Vírus respiratórios aviários: Epidemiologia, Diagnóstico e Controle Helena Lage Ferreira Seminário internacional da FAPESP 12 de Setembro, 2011. Vírus respiratórios aviários Produção avícola comercial.... … e de fundo de quintal Vírus respiratórios aviários Problemas na avicultura Vírus da laringotraqueíte infecciosa Metapneumovírus aviário Notificação à OIE >US$1bi Influenza vírus Vírus respiratórios aviários Restrições comerciais Vírus da bronquite infecciosa >>US$ Vírus da doença de Newcastle Problemas na avicultura Prostação, diarréia, sinais respiratórios Conjuntivite 100% de mortalidade Queda de postura Sinais nervosos, torcicolo Vírus respiratórios aviários Epidemiologia Influenza Influenza DN aMPV Coronavirus ? Influenza DN aMPV Coronavírus Esporádico Influenza Esporádico Influenza DN Vírus respiratórios aviários Adaptado de Swayne (2008). In: ___. Avian Inflluenza Diagnóstico o Viral Vírus respiratórios aviários o Sorológico Controle Abate Biosseguridade Diagnóstico Vacinação Monitorada Vigilância Prevenção Vírus respiratórios aviários Interferência por RNA o Fire, A. et al. (1998). Potent and specific genetic interference by double-stranded RNA in Caenorhabditis elegans. Nature, 391, 806-811. o Prêmio Nobel de Medicina 2006 Caenorhabditis elegans Vírus respiratórios aviários Craig C. Mello and Andrew Z. Fire Interferência por RNA citoplasma siRNA RISC (RNA silencing complex) Vírus respiratórios aviários RISC ativado Fita as Associação com RNAm alvo Clivagem do RNAm alvo Adaptado de Hilleman (2003). Vaccine, 21:4626-4649 aMPV MPVA o Rinotraqueíte (TRT) em perus o Síndrome da cabeça inchada (SCI) em frangos e galinhas o Doença aguda e altamente contagiosa o Aves domésticas e aves silvestres Vírus respiratórios aviários RNAi é capaz de inibir o aMPV? Vírus respiratórios aviários SH 25, 50, 75, 100 nM ECP Titulação viral + aMPV Vírus respiratórios aviários Easton et al (2004). Clinical Microbiology Reviews, 17: 390–412 Ausência de efeito citopático em células tratadas com siRNA/N Fig. 1. CPE in transfected cells after 3 days (200 ). CER cells were transfected with siRNAs at 75 nM. The transfected cells were infected after 6 h with AMPV subtype A: (A) negative control (without virus and siRNAs); (B) siRNA/GFP (control group); (C) siRNA/N; (D) siRNA/F. Vírus respiratórios aviários Queda nos títulos virais pelo siRNA/N Fig. 2. Transfected cells monolayer were infected with AMPV after 6 h posttransfection.Supernatants were collected 3 days after infection and assayed for virus titration. *p < 0.05 when compared to the control group. Vírus respiratórios aviários Impacto na produção de RNAm N e F Fig. 3. Attenuation of AMPV mRNA copy numbers by siRNAs in N mRNA (a) and F mRNA (b). *p < 0.05 when compared to the control group. Vírus respiratórios aviários Impacto na produção de RNAm G Effect of different siRNAs on GmRNAproduction (448 bp) in the culture supernatants from infected cells, as indicated: (A), 1 positive and 2 negative control; (B) siRNA/GFP; (C) siRNA/N; (D) siRNA/F; M, leader 1 kb plus; Vírus respiratórios aviários numbers 1–4, 25, 50, 75, 100 nM, respectively. Conclusões siRNA/N Vírus respiratórios aviários 99.9% ; Conclusões Gênero Pneumovírus: Vírus Respiratório Sincicial 3’ NS1 NS2 N P M S H G F M2 L 5’ Gênero Metapneumovirus: Metapneumovírus aviário, metapneumovírus humano 3’ N P M F Medicamento SPC3649 pHIV7-shl-TARCCR5RZ Virus HCV HIV ALN-RSV01 ALN-RSV01 RSV em voluntários RSV em pacientes transplantados (pulmão) ALN-RSV01 RSV em pacientes transplantados (pulmão) Vírus respiratórios aviários M2 SH G L 5’ Alvo miR-122 HIV Tat proteína, HIV TAR RNA, humano CCR5 RSV nucleocapsídeo RSV nucleocapsídeo Laboratório Santaris Pharm City of Hope Mediacal Center/Benitec Fase Ativa, fase II Ativa, fase 0 Alnylam Pharm. Alnylam Pharm. Completa, fase II Completa, fase I RSV nucleocapsídeo Alnylam Pharm. Ativa, fase II Davidson & McCray Jr., (2011) Rev Genet,12(5):329-40 Infecção Excreção Tropismo viral Limites dos programas de vacinação MDA Origem vírus vacinal versus vírus brasileiro Vírus respiratórios aviários Proteção Resposta sorológica FAPESP BELSPO EC FP6 Projeto Europeu “Novaduck” Michel Bublot Véronique Jestin OBRIGADA Laboratório de Virologia Animal Clarice Weis Arns Renata Servan de Almeida Regina Célia Freitas D Arce Marcia M dos Santos Paulo Anselmo Paula Porto e Geneci Vírus respiratórios aviários Olivier Guionie Jill Banks Nick Derek Avian Virology and Immunology Unit Thierry van den Berg Bénédicte Lambrecht Steven Van Borm Jean François Pirlot Fabienne Rauw