: O gene pré-S/S codifica as
proteínas do invólucro do vírus (AgHBs) que é
detectado no soro de pacientes infectados.
•
Gene pré-C/C: Codifica uma proteína solúvel
(AgHBe), a proteína do invólucro extreno. A
proteína da nucleocápside (AgHBc), o “core”
possui o DNA viral. O core é composto por DNA
(que se duplica dentro dos núcleos das células
infectadas) e DNA polimerase.
•
Gene P: Codifica a DNA polimerase/transcriptase
reversa.
•
Gene X: Codifica uma proteína de significado
pouco claro.
Diagnóstico/Sintomas
É possível ser-se infectado com o vírus da hepatite B e não apresentar quaisquer sintomas
de doença
Pode causar:
Mau estar, cansaço e perda de apetite (algo semelhante a uma
gripe). Por vezes, observa-se uma coloração amarelada nos
olhos. Quando mais grave provoca insuficiência hepática
fulminante e fatal.
O diagnóstico da infecção é obtido com base na sorologia.
Indivíduo terá de possuir antigénios (HBsAg) mas apenas a
presença isolada de anti HBc pode fazer o diagnóstico 100%
fiável.
Fases da doença
A doença ocorre em 3 fases:
Fase prondrómica (Inicia-se subitamente: anorexia, mau estar
náuseas vómitos, febre e intolerância ao tabaco. )
Níveis altos de AgHBs, o AgHBe e de carga viral.
Níveis normais de aminotransferases.
Fase ictérica (Após 5 a 10 dias, a urina fica escura e detecta-se
icterícia – o paciente sente-se melhor apesar da icterícia.)
Níveis mais baixos de carga viral, aumento das
aminotransferases e existe AgHBe no soro.
Fase de recuperação (uma a duas semanas depois detecta-se o pico
da icterícia e o vírus começa a regredir lentamente.)
Esta fase é caracterizada pela passagem de portador
crónico para o estado de portador inactivo de AgHBs.
Baixos níveis de carga viral e aminotransferases normais.
Tratamento
O uso de interferões foram os primeiros a serem usados pois reparouse que até um terço dos indivíduos tratados desenvolviam uma
resposta:
perda do DNA do vírus e do AgHBe.
Actualmente há cinco drogas aprovadas para este tratamento:
interferão alfa, lamivudina, adenovir, entecavir e telbivudina.
Nenhuma medicação consegue erradicar de maneira eficaz o VHB dos hepatócitos. Não há
nenhum antiviral que consiga erradicar a curto prazo diminuir os níveis de cccDNA dos
hepatócitos de forma eficaz,.
Prevenção
O objectivo diminuir a incidência da doença e assim minorar as graves
consequências que a evolução crónica pode acarretar.
O VHB pode ser transmitido:
Por via parental;
Transfusão de sangue ou derivados;
Agulhas compartilhadas por consumidores de drogas;
Entre parceiros homossexuais de sexo masculino em
instituições fechadas
Informação e aconselhamento (não partilhar objectos pessoais
eventualmente contaminados – lâminas, escovas de dentes, tesouras, roupas
interiores, usar barreiras protectoras nas relações sexuais...);
Usar luvas no manuseamento de sangue e outros produtos orgânicos;
Vacinação.