Nome Nº Série / Ano 3º Disciplina Biologia Professor Natureza Código / Tipo Juliano Trimestre / Ano 2o/2012 Ensino Turma Médio Data /08/2012 Tema Transgênicos no Vestibular 1. (Unirio 1999) Na engenharia genética, a técnica de DNA recombinante vem sendo utilizada na pesquisa e no desenvolvimento, por exemplo, de vacinas e medicamentos. O esquema a seguir apresenta algumas etapas dessa técnica. a) Analise as etapas I, II e III. Em quais delas se desenvolvem, respectivamente: a1) o pareamento das bases? a2) a ação das enzimas de restrição? a3) a ação da DNA ligase? b) "Os agricultores americanos, por exemplo, já estão plantando as sementes da terceira safra de milho, algodão e soja transgênicos." (Adaptação do artigo "Revolução invisível na mesa", da revista Época, 8 de junho de 1998). Conceitue os organismos transgênicos. 2. (Ufrj 2000) As técnicas modernas de engenharia genética tornaram possível a produção de plantas transgênicas que possuem genes introduzidos artificialmente no seu genoma. Entre as várias estratégias de produção de plantas transgênicas, destacamos duas: Plantas resistentes a certos vírus patogênicos que, na ausência do gene de resistência, as matariam. Plantas mais resistentes aos efeitos dos defensivos agrícolas (agrotóxicos). Essas plantas toleram concentrações maiores de agrotóxico sem alterar as propriedades tóxicas dos defensivos agrícolas. Do ponto de vista ambiental, qual das duas estratégias não é recomendável? Justifique sua resposta. 3. (Fuvest 2002) Um pesquisador construiu um camundongo transgênico que possui uma cópia extra de um gene Z. Em um outro camundongo jovem, realizou uma cirurgia e removeu a hipófise. Em seguida, estudou o crescimento desses camundongos, comparando com o crescimento de um camundongo, não-transgênico e com hipófise. Obteve as seguintes curvas de crescimento corporal: a) Explique a causa da diferença no crescimento dos camundongos 2 e 3. b) Com base em sua resposta ao item a, elabore uma hipótese para a causa da diferença no crescimento dos camundongos 1 e 2. 4. (Uerj 2002) A virulência do 'Bacillus anthracis', causador do antraz, está diretamente associada à presença conjunta dos componentes toxina e cápsula bacteriana, e é atenuada quando um deles está ausente. Os constituintes da toxina são codificados por genes existentes no plasmídeo pX01, e os da cápsula por genes existentes no plasmídeo pX02. O esquema abaixo representa quatro diferentes linhagens de 'Bacillus anthracis'. a) Explique a utilidade dos plasmídios bacterianos no desenvolvimento de técnicas de DNA recombinante. b) A cápsula do 'Bacillus anthracis', ao contrário da toxina, não possui antígenos capazes de provocar reação imunológica protetora em mamíferos. Assim, dentre as linhagens apresentadas, indique a que pode ser utilizada na elaboração de uma vacina composta por bactérias vivas com 2 virulência atenuada. Justifique sua indicação. 5. (Uerj 2004) A enzima poligalacturonase, que digere a parede celular de células vegetais, é a principal responsável pela maturação de frutos como o tomate. Para retardar o amadurecimento e evitar as perdas durante o armazenamento, utilizou-se uma técnica na qual o gene que codifica a enzima citada foi inserido, de maneira invertida, no genoma de um tomateiro. O esquema ao lado mostra os produtos da transcrição do gene normal da enzima e do gene inserido, ambos ativos nesse tomate geneticamente modificado. a) Descreva a interação que ocorre entre os produtos da transcrição dos genes normal e inserido no tomate geneticamente modificado e indique a característica dessas moléculas que permite a interação. b) Explique por que haverá um aumento no tempo de amadurecimento desse tomate geneticamente modificado. 6. (Uff 2005) A terapia gênica, uma promessa da biotecnologia moderna, consiste na cura de defeitos genéticos pela introdução de genes normais em células de indivíduos doentes. Algumas metodologias em estudo utilizam retrovírus modificados como veículo de introdução do gene desejado. Por exemplo, na β-talassemia, doença caracterizada pela produção de hemoglobina anormal devido a uma deleção no gene que codifica a cadeia β da globina, poderia ser usado um retrovírus modificado, contendo a informação para a síntese da β-globina. Nesse caso, deveriam ser realizadas três etapas: 1ª - coletar células da medula óssea do paciente; 2ª - colocar as células coletadas em contato com o retrovírus modificado, para que essas sejam infectadas; 3ª - reintroduzir as células infectadas no paciente. A seguir, estão