título do resumo

VARIABILIDADE GENÉTICA DE POPULAÇÕES NATURAIS DE CURIMBA
DE UM PROGRAMA DE REPOVOAMENTO NO RIO TIETÊ
Andrei Lincoln Yamachita, Silvio Carlos Alves dos Santos, Nelson Mauricio
Lopera Barrero (Orientador), e-mail: [email protected]
Universidade Estadual de Londrina/Departamento de Zootecnia/CCA
Área e sub-área do conhecimento: Zootecnia/Genética e Melhoramento.
Palavras-chave: Conservação genética, peixe, Prochilodus lineatus.
Resumo
O objetivo deste estudo foi analisar a variabilidade genética de populações
naturais de curimba (Prochilodus lineatus) do programa de repovoamento do
rio Tietê. Foram coletadas 38 amostras de nadadeiras de quatro populações
naturais de reservatórios localizados no rio Tietê. Os reservatórios avaliados
foram os seguintes: LMO = Limoneiro; MOG = Mogi-Guaçu; PRO = Promissão
e BAB = Barra Bonita. Os quatro loci produziram 46 alelos, variando de dois
(Pli60, Par21, Par43, e Par82) a seis alelos (Par12 e Par82) por locus. O
tamanho dos alelos variou de 118 pb (PL01) a 330 pb (Pli30). Verificou-se que
os dados de heterozigosidade observada média refletiram uma alta
variabilidade genética intra-populacional na maioria das populações, onde a
população MOG apresentou o maior valor (0,575), seguida de PRO (0,562),
LMO (0,550) e BAB (0,494). Os valores de Fis mostraram a presença de
endogamia nas populações MOG, PRO e BAB. Alta variabilidade genética foi
observada na população LMO que apresentou valores negativos de Fis (0,030). Os valores de distância genética mostraram que entre as populações
existem altas distâncias, principalmente entre as populações LMO e BAB. Os
resultados obtidos demonstraram que o programa de repovoamento tem
permitido a conservação genética dessa espécie em risco de extinção no rio
Tietê.
Introdução
Nas usinas hidrelétricas (UHE) no Brasil, apesar da inegável autossuficiência
em energia que é fornecida, a interrupção da migração dos peixes causada por
esse represamento é considerada um prejuízo na sua reprodução e
multiplicação nos rios (BRITTO; SIROL, 2006). Entre esses rios, pode-se citar o
Rio Tietê. Nesse importante rio, que percorre vários estados e cidades
brasileiras foram construídas várias hidrelétricas que tem gerado barreiras para
a migração de algumas espécies de peixes. Este fator, associado à
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contaminação, tem diminuído drasticamente as populações naturais de peixes,
incluindo o curimba (Prochilodus lineatus), importante espécie socioeconômica
dessa região.
Como forma de mitigar o impacto negativo da construção de UHE nas
populações de P. lineatus do rio Tietê, algumas ações tem sido realizadas,
principalmente a utilização de programas de repovoamento. Esses programas
têm destaque na atualidade por serem estratégias de conservação viáveis para
a maioria dos piscicultores, porém, deve se ressalvar a importância da
preservação da variabilidade genética das populações naturais. Quando ocorre
perda da variabilidade genética os indivíduos perdem a capacidade de
adaptação às mudanças ambientais, podendo até mesmo conduzir a espécie à
extinção. Desta forma, é necessária uma ampla discussão cientifica, onde
ferramentas como a reprodução, genética e o monitoramento permitam
determinar objetivamente a conservação de populações naturais de peixes
(LOPERA-BARRERO et al., 2007).
Assim, o objetivo deste estudo foi analisar a variabilidade genética de
populações naturais de curimba (Prochilodus lineatus) do programa de
repovoamento do rio Tietê.
Material e Métodos
Foram coletadas 38 amostras de nadadeiras de quatro diferentes
populações naturais de reservatórios localizados no rio Tietê (LMO =
Limoneiro: 4 amostras; MOG = Mogi-Guaçu: 4 amostras; PRO = Promissão: 7
amostras; BAB = Barra Bonita: 23 amostras).
