Zika vírus Diagnóstico Laboratorial Helio Magarinos Torres Filho Testes Laboratoriais para Diagnóstico Zika vírus • 1948 • Cultura de células • Imunohemaglutinação de hemácias Zika vírus – Diagnóstico Laboratorial • RNA PCR • Fragmentos genéticos do vírus presente em diversos tipos de amostras (sangue, urina, saliva, liquor, etc) Anticorpos séricos • Anticorpos no sangue • Reação imunológica mediada pelas células de defesa • IgM : Resposta inicial, fase aguda, primeira infecção. • IgG: Resposta tardia, fase mais tardia ou anticorpo de memória. Zika vírus Anticorpos no sangue Imunofluorescência – Teste Mosaico, Dengue, Chikungunya, Zika Zika vírus anticorpos no sangue EIA IgG & IgM RNA PCR – Zika vírus • Sangue • 3º ao 5º dia após início da sintomatologia. • Urina • 3º – 5º ao 20º - 28º dia após o início da sintomatologia. • Saliva • Mesmo que sangue, menos invasivo (crianças, etc) • Liquor • Infecção do Sistema Nervoso Central (SNC) • Líquido Amniótico • Confirmação de alterações na ultrassonografia • Sêmen • Casais em tratamento para reprodução assistida Anticorpos no Sangue • IgM • 3º - 7º dia até 90º dia após inicio da sintomatologia. • IgG • 7º - 10º dia até meses e anos após início da sintomatologia. RNA PCR ZIKA Sangue 3º - 5º dia Urina 3º - 20º dia Saliva Liquor 3º - 5º dia Crianças Infecção do SNC Anticorpos Zika Vírus, sangue Anticorpos no Sangue IgM Fase Aguda IgG Convalescença IgM + IgG Transição entre Aguda e Convalescença 3º - 7º dia Até 3 meses 7º - 10º dia Até meses/anos 10º dia até 3 meses Flaviviroses • Zika vírus • Dengue vírus • Febre Amarela • Febre do Nilo Oeste • Encefalite Japonesa • TOTAL CDC SUPPORT FOR FLORIDA • $8.4 million in Zika-specific funding and $27 million in Public Health Emergency Preparedness (PHEP) funding that can be used to support Zika response efforts, for a total of $35.4 million. • At Florida’s request, CDC has sent a full CDC Emergency Response Team (CERT) with experts in Zika virus, pregnancy and birth defects, mosquito control, laboratory science, and risk communications. • Additional staff to support the Florida Department of Health (FLDOH), including an epidemiologist. • 10,000 cans of the insect repellent DEET, which can be distributed in communities to ward off mosquito bites. • Material for 6,300 Zika tests. • Florida can also use CDC funds to purchase Zika Prevention Kits or items needed for kits. Read more here: http://www.miamiherald.com/news/health-care/article104334761.html#storylink=cpy Zika vírus, RNA PCR Zika vírus, Anticorpos IgG M - DD -Qtd. de Exames por Competência (Gráfico) Zika vírus, Anticorpos IgM M - DD -Qtd. de Exames por Competência (Gráfico) Zika Diagnóstico, recomendações • Pacientes sintomáticos, fase aguda • RNA PCR e/ou Anticorpos IgM • Pacientes com complicações prováveis Zika vírus • Anticorpos IgG & IgM, RNA PCR (Urina) • Síndrome de Guillain Barré • Artrite persistente • Gestantes • Anticorpos IgG & IgM • • • • Sintomáticas Com história sugestiva (doença exantematosa) Nas primeiras semanas de gestação e segundo trimestre No Líquido amniótico, se houver confirmação por ultrassonografia • Crianças, recém-nascidos • RNA PCR, Anticorpos IgG & IgM • Filhos de gestantes com diagnóstico de Zika • Nascidos com malformações sugestivas de Zika Recomendações CDC, ANS Recomendações CDC, ANS 22/03/2016 – G1, GLOBO Anvisa passa a exigir teste de zika para doadores de óvulo e sêmen. Teste também será necessário para casais que passarão por fertilização. ANS, recomendações para inclusão no Rol de procedimentos, 06/06/2016 EXAMES APROVADOS E SUAS RECOMENDAÇÕES: • - PCR: recomendado para gestantes sintomáticas (somente até cinco dias após o surgimento dos primeiros sinais da doença). • - IgM: recomendado para gestantes com ou sem sintomas da doença nas primeiras semanas de gestação (pré-natal) com repetição desse procedimento ao final do 2º trimestre da gravidez; e para bebês filhos de mães com diagnóstico de infecção pelo vírus Zika, bem como aos recém-nascidos com malformação congênita sugestivas de infecção pelo vírus. • - IgG: recomendado somente para infeção pelo vírus Zika para gestantes ou recém-nascidos que realizaram pesquisa de anticorpos IgM cujo resultado foi positivo. Zika x Dengue, Março 2016 Reatividade cruzada pouco observada POSITIVO ZIKA G 16 12,90% ZIKA M 4 3,23% TOTAL 124 ZIKA PCR SANGUE 20 18,69% 107 3,23% ZIKA G + DENG 82 66,13% DENG + ZIKA 3 2,42% ZIKA M + DENM + 0 0% DENM + ZIKA M 2 2 2% 10 ZIKA G + DENG + 4 ZIKA PCR URINA 1,61% Diagnóstico clínico indefinido Índice de positividade 2016 • Zika RNA PCR: 372 amostras • • • • Sangue 307 Urina 47 Sêmen 14 Saliva 2 • 31 Positivos, 9% positividade • Zika Anticorpos IgM 3446 amostras • 81 Positivos, 2% positividade Zika, RNA, Anticorpos IgG e IgM 2016 Zika vírus, faixa etária Zika vírus testes Mensagem final • Uma importante mensagem diz respeito às indicações específicas para a realização de cada teste. Qualquer teste diagnóstico só terá valor se trouxer algum benefício para o paciente. Neste sentindo, os testes devem ser solicitados e interpretados pelo médico que examinou o paciente, pois ele será a pessoa mais indicada para a correta interpretação do resultado.