esquematizadas a partícula viral original, antes da manipulação (Esquema I), e quatro diferentes partículas virais modificadas 3 (Esquemas II, III, IV e V). - X representa o trecho de ácido nucléico viral, que codifica as proteínas necessárias para a formação de novas partículas virais no interior da célula hospedeira. - Y representa o trecho de ácido nucléico introduzido, que contém a informação para a síntese da cadeia β da globina. - o símbolo esférico e negro, indicado em algumas figuras, indica que a partícula viral contém as enzimas transcriptase reversa e integrase (insere o material genético de origem viral no genoma da célula). a) Explique por que, no caso do tratamento da talassemia, as células retiradas da medula óssea são as indicadas para serem infectadas com as partículas virais adequadamente modificadas. b) Indique qual dos retrovírus modificados, apresentados nos esquemas acima, seria o mais indicado para ser usado nesse tratamento. Justifique sua resposta. 7. (Ufu 2006) CONVERSÃO CELULAR: Cientistas israelenses induzem células hepáticas a produzir insulina em laboratório e propõem técnica para tratar diabetes tipo 1. De acordo com a técnica esquematizada a seguir, células de fígado são cultivadas em laboratório. Um vírus é inserido nas células, contendo um gene que, em células do pâncreas, está ligado à produção de insulina. As células se diferenciam em cultura, ficando mais parecidas com as que existem no pâncreas (células beta). Os cientistas acreditam que as células transformadas possam futuramente ser usadas no combate ao diabetes tipo 1. Com relação ao procedimento descrito, responda os itens a seguir. a) Cite UMA desvantagem do uso de vírus como vetores de terapia gênica. b) Qual é a vantagem da terapia gênica descrita, quando comparada ao tratamento de diabéticos com transplante de células de pâncreas de indivíduos mortos? 4 8. (Uerj 2010) Em uma pesquisa, cientistas extraíram amostras de DNA de três espécies diferentes e determinaram suas relações, apresentadas na tabela a seguir. Amostra G C A T 1 0,82 2 1,05 3 1,21 Em seguida, aqueceram-se as amostras e mediu-se a temperatura de desnaturação de cada uma delas. Sabe-se que, na temperatura de desnaturação, todas as pontes de hidrogênio entre as bases nitrogenadas estão rompidas. Identifique a amostra com maior temperatura de desnaturação. Justifique sua resposta. 9. Sabe-se que o nitrogênio (N) é um dos principais elementos constituintes de compostos orgânicos, tais como os aminoácidos e os ácidos nucleicos. Em um experimento que estudava os mecanismos da duplicação do DNA, uma única célula da pele de um rato foi mantida por algum tempo em um meio de cultura contendo nitrogênio radioativo (N 15) como fonte deste elemento químico. Posteriormente, os cientistas transferiram a célula para outro meio de cultura, dessa vez contendo o nitrogênio normal (N 14). Neste novo meio, a célula foi submetida a 4 divisões mitóticas e, a partir das células-filhas, foi produzido um extrato purificado de todo o DNA constituinte dessas células. Verificou-se que a porcentagem de adenina era de 17% e que a concentração de DNA contendo N15 e N14 era muito diferente após as 4 divisões celulares. De acordo com as informações acima, responda aos itens que seguem: a) Qual seria a porcentagem de citosina presente no extrato das células-filhas? b) Proponha uma explicação para a diferença observada na concentração de DNA contendo N 15 e N14 ao final do experimento. 10. Sathya e Felipe explicavam um conteúdo de Genética – síntese de proteínas – aos colegas. Para isso, eles utilizaram a seguinte analogia: “Ricardo trabalha em uma confeitaria cujo proprietário é alemão. Todas as manhãs, o proprietário deixa, sobre a mesa da cozinha, uma receita em português e os ingredientes de um bolo que Ricardo deve preparar. Os livros com as receitas originais, escritas em alemão, ficam guardados no escritório da confeitaria. Somente o patrão de Ricardo pode abrir o escritório e escrever, em português, a receita a ser utilizada naquele dia.” Célula – Núcleo – Cromossomo – Genes – RNA polimerase – RNA mensageiro - ribossomo – proteína Elabore um trecho relacionando os termos usados na analogia de Sathya e Felipe com os termos que aparecem no retângulo. Na sua construção, seja objetivo. 