Para extração de DNA foi utilizado o protocolo de extração com NaCl
descrito por Lopera-Barrero et al. (2008). Para avaliar a concentração total de
DNA, as amostras foram mensuradas usando espectrofotômetro PICODROP®
(Picodrop Limited, Hinxton, Reino Unido). O DNA foi amplificado para um
volume final de reação de 15 uL, utilizou-se 1X do tampão Tris-KCl, 2,0 mM de
MgCl2, 0,8 μM de cada primer (Forward e Reverse), 0,2 mM de cada dNTP,
uma unidade de Platinum Taq DNA Polimerase, 20 ng de DNA de cada
amostra. Inicialmente o DNA foi desnaturado a 94ºC por quatro minutos e em
seguida foram realizados 30 ciclos, cada um consistindo de 30 segundos de
desnaturação a 94ºC; 30 segundos de anelamento, sendo a temperatura
variável para cada primer e um minuto de extensão a 72ºC; após realizou-se
uma extensão final a 72ºC por 10 minutos. Foram amplificados quatro locos
descritos por Yazbeck e Kalapothakis (2007) (Pl01, Pli30, Pli43 e Pli60) e seis
locos descritos por Barbosa et al. (2006) e Barbosa et al. (2008) (Par12, Par14,
Par21, Par43, Par80, Par82), conforme temperaturas de anelamento (56°C,
66°C, 60°C, 69°C, 54°C, 48°C, 47°C, 50°C, 52°C e 52°C, respectivamente). As
reações foram conduzidas em termociclador Veriti® (Applied Biosystems®,
Austin, TX, EUA).
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As amostras amplificadas foram submetidas à eletroforese em gel de
poliacrilamida 10% desnaturante e conduzida em tampão TBE 1X com 180 V e
250 mA por oito horas. Para a visualização dos alelos microssatélites, foi
utilizada a coloração com nitrato de prata pelo método descrito por Bassam et
al. (1991) modificado. O número de alelos, a heterozigose observada e
esperada e o índice de fixação (Fis) foram calculados para cada locus usando
o programa GENEPOP 1.2. A distância genética foi calculada utilizado o
programa PopGene 1.31.
Resultados e Discussão
Os loci produziram 46 alelos, variando de dois (Pli60, Par21, Par43, e Par82) a
seis alelos (Par12 e Par82) por locus. O tamanho dos alelos variou de 118 pb
(PL01) a 330 pb (Pli30).
Verificou-se que os dados de heterozigosidade observada média
refletiram uma alta variabilidade genética intra-populacional na maioria das
populações, onde a população MOG apresentou o maior valor (0,575) seguida
de PRO (0,562), LMO (0,550) e BAB (0,494).
Os valores de Fis, que representam uma medida de desvio das
frequências genotípicas em relação às frequências panmíticas, expressas em
términos de deficiência ou excesso de heterozigotos e que também podem ser
interpretados como coeficientes de endogamia, mostraram a presença de
endogamia nas populações MOG, PRO e BAB. Alta variabilidade genética foi
observada na população LMO, a qual apresentou valores negativos de Fis (0,030). Deve destacar-se que se os valores de Fis são negativos ou próximos
de zero, significa que há variabilidade genética na população, uma vez que
existe maior número de heterozigotos e valores distantes de zero indicam
maiores valores de homozigotos.
Os valores de distância genética apresentados na Tabela 1 mostraram
que entre as populações existem altas distâncias genéticas, principalmente
entre as populações LMO e BAB (0,290). Entre as populações LMO e PRO foi
observada a menor distância genética (0,181).
Tabela 1. Distância genética de Nei (1972) entre as populações naturais de
Prochilodus lineatus.
Pop
LMO
MOG
PRO
BAB
LMO
--MOG
0,199
--PRO
0,181
0,189
--BAB
0,290
0,273
0,244
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Conclusões
Foi observada alta variabilidade genética intra-populacional nas quatro
populações e presença de endogamia em todas, com exceção de LMO. Altos
valores de distância genética determinaram que existe diferenciação genética
entre as populações analisadas.
Agradecimentos
Os autores agradecem à AES/Tietê pelo apoio financeiro e aos Núcleos de
Pesquisa Peixegen e Nepag.
Referências
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BASSAM, B.J., CAETANO-ANOLLÉS, G., GRESSHOFF, P.M. Fast and
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