29/04/2010 VIROLOGIA Professor: Dr. Carlos F. M. Menck BIBLIOGRAFIA RECOMENDADA: Microbiologia 5a edição (2008), Atheneu. Editores: Luiz R. Trabulsi e F. Alterthum Principais Capítulos: 73, 74. 75, 79, 80, 81 e 95 Propriedades Gerais: capítulos 73 e 75. Replicação Viral: Capítulo 74 (ler para próxima aula!). Retrovírus e HIV: Capítulos 80 e 95 (ler para a aula seguinte!) Para consulta: Flint et al. Principles of Virology, Molecular Biology, Pathogenesis and Control. 2000, ASM Press, Washington DC WEB: www.microbelibrary.org Histórico Evidências históricas de doenças ligadas a vírus: Múmias Rampses V morreu provavelmente de varíola!!! Maldição das múmias (febre amarela) 1 29/04/2010 Histórico Múmia miss Chile, contaminada com HTLV (relacionado com leucemia, e comum entre os japoneses)!!! Museu de San Pedro, no Atacama. Figuras de pessoas com sequelas de Poliomielite no Egito Antigo. 2 29/04/2010 Raiva citada no livro As Ilíadas e na Mesopotâmia: Lei sobre responsabilidade por cães com raiva. “Três tulipas quebradas”: Pintura de Nicolas Robert (1624-1685) 3 29/04/2010 Varíola: uma epopéia humana: - Originária provavelmente na Ásia! - Ásia para a Europa - Guerra Biológica: importância na invasão das Américas (espanhóis –Hernando Cortez “doavam” cobertores contaminados aos índios como resultado 3,5 milhões de Astecas morreram entre 1520-22). VACINAS- desde quando? China (1000 DC) – variolação: proteção com contra varíola (alta freqüência de morte); Lady Mary Wortley Montagu, mulher do embaixador Inglês na Turquia, trouxe para a Inglaterra o processo em 1721. Problemas: 1 a 2% de morte (melhor que 2030% de uma contaminação normal), mas pode disseminar a doença!! 4 29/04/2010 Em final do século XVIII (1790): Edward Jenner (médico inglês) descobriu a primeira vacina. --- processo de vacinação com vírus atenuado. ---Vaccinia é a vacina da varíola (do latim “vacca”) uso do cowpox. Foi Bem aceita na época? Mas e a origem do vírus atual? talvez cavalo!? 5 29/04/2010 Ali Maow Maalin 1977- último paciente de varíola (ele participava da campanha de vacinação!). Gripe Espanhola- Pandemia de 1917-1919 Disseminada pela própria guerra (Primeira Guerra Mundial), mas matou cerca de 50 milhões de pessoas. 6 29/04/2010 Descoberta dos vírus Filtro de Chamberlain, usado Beijerink para filtrar TMV em 1898 Século XX: Algumas doenças eram causadas por elemento tóxico filtrável. Mas com capacidade de reprodução: “contagium vivum fluidum”!! Descoberta dos vírus Denominado de “Vírus (veneno) filtrável” Bacteriófagos: comedores de bactérias-> fagos. 7 29/04/2010 1952: Hershey e Chase: DNA é o material genético! Marcação diferencial entre proteínas (S35) e DNA (P32). 1956: vírus do mosaico do tabaco (TMV) – genoma de vírus é RNA! 8 29/04/2010 Características virais: pequeno tamanho! Diversidade viral: forma e genoma (RNAe DNA) 9 29/04/2010 Propriedade Gerais dos Vírus Componentes: Genoma. Capsídeo Envelope. Como são formados esses componentes? Quais são os tipos de genomas virais? Do que é composto cada componente? O que é proveniente do hospedeiro? O que é proveniente do vírus? Por que existem enzimas virais no virion? 