Vírus respiratórios aviários

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Vírus respiratórios
aviários: Epidemiologia,
Diagnóstico e Controle
Helena Lage Ferreira
Seminário internacional da FAPESP
12 de Setembro, 2011.
Vírus respiratórios aviários
Produção avícola comercial....
… e de fundo de quintal
Vírus respiratórios aviários
Problemas na avicultura
Vírus da
laringotraqueíte
infecciosa
Metapneumovírus
aviário
Notificação à
OIE
>US$1bi
Influenza vírus
Vírus respiratórios aviários
Restrições
comerciais
Vírus da
bronquite
infecciosa
>>US$
Vírus da doença
de Newcastle
Problemas na avicultura
Prostação, diarréia,
sinais respiratórios
Conjuntivite
100% de mortalidade
Queda de postura
Sinais nervosos, torcicolo
Vírus respiratórios aviários
Epidemiologia
Influenza
Influenza
DN
aMPV
Coronavirus
?
Influenza
DN
aMPV
Coronavírus
Esporádico
Influenza
Esporádico
Influenza
DN
Vírus respiratórios aviários
Adaptado de Swayne (2008). In: ___. Avian Inflluenza
Diagnóstico
o Viral
Vírus respiratórios aviários
o Sorológico
Controle
Abate
Biosseguridade
Diagnóstico
Vacinação
Monitorada
Vigilância
Prevenção
Vírus respiratórios aviários
Interferência por RNA
o
Fire, A. et al. (1998). Potent and specific genetic
interference by double-stranded RNA in Caenorhabditis
elegans. Nature, 391, 806-811.
o
Prêmio Nobel de Medicina 2006
Caenorhabditis elegans
Vírus respiratórios aviários
Craig C. Mello and Andrew Z. Fire
Interferência por RNA
citoplasma
siRNA
RISC
(RNA silencing
complex)
Vírus respiratórios aviários
RISC
ativado
Fita as
Associação
com RNAm
alvo
Clivagem
do RNAm
alvo
Adaptado de Hilleman (2003). Vaccine, 21:4626-4649
aMPV
MPVA
o Rinotraqueíte (TRT) em perus
o Síndrome da cabeça inchada
(SCI) em frangos e galinhas
o Doença aguda e altamente
contagiosa
o Aves domésticas e aves
silvestres
Vírus respiratórios aviários
RNAi é capaz de
inibir o aMPV?
Vírus respiratórios aviários
SH
25, 50, 75, 100 nM
ECP
Titulação viral
+
aMPV
Vírus respiratórios aviários
Easton et al (2004). Clinical Microbiology Reviews, 17: 390–412
Ausência de efeito citopático em
células tratadas com siRNA/N
Fig. 1. CPE in transfected cells after 3 days (200 ). CER cells were transfected with siRNAs at 75 nM. The
transfected cells were infected after 6 h with AMPV subtype A: (A) negative control (without virus and siRNAs);
(B) siRNA/GFP (control group); (C) siRNA/N; (D) siRNA/F.
Vírus respiratórios aviários
Queda nos títulos virais pelo siRNA/N
Fig. 2. Transfected cells monolayer were infected with AMPV after 6 h posttransfection.Supernatants were
collected 3 days after infection and assayed for virus titration. *p < 0.05 when compared to the control group.
Vírus respiratórios aviários
Impacto na produção de RNAm N e F
Fig. 3. Attenuation of AMPV mRNA copy numbers by siRNAs in N mRNA (a) and F mRNA (b). *p < 0.05 when
compared to the control group.
Vírus respiratórios aviários
Impacto na produção de RNAm G
Effect of different siRNAs on GmRNAproduction (448 bp) in the culture supernatants from infected cells, as
indicated:
(A), 1 positive and 2 negative control; (B) siRNA/GFP; (C) siRNA/N; (D) siRNA/F; M, leader 1 kb plus;
Vírus respiratórios aviários
numbers 1–4, 25, 50, 75, 100 nM, respectively.
Conclusões
siRNA/N
Vírus respiratórios aviários
99.9%
;
Conclusões
Gênero Pneumovírus: Vírus Respiratório Sincicial
3’
NS1
NS2
N
P
M
S
H
G
F
M2
L
5’
Gênero Metapneumovirus: Metapneumovírus aviário, metapneumovírus humano
3’
N
P
M
F
Medicamento
SPC3649
pHIV7-shl-TARCCR5RZ
Virus
HCV
HIV
ALN-RSV01
ALN-RSV01
RSV em voluntários
RSV em pacientes
transplantados (pulmão)
ALN-RSV01
RSV em pacientes
transplantados (pulmão)
Vírus respiratórios aviários
M2 SH G
L
5’
Alvo
miR-122
HIV Tat proteína, HIV
TAR RNA, humano
CCR5
RSV nucleocapsídeo
RSV nucleocapsídeo
Laboratório
Santaris Pharm
City of Hope Mediacal
Center/Benitec
Fase
Ativa, fase II
Ativa, fase 0
Alnylam Pharm.
Alnylam Pharm.
Completa, fase II
Completa, fase I
RSV nucleocapsídeo
Alnylam Pharm.
Ativa, fase II
Davidson & McCray Jr., (2011) Rev Genet,12(5):329-40
Infecção
Excreção
Tropismo
viral
Limites dos
programas
de
vacinação
MDA
Origem vírus
vacinal
versus vírus
brasileiro
Vírus respiratórios aviários

Proteção
Resposta
sorológica
FAPESP
BELSPO
EC FP6
Projeto Europeu “Novaduck”
Michel Bublot
Véronique Jestin
OBRIGADA
Laboratório de Virologia Animal
Clarice Weis Arns
Renata Servan de Almeida
Regina Célia Freitas D Arce
Marcia M dos Santos
Paulo Anselmo
Paula
Porto e Geneci
Vírus respiratórios
aviários
Olivier Guionie
Jill Banks
Nick Derek
Avian Virology and Immunology
Unit
Thierry van den Berg
Bénédicte Lambrecht
Steven Van Borm
Jean François Pirlot
Fabienne Rauw
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