5 11. (UFRJ 2007) As sequências de RNA mensageiro a seguir codificam peptídeos com atividades biológicas específicas. Suponha que mutações no DNA tenham causado as seguintes mudanças nas duas moléculas de RNAm (1 e 2). A tabela resumida do código genético mostra alguns códons e seus aminoácidos correspondentes. Com base nos dados fornecidos responda: a) Em qual das mudanças (1 ou 2) há risco de perda ou de diminuição da atividade biológica? Justifique sua resposta. b) Uma das mudanças ocorridas, embora tenha alterado a sequencia de bases nitrogenadas, não resultou em alteração da cadeia peptídica. Com base nas características do Código Genético, explique o porquê disso. 12. (Uem 2012) Sobre a eletroforese de DNA, é correto afirmar que 01) é realizada utilizando-se uma placa com gel especial, fragmentos de DNA e aplicação de corrente elétrica. 02) os fragmentos de DNA que possuem cargas negativas se deslocam para o polo positivo, quando é aplicada uma descarga elétrica na placa de gel. 04) a eletroforese de DNA tem sido utilizada para a identificação de pessoas, nas investigações policiais, em processos judiciais e na determinação da paternidade. 08) gêmeos monozigóticos podem ser distinguidos pela análise do DNA nuclear. 16) os fragmentos separados por eletroforese são formados por DNA com cadeia dupla. 13. (Unirio 2009) As doenças genéticas são doenças incuráveis, sendo que algumas têm tratamento. (...) Estas doenças trazem consigo alguns dilemas éticos: é eticamente adequado diagnosticar doenças sem cura? (...) A alternativa mais promissora para o tratamento destas doenças é a terapia gênica, a partir de técnicas de Engenharia Genética. A terapia gênica ainda apresenta uma série de limitações, mas a Engenharia Genética já dispõe de uma série de conceitos e técnicas que são comumente mencionados nos meios de comunicação. 6 Dos conceitos apresentados, identifique aquele que está incompatível com sua definição. a) Enzimas de restrição, ou endonucleases de restrição, são proteínas produzidas nos núcleos das células que “picotam” a molécula de DNA sempre em determinados pontos. b) Eletroforese em gel é uma técnica que permite a separação e a visualização dos fragmentos moleculares de DNA produzidos pela ação das enzimas de restrição. c) A tecnologia do DNA recombinante permite a multiplicação de determinados fragmentos de DNA, com a intervenção de plasmídeos. d) Os exames de paternidade usam a amplificação da amostra DNA pela técnica do PCR e da eletroforese em gel para a produção de imagens que serão analisadas e interpretadas. 14. (Ufpe 2003) Analise a figura a seguir, que representa um determinado experimento. 1) Produção de DNA recombinante (plasmídio de uma bactéria/ gene do vaga-lume) 2) Introdução do DNA em célula de tabaco 3) Multiplicação da célula de tabaco com o gene do vaga-lume 4) Desenvolvimento de uma planta de tabaco com o gene do vaga-lume (planta que fluoresce) O experimento ilustrado é: a) produção de transgênicos. b) hibridação intra-específica. c) aconselhamento genético. d) eletroforese. e) amniocentese. 15. (Ufmg 1995) Considere estes dados como hipotéticos. Um casal apresenta, em seus cromossomos de número 21, pontos de quebra por enzimas especiais, indicados no esquema por setas. Essas resultam em fragmentos de tamanhos diferentes que podem ser utilizados como marcadores genéticos. No esquema a seguir, os fragmentos são indicados por Kb (1Kb=1000 pares de bases nitrogenadas). 7 Esse casal tem uma criança com Síndrome de Down devida à trissomia do cromossomo 21. Os resultados obtidos com o estudo dos marcadores para o cromossomo 21 do pai, da mãe e da criança estão indicados na figura 2, onde cada traço indica a posição e o tamanho dos fragmentos num campo de eletroforese. Com base nas informações apresentadas e em conhecimentos sobre o assunto responda ao que se pede. a) Identifique o genitor que transmitiu dois cromossomos 21 à criança. Justifique sua resposta. b) Determine o estágio da meiose, I ou II, em que ocorreu o fenômeno de não-separação ou não-disjunção dos cromossomos. Justifique sua resposta. 