10 29/04/2010 COMPOSIÇÃO VIRAL envelope capsídeo genoma COMPOSIÇÃO DO CAPSÍDEO Proteínas: Protômeros e capsômeros 11 29/04/2010 Simetria do capsídeo: icosaedro Eixos de simetria: Simetria do capsídeo: icosaedro 12 29/04/2010 EXEMPLOS: adenovírus papilomavírus rotavírus herpesvírus Simetria do capsídeo: HELICOIDAL! 13 29/04/2010 Exemplos: Vírus do mosaico de tabaco ebola Exemplo de helicoidal envelopado. Vírus influenza 14 29/04/2010 Simetria do capsídeo: complexa Bacteriófagos: Simetria do capsídeo: complexa Poxvírus: Vírus vaccinia. 15 29/04/2010 COMPOSIÇÃO DO ENVELOPE Lipídeos e proteínas: Qual sua origem? Exemplo de HIV: 16 29/04/2010 OUTROS EXEMPLOS INTERESSANTES HIV Arenavírus Classificação dos vírus. • • • • • • • • • Tipo de ácido nucléico e homologia Morfologia Presença de enzimas no vírion Susceptibilidade a agentes físicos e químicos Propriedades imunológicas Vias de transmissão Tropismo Patologia ao nível tecidual Sintomatologia 17 29/04/2010 VÍRUS E SEUS TIPOS DE GENOMA. DNA RNA Simples fita Dupla fita Fita positiva Simples fita Fita negativa Dupla fita TIPOS DE GENOMA VIRAL VÍRUS genoma Parvovirus DNA sf SV40 DNA df Adenovírus DNA df Herpes simplex DNA df estrutura linear circular linear linear No de moléculas 1 1 1 1 tamanho 5,2 Kb 5,2 Kbp 36 Kbp 152,3 Kbp Poliovírus RNA sf+ linear 1 7,4 Kb Reovírus Influenza HIV RNA df RNA sfRNA sf+ linear linear linear 10 8 2(idênticas) 23,5 Kbp ~10 Kb 8,0 Kb 18 29/04/2010 Hepatite DNA gapped circular Bromovíridea RNA sf (Alfafa mosaic virus) Viróide Prion RNA sf 1 3,4 Kb genoma segmentado em 3 capsídeos. linear 1 0,3 Kb não tem genoma próprio!!!!! VÍRUS EM GERAL SÃO PEQUENOS MIMIVÍRUS: O VÍRUS GIGANTE MIMIVÍRUS- INFECTA AMEBA 19 29/04/2010 VÍRUS EM GERAL SÃO PEQUENOS VÍRUS EM GERAL TEM GENOMA PEQUENOS 20 29/04/2010 POSIÇÃO FILOGENÉTICA DOS MIMIVIRUS Classificação viral segundo Baltimore. DNA dupla fita DNA simples fita DNA dupla fita DNA dupla fita RNA fita+ RNA fita + DNA dupla fita mRNA RNA fita + RNA fita - RNA dupla fita RNA fita - RNA fita + RNA fita + 21 29/04/2010 Cultura de Vírus Animais experimentaisarbovírus ( febre amarela e dengue)- inoculação de cérebros de camundongos Ovos embrionados: - Influenza, sarampo, polio, etc Cultura de Vírus 22 29/04/2010 Culturas de explantes- a partir de tecidos animais -- Células em monocamadas -- Culturas primárias e linhagens estabelecidas Culturas de explantes- a partir de tecidos animais -- Células em monocamadas -- Culturas primárias e linhagens estabelecidas HeLa cells- 1951 from Henrietta Lacks, from cervical cancer! (contaminantes de várias culturas celulares) 23 29/04/2010 Como cultivar? Que meio usar? Culturas de células tronco 24 29/04/2010 Efeitos citopáticos citomegalovírus adenovírus Vírus sarampo: sincício. 25 29/04/2010 Vírus respiratório sincicial: Sincício e corpúsculos de inclusão. Reovírus: corpúsculos de inclusão. 26 29/04/2010 27