8 GABARITO: Resposta da questão 1: a1) ETAPA II. a2) ETAPA I. a3) ETAPA III. b) Organismos ou indivíduos em que genes de uma outra espécie são deliberadamente introduzidos por meio de engenharia genética. Resposta da questão 2: A segunda. A maior resistência das plantas aos agrotóxicos permitirá o aumento da quantidade de agrotóxicos lançados no ambiente, com a consequente contaminação do solo e das águas, levando à eliminação local de várias espécies. Resposta da questão 3: a) O camundongo 2, não-transgênico, apresenta maior aumento corporal, pois sua hipófise secreta normalmente o hormônio do crescimento. b) O camundongo 1, geneticamente modificado, produz maior quantidade de hormônio do crescimento, pois apresenta uma cópia extra do gene que codifica sua produção. Resposta da questão 4: a) Um fragmento de DNA de qualquer origem pode ser inserido, com o uso de enzimas de restrição, em um plasmídeo extraído de uma bactéria. O plasmídeo modificado, posteriormente reintroduzido na bactéria, fará com que esta passe a produzir, também, as proteínas codificadas pelos genes inseridos no plasmídeo. b) Linhagem II. Nela, a atenuação da virulência está associada à ausência do plasmídeo pX02. Além disso, como esta linhagem produz toxina, estão presentes os antígenos capazes de induzir imunidade protetora. Resposta da questão 5: a) Os RNA mensageiros transcritos do gene normal e do gene inserido formam um RNA de dupla hélice ou híbrido. A disposição das bases destes dois RNA mensageiros são exatamente complementares. 9 b) Havendo a interação entre os RNA mensageiros transcritos a partir destes dois genes, restarão menos mensageiros normais (fita simples) capazes de serem traduzidos em enzima, ao nível ribossomal. Em consequência, a concentração da enzima diminuirá nas células, o que retardará o processo de maturação. Resposta da questão 6: a) Nas células da medula óssea existem células precursoras dos eritrócitos. Após receberem a cópia do gene, que codifica a cadeia peptídica da hemoglobina, essas células se diferenciarão em eritrócitos que produzirão a hemoglobina normal. b) O retrovírus modificado mostrado no esquema IV. Essa partícula viral tem a capacidade de inserir a cópia do gene da cadeia β da hemoglobina no cromossomo das células hospedeiras, porque contém as enzimas transcriptase reversa e integrase. Além disso, não tem a capacidade de produzir novas partículas virais que infectariam as outras células do paciente, pois o trecho X do ácido nucléico do vírus original foi retirado. Resposta da questão 7: a) A possibilidade de não ocorrer a incorporação do gene relacionado à produção do hormônio ou provocar alterações genéticas indesejáveis nas células do fígado, comprometendo a função hepática. b) Maior grau de confiabilidade, supondo que o gene que será inserido nas células do fígado deve induzir a produção de insulina com maior eficiência. Células de outros indivíduos podem provocar rejeição e, neste caso, não apresentar a mesma eficiência na produção de insulina. Resposta da questão 8: A amostra 3 é a que apresenta maior temperatura de desnaturação, pois é a que possui maior proporção de G+C, o que significa dizer que é a amostra que possui maior números de ligação de hidrogênio (ponte de hidrogênio), já que entre Timina e Adenina ocorrem apenas duas pontes de hidrogênio enquanto que entre Citosina e Guanina ocorrem três. Quanto mais pontes de hidrogênio a molécula tiver, maior deverá ser a energia aplicada para rompê-las. Resposta da questão 9: a) Segundo Erwin Chargaff: % Adenina = % Timina; % Citosina = % Guanina Se a % de Adenina era de 17% temos: T = 17% A porcentagem de C + G = (100 – 34) = 66%. Portanto, C = 33% e G = 33%. b) Sabe-se que a duplicação do DNA é um processo semiconservativo. Dessa forma, a concentração de N15 no extrato final deve ser menor do que a de N14. Isso ocorre porque as fitas parentais ficam conservadas ao longo das gerações, mas estarão presentes em quantidades cada vez menores quando comparadas com as fitas recém-formadas constituídas por N14. No esquema abaixo, as fitas azuis escuras representam DNA formado por N15, enquanto a fitas azuis claras mostram DNA com N14. 10 Resposta da questão 10: Confeitaria = célula; escritório = núcleo; livro de receitas = cromossomo; receita original em alemão = gene; patrão = RNA polimerase; receita em português = RNA mensageiro; Ricardo = ribossomo; bolo = proteína. Resposta da questão 11: a) A mudança 2, pois essa é a única que provoca troca de aminoácidos. Essa troca altera a estrutura do peptídeo, o que pode alterar sua função. b) Lembrar que o Código Genético é Degenerado. Resposta da questão 12: 01 + 02 + 04 + 16 = 23. Os gêmeos monozigóticos são geneticamente idênticos e, por esse motivo, não podem ser distinguidos pela análise do DNA nuclear por eletroforese em gel. Resposta da questão 13: [A] As enzimas de restrição são proteínas produzidas por bactérias, micro-organismos desprovidos de núcleo organizado, com a finalidade de se defender de ataques de vírus. Resposta da questão 14: [A] Resposta da questão 15: a) O pai, porque a criança possui apenas 1 cromossomo 21 materno. b) Divisão I, porque a criança possui 2 cromossomos 21 distintos. 11